WWW.KONFERENCIYA.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Конференции, лекции

 

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 7 |

«АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы V-й Всероссийской (с международным участием) студенческой научной конференции 25 – 26 апреля 2012 года Ульяновск – ...»

-- [ Страница 4 ] --

Иммунологическое обследование животных включало: определение цитотоксической активности и антителозависимой цитотоксической активности лимфоцитов и макрофагов, кооперативной цитотоксической активности эффекторных клеток; кооперативной антителозависимой клеточной цитотоксичности лимфоцитов и макрофагов; иммуноферментный анализ образованных специфических антител.

В предыдущих исследованиях нами было проведено определение эффективности применения различных адъювантов в составе противоопухолевых вакцин на интактных животных. Исследование включало следующие вещества, предлагаемые в качестве адъювантов: цитотоксические белок содержащие метаболиты В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 18, кДа; цитотоксические белок содержащие метаболиты В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 70 кДа; микробные клетки БЦЖ; пептидогликан из клеток S. Аureus; смесь липидов, полученных из клеток В. subtilis B-7025;

коллоидное серебро; суспензия Fe3O4.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии На основе результатов исследования различных показателей иммунной системы мышей, было показано, что среди всех предложенных веществ лучшими адъювантным свойствами обладают белок содержащие метаболиты В.

subtilis B-7025 с молекулярной массой 18,5 и 70 кДа. Поэтому именно эти компоненты из фильтрата культуральной жидкости В. subtilis B-7025 были выбраны нами для дальнейших исследований на экспериментальной модели карциномы легкого Льюис у мышей.

Установлено, что у мышей с КЛЛ применения вакцины на основе КЭБ с метаболитом В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 70 кДа способствует усилению антителозависимой клеточной цитотоксичности лимфоцитов в 2 раза и макрофагов в 1,5 раза по сравнению с соответствующим показателями контроля. Она же была и наиболее эффективной по влиянию на клеточные реакции иммунной системы у прооперированных мышей с КЛЛ. Это выражалось в росте цитотоксической активности макрофагов в 2 раза по сравнению с соответствующими показателями контрольных животных с хирургически удаленной опухолью. Выяснено, что клеточное звено иммунного ответа у мышей с опухолевым процессом эффективно стимулирует вакцина на основе КЭБ и метаболита В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 18,5 кДа.

Рис 1. Влияние иммунизации противоопухолевыми вакцинами на уровень специфических антител к антигенам опухолевых клеток у мышей с карциномой легкого Льюис.

А. Животные без хирургического удаления опухоли: I - вакцинированные животные; III, IV - группы животных, иммунизированных вакциной на основе ПК и метаболита В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 18,5 или 70 кДа, соответственно; V, VI - группы животных, иммунизированных вакциной на основе КЭБ с метаболитом В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 18,5 или кДа, соответственно.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Б. Животные, которым проводили хирургическое удаление опухоли: II контрольная группа животных проведенной операции; VII, VIII - группы животных, иммунизированных вакциной на основе ПК и метаболитом В.

subtilis B-7025 с молекулярной массой 18,5 или 70 кДа, соответственно; IX, Х группы животных, иммунизированных вакциной на основе КЭБ с метаболитом В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 18,5 или 70 кДа, соответственно.

B. XI - интактные животные При исследовании синтеза антител на опухолевые антигены КЛЛ (рис.1) наблюдали, что у мышей с карциномой легкого Льюис применения вакцин на основе белок содержащего метаболита В. subtilis B-7025 с молекулярной массой 70 кДа вызывает усиление образования антител, специфических как к антигенам опухолевых клеток, так и в куриных эмбриональных белков 1. Aucouturier J. The use of oil adjuvants in therapeutic vaccines / / Vaccine. P. 2 - 45.

2. Mesa C., Fernandez L.E. Challenges facing adjuvants for cancer immunotherapy / / Immunol. Cell. Biol. - 2004. - V. 82, № 6. -P. 644-650.

3. Herlyn D. Advances in cancer vaccine development / / Ann. Med. - 1999. - № 4. Cox J.C. Adjuvants - a classification and review of their modes of action / / Vaccine. - 1997. - № 15. - P. 248 - 256.

FUTURE PROSPECTS OF APPLICATION DIFFERENT ORIGIN IN THE

ADJUVANT BIOTHERAPY ANTITUMOR

In the article is given an information about promising approach in using of anticancer vaccines, that are made on the tumor associated antigens, which are based on the formation of specific reactions of antitumor immunity. Their action is based on the formation of specific reactions of antitumor immunity. Introduction of CEP with adjuvants, mainly with lipids of B. subtilis B-7025, induces the formation of specific antibodies in the serum of animals. These data suggest the feasibility study of lipids as potential immunomodulating agents for their further use in oncology practice.

УДК 619:

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БАЗИДИАЛЬНОГО МАКРОМИЦЕТА

PIPTOPORUS BETULINUS

Бурык О.В., 5 курс, биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: д.б.н., проф. Карпов А.В.

Национальный университет пищевых технологий г. Киев Получение экологически чистых, физиологически функциональных пищевых продуктов, а также оздоровительных и лечебно-профилактических препаратов является чрезвычайно актуальной проблемой современности.

Учитывая это, исследования грибов с лекарственными свойствами, что по Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии современным данным имеют иммуностимулирующее, противоопухолевое и антивирусное действия заслуживает особого внимания. Грибам-трутовикам принадлежит главная роль в разрушении лесной опади, и как следствие этого процессе круговорота веществ в природе. Они очищают почву от опавшего листья, хвои, веточек. Также выявлен ряд биологически-активных веществ, в плодовых телах, имеющих как профилактические, так и лечебные эффекты.



Наиболее известным среди рода Piptoporus является Piptoporus betulinus (Bull.) P.Karst (березовая губка) – вид, который встречается только на березе и только, как сапротроф.

В результате проведенных исследований было установлено, что экстракты мицелия P. betulinus обладают противоопухолевой [2], противовирусной [4] и антибактериальной активностью [3]. Также были обнаружены противовоспалительные свойства полипореновой кислоты, синтезируемой в результате жизнедеятельности гриба. P. betulinus, также используют как укрепляющее средство, которое увеличивает сопротивляемость организма [1].

Целью данного исследования было выделение чистых культур лекарственного макромицета P. betulinus, собранного на территории Украины.

Установления микроморфологических признаков вегетативного мицелия, морфологии мицелиальных колоний, динамики роста культур на агаризованных питательных средах различного состава, воздействия температуры инкубации и рН среды на рост и жизнеспособность вегетативного мицелия штаммов P.

betulinus и установления оптимальных и критических температур инкубации для роста культур.

В результате исследования, были выделены чистые культуры P. betulinus из образцов собранных на территории Киевской области в период их массового плодоношения (сентябрь – октябрь). Выделенным штаммам было присвоено следующие номера: 1554, 1555, 1556, 1647, 1648, 1650 и 2020. Все полученные штаммы пополнили Коллекция культур шляпочных грибов (ИБК) Института ботаники им. М.Г. Холодного НАН Украины.

Проведенное исследование микроморфологии вегетативного мицелия культуры P. betulinus с использованием сканирующей электронной микроскопии позволило установить наличие у всех штаммов характерных для этих видов микроструктур: пряжек, а также многочисленных анастомозов и мицелиальных тяжей.

Для скрининга перспективных штаммов P. betulinus исследовали их морфолого-культуральные характеристики на агаризованных средах различного состава: сусло агар (СА), картофельно-декстрозный агар (КДА), глюкозо-пептон-дрожжевой агар (ГПДА) и мальц экстракт агар (МЭА).

Оценивали рост колонии на определенной среде по скорости радиального роста, а также использовали дополнительные показатели роста вегетативного мицелия (плотность и высоту колоний), что позволило охарактеризовать пригодности определенной среды для роста исследованных культур и целесообразность их использования.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Установлено, что рост мицелия происходил на всех испытанных средах.

Для большинства исследованных штаммов максимальную скорость роста обеспечила среда (КГА) при температуре 26±0,1° С, высокими показателями (15,01 ± 0,2 и 18,0 ± 0,4 мм / сутки) отразились штаммы P. betulinus 1650 и 2020.

Согласно установленных значений радиальной скорости роста, изучаемые культуры P. betulinus можно отнести к группе грибов, которые растут со средней скоростью. Температурный оптимум роста вегетативного мицелия P.

betulinus – 26±0,1°С.

Для культивирования культуры P. betulinus в лабораторных условиях рекомендуется использовать среды КГА и МЭА при температуре инкубации – 26±1°С. Критической температурой роста вегетативного мицелия для P.

betulinus была 36±1°С, при которой культура полностью теряли свою жизнеспособность. В условиях пониженной температуры (4±0,1°С), независимо от состава среды, наблюдался очень медленный рост. Однако колонии сохраняли свои основные морфологические признаки.

Состав питательных сред и температура не влияли в значительной степени на морфологию мицелиальных колоний. На всех средах формировались колонии белого цвета с равным или слегка волнистым краем, цвет реверзуму совпадал с цветом среды. На среде СА формировались густые колонии белого цвета с множеством переплетенных гиф. Характер роста колоний на среде ГПДА и МЭА отличался умеренным опушкой, белого цвета, ростом по всей плоскости чашки, края немного волнистые. На среде МЭА опушки колоний усиливалось от центра к периферии. На среде с КГА формировались перистые колонии белого цвета с бесчисленным количеством переплетенных гифов с ровными краями. На 25 сутки при культивировании культур в условиях освещения на чашках Петри наблюдали образование примордий – зачатков плодовых тел.

Было установлено, что рН среды в процессе роста культур снижался до значений 3,7-4,2. Рост мицелия исследованных культур наблюдали в диапазоне рН 4,0-7,0. Благоприятным для активного роста всех исследованных штаммов является рН в пределах 5,0 – 5,5. При этих значениях рН для штаммов 2020 и 1656 выход биомассы составил более 4,3 г/л на 14-е сутки культивирования в стационарных условиях. При значениях рН среды выше 7,0 рост культуры не наблюдался.

Результаты экспериментальных исследований, полученные при выполнении работы, расширяют фундаментальные знания о биологических свойствах штаммов Piptoporus betulinus в чистой культуре. Они существенно пополняют банк данных штаммов лекарственного макромицетов, хранящихся в Коллекции культур шляпочных грибов Института ботаники им. М.Г.





Холодного НАН Украины (ИБК), создавая научные основы их дальнейшего практического использования в отечественной биотехнологии.

1. Денисова Н.П. Лечебные свойства грибов. Этномикологический очерк. – Санкт-Петербург: Изд-во СПбГМУ, 1998. – 60 с.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 2. Keller C, Maillard M, Keller J, Hostettmann K. Screening of European fungi for antibacterial, antifungal, larvicidal, molluscicidal, antioxidant and freeradical scavenging activities and subsequent isolation of bioactive compounds // Pharm. Biol. – 2002. – № 40. – Р. 18–25.

3. Schlegel B., Luhmann U., Hartl A. Piptamine, a new antibiotic produced by Piptoporus betulinus Lu 9-1 // J. Antibiot. – 2000. – № 9. – Р. 13–24.

4. Kandefer-Szerszen M., Kawecki Z. Ether extracts from the fruiting body of Piptoporus betulinus as interference inducers // Acta. Microbiol. Pol. – 1991. – 5. Соломко Е.Ф., Ломберг М.Л., Митропольська Н.Ю. Ріст видів лікарських макроміцетів на поживних середовищах різного складу // Укр. ботан.

журн. – 2000. – № 2. – с. 119–126.

THE BIOLOGICAL PECULIARITIES OF BASIDIOMYCETE

MACROMYCETES PIPTOPORUS BETULINUS

In the article there is given information about the biological peculiarities of the fungi of Piptoporus. For these studies has been established dynamics of crop growth on nutrient media of different composition, the impact of incubation temperature and pH on the growth and viability of the vegetative mycelium of strains of P. betulinus and establish the optimal incubation temperature and critical for the growth of crops.

УДК

АКТУАЛЬНОСТЬ РАЗРАБОТКИ И ОБЕСПЕЧЕНИЯ КАЧЕСТВОМ

БИОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

Белорус О.А., 5курс, факультет биотехнологии и экологии Научный руководитель: к.т.н., доцент Антонюк М.М.

Национальный университет пищевых технологий г. Киев Лекарственные средства – это специфический продукт, качество которого потребитель не имеет возможности оценить самостоятельно, поэтому гарантия их эффективности, безопасности и качества является одной из важнейших задач фармацевтической отрасли на современном этапе ее развития.

Увеличение спроса на биологические лекарственные средства связано с тем, что большинство препаратов данной генерации потеряют патентную защиту уже в 2015 году. Прежде всего это касается биопрепаратов, активным веществом которых являются рекомбинантный соматропин, инсулин, урокиназа, интерфероны, эритропоэтины. Данная ситуация является главным фактором, обусовливающим разработку новых биотехнологических лекарственных средств, и появление на рынке нового класса фармацевтических продуктов – биосимиляров.

В отличии от химических лекарственных средств, биотехнологические препараты характеризуются сложной структурой и неоднородностью молекулы, высокой молекулярной массой, биологической активностью, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии стабильностью, а также иммуногенностью. Существенные трудности вызывают технологии очистки белка, специфические методы контроля качества.

Проблема безопасности биологических лекарственных препаратов связана прежде всего с тем, что применение лекарственных средств с высокой активностью, часто сопровождается возникновением побочных реакций различных по проявлением и степени тяжести. Безопасность таких препаратов формируется на стадии фармацевтической разработки, обеспечивается в процессе промышленного производства, изучается на стадии доклинических и клинических исследований, оценивается на этапе регистрации, а мониторинг проводится на протяжении всего их жизненного цикла.

В общем, можно выделить следующие задачи, которые позволят обеспечить качество биологических лекарственных препаратов:

создание системы управления качеством всего цикла обращения путем внедрения требований GLP, GCP, GMP, GDP, GPP;

обеспечение проведения аккредитаций учреждений, которые проводять диклинические и клинические испытания, сертификации предприятий и организаций;

приведение в соответствие с директивами ЕС нормативно-правовых актов о госудаственной регистрации биологических препаратов и биосимиляров;

постоянное обеспечение издания дополнений к Государственной фармакопеи и ее переиздания;

обеспечение развития системы фармнадзора.

Очевидно, что соблюдение изложенных положений и правил не только будет гарантировать качество, безопасность и эффективность биологических лекарственных средств, а также предоставит отечественным производителям возможность выхода на международные рынки.

RELEVANCE OF THE DEVELOPMENT AND MAINTENANCE OF

BIOLOGICALQUALITY DRUGS

The work is devoted to the theme of the relevance of development and ensure the qualityof biological medicines. Drugs - is a specific product, whose quality the consumer has no opportunity to evaluate itself, and therefore a guarantee of their effectiveness, safety and quality is one of the most important tasks of the pharmaceutical industry at the present stage of its development.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 573.6.086.83:577.112.3; 579.66'112.

СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ

БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПРОИЗВОДСТВА

АМИНОКИСЛОТ

факультет биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: к.т.н., доцент Пенчук Ю.Н.

Национальный университет пищевых технологий г. Киев Аминокислоты можно получать химическим синтезом, гидролизом природных белков, микробиологическим синтезом и трансформацией предшественников аминокислот с помощью микроорганизмов или ферментов, выделенных из них.

Синтез целого ряда аминокислот химическим путем хорошо изучен и введен в производство. Во многих случаях такое производство экономически выгодно. Но в процессе химического синтеза преимущественно образуется рацемат - смесь D-и L-форм аминокислот.

D-форма не имеет физиологической ценности для человека и животных:

она не включается в обмен веществ и не усваивается. Очистка продукта от Dформы приводит к значительным экономическим издержкам и усложнения производства.

Преимущественно химическим путем в промышленности производится глицин, D,L-метионин, L-фенилаланин, L-валин, L-треонин, L-триптофан [1].

Перспективным методом получения L-аминокислот является разделение рацематов аминокислот путем ассиметричного гидролиза их производных с использованием микроорганизмов, обладающих специфической L-ацилазной, L- амидазной, L- эстеразной активностью.

Ферментативное разделение рацематов аминокислот с L-ацилазами основано на избирательном гидролизе ацилированных производных Lаминокислот. При отщеплении ацильной группы L-аминокислоты становятся более растворимыми и легко отделяются от малорастворимых ацилированных D-аминокислот. Не прореагировавшие производные D-аминокислот могут быть подвергнуты рацемизации и вновь использованы для ферментативного разделения [3].

Физиологически активные L-формы получают в промышленном масштабе путем кислотного и щелочного гидролиза природных белков.

Наиболее подходящей сырьем для процесса являются отходы различных производств, в том числе непищевых (например, кератинсодержащие отходы).

Но этот метод имеет определенные недостатки: высокая стоимость процесса гидролиза, сложность удаления необходимой аминокислоты из смеси аминокислот гидролизата, разрушение части аминокислот в процессе гидролиза и ограниченность сырьевых ресурсов. Преимуществом способа является трансформация отходов непищевых производств в полезный продукт.

Производство аминокислот из белкового гидролизата, как способ получения L-аминокислот в настоящее время имеет лишь ограниченное значение, хотя поАктуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии прежнему является основным для производства L-серина, L-пролина, Lоксипролина и L-тирозина, он не подходит для крупномасштабного производства аминокислот [1].

Ферментативный синтез аминокислот основывается на процессах с использованием выделенных в индивидуальном виде ферментов, как правило, закрепленных (иммобилизованных) на инертном носителе.

Процесс получения аминокислот заключается в синтезе предшественника аминокислоты и последующей его трансформации в целевую аминокислоту с использованием либо выделенных ферментов, либо микроорганизмов.

Таблица 1 – Способы синтеза L-аминокислот с использованием ферментов Коричная кислота Фенилаланинаммиаклиаза L-фенилаланин Фенилпировиноградная и L-аспарагиновая кислоты -Кето и -оксикислоты Дегидрогеназа L-аминокислоты Фенол, пировиноградная кислота, аммиак Индол, пировиноградная кислота, аммиак -Хлор-L-аланин, сульфид Для производства L-метионина используется метод, в котором применяется ацилаза из Aspergillus оryzae в ферментном мембранном реакторе (ФМР). Получение нескольких сотен тонн L-метионина и L-валина проводится ежегодно с использованием ФМР технологии. Был предложен новый ферментативный путь получения L-метионина. Он состоит из ферментативного превращения D,L-метионина с помощью фермента, оксидазы D-аминокислоты и дегидрогеназы лейцина, оба из которых могут быть проявлены в рекомбинантном штамме Escherichia coli.

L-аспарагиновая преимущественно производется ферментативно. Аспартаза при добавлении аммиака к фумаровой кислоте катализирует прямое преобразование в Lаспартат, который нужен в больших количествах для подсластителя аспартама.

L-аспартат является также исходным материалом для ферментативного Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии производства L-аланина с использованием иммобилизованной аспартат-декарбоксилазы.

Для L-цистеина, который ранее производился главным образом путем электрохимического восстановления L-цистина полученного гидролизом белков, существует промышленный ферментативный процесс, в котором производная тиазолина D,L-2-амино-2-тиазолин-4-карбоновая кислота (АТК) превращается с помощью трех ферментов (L-ATC гидролазы, S-карбамоил-Lцистеин гидролазы и АТК рацемазы) с Pseudomonas thiazolinophilum.

Ферментативные методы имеют ряд преимуществ:

Высокая концентрация веществ в смесях, перерабатываемых, приводит к значительному уменьшению габаритов оборудования, используемого, а также к упрощению процессов выделения и очистки полупродуктов и целевых продуктов синтеза.

Отсутствие опасности заражения технологической линии посторонними микроорганизмами и, как следствие, возможность проведения процесса в нестерильных условиях (но требования к чистоте исходного сырья и технологических линий при работе с ферментами высокие).

Широкое применение ферментов в крупномасштабном производстве ограничено их труднодоступностью и высокой стоимостью, низкой стабильностью и чувствительностью даже в иммобилизованном виде ко многим внешним факторам [3].

Микробиологический метод получения аминокислот, наиболее распространенный в настоящее время, основан на способности микроорганизмов синтезировать все L-аминокислоты, а в определенных условиях – обеспечивать их сверхсинтез. Биосинтез аминокислот в микробных клетках протекает в виде так называемых свободных аминокислот или «пула аминокислот», из которого в процессах конструктивного метаболизма синтезируются клеточные макромолекулы.

Пути синтеза большинства аминокислот взаимосвязаны. При этом одни аминокислоты являются предшественниками для биосинтеза других.

Синтез каждой аминокислоты в микробных клетках реализуется в строго определенных количествах, обеспечивающих образование последующих аминокислот, и находится под строгим генетическим контролем. Контроль осуществляется по принципу обратной связи на уровне генов, ответственных за синтез соответствующих ферментов (репрессия), и на уровне самих ферментов, которые в результате избытка образующихся аминокислот могут изменять свою активность (ретроингибирование). Данный механизм контроля исключает перепроизводство аминокислот и также препятствует их выделению из клеток в окружающую среду. Чтобы добиться сверхсинтеза отдельных аминокислот, нужно обойти или изменить данный контрольный механизм их синтеза. Для первого пути возможно использование природных «диких» штаммов; очень существенны при этом условия ферментации, так как добиться дисбаланса в системе синтеза аминокислот можно путем изменения ряда основных факторов среды (концентрация основного субстрата, рН, соотношение макро- и микроэлементов в среде и др.). Изменение контрольного механизма синтеза Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии аминокислот осуществляется генетическими методами. При этом получают мутантные организмы: ауксотрофные и регуляторные мутанты.

В последние годы для получения новых эффективных штаммов продуцентов аминокислот стали применять новейшие методы биотехнологии.

Методы генетической инженерии позволяют повышать количество генов биосинтеза путем их клонирования на плазмидах. Это приводит к увеличению количества ферментов, ответственных за синтез аминокислот, следовательно, повышает выход целевого продукта. Клонирование генов системы синтеза аминокислот в клетки микроорганизмов с иным, по сравнению с донорским организмом, типом питания позволяет расширять сырьевую базу и заменять дорогостоящие сахаросодержащие субстраты более дешевыми [1].

До сих пор большинство штаммов-продуцентов BCAA (ВСАА - от англ.

Branched-chain amino acids: L-валин, L-лейцин и L-изолейцин) были разработаны путем случайного мутагенеза. Этот классический подход был успешным, как и для других продуцентов аминокислот, но он имеет некоторые недостатки. Генетические изменения, вызванные мутагенезом, могут касаться тех частей генетического аппарата клетки, которые непосредственно не связаны с биосинтезом аминокислоты, в результате чего могут произойти нежелательные изменения в клеточной физиологии. Очень трудно осуществить дальнейшее улучшение штаммов со случайными мутациями. Лучшее решение этой проблемы является конструирование штаммов-продуцентов аминокислот с использованием методов рациональной метаболической инженерии. Чаще всего это осуществляется путем блокирования конкурирующего пути и с помощью гиперэкспрессии генов биосинтеза [2].

изготавливались в основном с помощью ферментов, теперь могут быть получить более экономически эффективным путем ферментации с использованием штаммов E. coli и, таким образом, стать более доступными для растущего рынка. Почти все протеиногенные аминокислоты, за немногими исключениями, могут быть изготовлены промышленным способом специально разработанными мутантными штаммами Corynebacterium glutamicum и E. coli [3].

1. Leuchtenberger W., Huthmacher K., Drauz K. Biotechnological production of amino acids and derivatives: current status and prospects // Appl Microbiol Biotechnol. – 2005. – Vol. 69. – P. 1– 2. Park J.H., Lee S.Y. Fermentative production of branched chain amino acids: a focus on metabolic engineering // Appl Microbiol and Biotechnol. – 2010. – 3. Takors R., Bathe B., Rieping M., Hans S. Systems biology for industrial strains and fermentation processes–Example: Amino acids // J. Biotechnology. – 2007.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии

CURRENT STATUS OF PRODUCTION OF AMINO ACIDS AS

PHARMACEUTICAL SUBSTANCES

Amino acids can be obtained by chemical synthesis, by hydrolysis from natural proteins, by microbiological synthesis and by transformation of the precursors of amino acids using microorganisms or enzymes isolated from them. This article considers the modern methods of production of amino acids and the benefits of biotechnological methods of their obtaining.

УДК 60.

ПОВЫШЕНИЕ КОНКУРЕНТОСПОСОБНОСТИ СОВРЕМЕННОГО

БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРОИЗВОДСТВА ПУТЕМ РАЗРАБОТКИ

И РЕАЛИЗАЦИИ АЛГОРИТМА ДЛЯ ВЫБОРА ОПТИМАЛЬНОГО

ФЕРМЕНТАЦИОННОГО ОБОРУДОВАНИЯ

факультет биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: к.т.н. доц. Карлаш Ю.В.

Национальный университет пищевых технологий г. Киев Текущее состояние биотехнологии в Украине и Российской Федерации характеризуется, с одной стороны, отставанием объемов производства от уровня и темпов роста стран, являющихся технологическими лидерами в этой области, а с другой – возрастающим спросом на биотехнологическую продукцию со стороны потребителей. Результатом стала высокая импортозависимость по важнейшим традиционным биотехнологическим продуктам – лекарственным препаратам и кормовым добавкам, и отсутствие на рынке собственных инновационных биотехнологических продуктов. К тому же, в нынешних условиях рыночной экономики и упадка биотехнологической отрасли остро стоит вопрос восстановления ее конкурентоспособности.

Конкурентоспособная себестоимость продукции биотехнологического производства закладывается на этапе проектирование производства. Одной из важнейших стадий в проектируемой биотехнологии является стадия биосинтеза. Учитывая это можно сказать, что ферментационные системы и оборудование представляют собой одну из основных составляющих биотехнологического процесса, как по сложности реализации, так и по влиянию на рентабельность производства. Рассматривая ферментационное оборудование биотехнологического производства важным становится решение проблем, связанных с оптимальным подбором конструктивных характеристик и технологических параметров работы ферментаторов.

Несмотря на то, что уже давно известны различные математические модели процесса периодического аэробного культивирования, существующие методы расчета и прогнозирования изменений технологических параметров ферментации до сих пор остаются несовершенными. К тому же эмпирические Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии данные, используемые для корректировки расчетных показателей, также не могут абсолютно точно описать технологические процессы. Работы по усовершенствованию вычислительных алгоритмов с целью оптимизации периодических процессов микробного синтеза с нелинейной кинетикой роста микроорганизмов еще ведутся [2, 4].

Одной из ключевых проблем использования оптимального типа ферментатора для решения конкретной биотехнологической задачи является так называемый «традиционный подход» при выборе ферментационного оборудования, когда ферментаторы выбираются по таким количественным критериям и параметрам, которые дают возможность достичь определенных технико-экономических показателей процесса, но при этом они не являются оптимальными для достижения максимальных результатов. Причиной этому послужила недостаточная координации между организациями, которые разрабатывали аппараты для схожих биотехнологических производств или продуктов. Объективная оценка сравнения таких аппаратов и их эффективности была затруднена, поскольку методики и условия испытаний достаточно часто отличались. К тому же не все проектные разработки масштабировались в промышленные установки, что делало невозможным сбор эмпирических данных с целью оценки их эффективности [3, 6].

Целью данной работы является создание и реализация алгоритма расчета глобального критерия оптимизации по выбору ферментатора для проведения периодического процесса микробного синтеза с использованием программного комплекта MathCAD. На основе расчетного критерия производится выбор ферментатора с оптимальными характеристиками из заданной совокупности возможных биореакторов, которые находятся в систематизированном и структурированном виде в созданных базах данных.

В качестве глобального критерия оптимизации был использован аддитивный технико-экономический критерий :

– критерий, учитывающий затраты на использованный субстрат и другие компоненты питательной среды;

– критерий, учитывающий эксплуатационные затраты на проведение ферментации;

– критерий, учитывающий капитальные затраты на приобретение и эксплуатацию ферментатора.

– удельный расходный коэффициент i-го компонента питательной среды, рассчитывается по стехиометрическим коэффициентам биореакции и экономическому коэффициенту Yx/s;

– цена i-го компонента питательной среды.

– затраты энергии на аэрацию и перемешивание;

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии – рабочий объем ферментатора;

– концентрация микроорганизмов на выходе биореактора;

– длительность ферментации;

– цена за использованную электроэнергию.

Связь с технологическими параметрами реализована через расход воздуха и гидродинамические условия перемешивания в биореакторе, обеспечивающие заданный режим ферментации.

и определяются в ходе моделирования процесса периодического культивирования по модели Моно (в простейшем случае).

– коэффициент окупаемости.

Капитальные затраты определяются с учетом геометрических характеристик, массы аппарата, количества материала, сложности изготовления [1, 5].

Математическая модель представлена системой уравнений для описания процесса культивирование микроорганизмов в ферментаторе периодического действия с интенсивной аэрацией и перемешиванием на основе модели Моно и модели идеального перемешивания среды при лимитировании процесса роста концентрациями субстрата и растворенного кислорода.

В качестве локального критерия при выборе ферментаторов был выбран объемный коэффициент массопередачи Kla, указывающий на возможность обеспечения объема питательной среды необходимым количеством кислорода с помощью данного аппарата.

Нами были систематизированы и перенесены в базы данных методики расчетов использованной энергии на перемешивание и аэрацию, методики расчетов объемного коэффициента массопередачи Kla для ферментаторов различных типов (с подводом энергии газовой, жидкой и комбинированными фазами).

Разработанная нами программа является интерактивной и динамической, то есть диалог между базами данных и программой организован таким образом, что программа играет роль инструмента для расчетов, а вся информация (на сколько это возможно) организована в виде таблиц баз данных, которые легко можно изменять и пополнять. Разработанную программу легко модернизировать, поскольку код программы открыт, а база данных реализована в доступном для большинства пакете MS Excel.

1. Быков В.А. и др. Расчет процессов микробиологических производств / В.А. Быков, А.Ю. Винаров, В.В. Шерстобитов. – К.: Техніка, 1985. – 245с.

2. Виестур У.Э., Кристапсонс М.Ж., Былинкина Е.С. Культивирование микроорганизмов. – М.: Пищевая промышленность, 1980. – 232 с.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 3. Виестур У.Э., Кузнецов А.М., Савенков В.В. Системы ферментации. – Рига: Зинатне, 1986. – 174 с.

4. Гордеева Ю.Л., Ивашкин Ю.А., Гордеев Л.С. Алгоритмы расчета показателей процесса микробиологического синтеза в периодических условиях культивирования // Вестник Астрахан.гос.техн.ун-та. Сер:

Управление, вычислительная техника и інформатика. – 2011. – №2. – С.7Дворецкий С.И., Дворецкий Д.С., Муратова Е.И., Ермаков А.А.

Компьютерное моделирование биотехнологических процессов и систем.

Тамбов: Изд-во ТГТУ, 2005. – 80 с.

6. Плаксин Ю.М., Малахов Н.Н., Ларин В.А. Процессы и аппараты пищевых производств. – 2-е изд., переработано и дополнено. – М.: КолосС, 2007. –

IMPROVING THE COMPETITIVENESS OF MODERN BIOTECHNOLOGY

PRODUCTION BY DEVELOPING AND IMPLEMENTING OPTIMAL

ALGORITHM FOR SELECTION OF FERMENTATION EQUIPMENT

This article summarizes information about the problem of choosing the optimal fermentation equipment for achieving the necessary productivity of producing the product with minimum cost. To solve this problem, we developed and implemented in MathCad the algorithm of optimal choice of fermenters from different types.

As a global optimization criterion we selected F total, which includes the cost of the used substrate, the cost of the used energy for mixing and aeration, and the the cost for equipment purchasing. As local criterion for the selection of equipment we selected the volumetric mass transfer coefficient of oxygen.

УДК

ОЧИСТКА ПОЛИСАХАРИДОВ HAEMOPHILUS INFLUENZAE ТИПА b С

ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГИДРОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ И

ТАНГЕНЦИАЛЬНОЙ УЛЬТРАФИЛЬТРАЦИИ

Гергель М.В., 5 курс, факультет биотехнологии та экологического контроля Научный руководитель: доцент Карлаш Ю.В.

Национальный университет пищевых технологий г. Киев Бактерии вида Haemophilus influenzae представляют собой основную причину заболеваемости и смертности от пневмонии, менингита и сепсиса среди детей грудного и раннего возраста, особенно в развивающихся странах.

Эта бактерия, которая может обитать в верхних дыхательных путях практически здорового человека и в отдельных случаях может привести к развитию патологического процесса. Вид бактерии H. influenzae подразделяется на шесть серотипов (a-f). Кроме того, существует много не типируемых штаммов. Самым важным из серотипов является серотип b, называемый Hib.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Фактически все случаи заболевания менингитом, вызванным H. influenzae, связаны с Hib.

В процессе роста H. influenzae образует капсульную структуру, содержащую полисахариды. Капсульные антигены играют важную роль в вирулентности и иммуногенности бактерий. Структура капсульного полисахарида установлена как 3-В-D-рибофунарозил(1-1)–D-рибитол-5-фосфат.

Такие полисахариды представляют собой эффективные вакцинные антигены [1, 2].

Традиционный способ получения очищенных полисахаридов включает в себя: культивирование микроорганизмов, их концентрирование центрифугированием, экстракцию капсульного полисахарида солевым раствором с полимерным детергентом – цетавлоном, спиртовое фракционирование. Затем полученный капсульный полисахарид конъюгируют с помощью сложных химических реакций с белком, в качестве которого используют столбнячный или дифтерийный анатоксины. Однако этот способ является сложным в исполнении, многоэтапным и требует применения сложных химических методов конъюгации с использованием токсичных реагентов, что делает этот способ опасным, и кроме этого, требует специфических методов контроля количества остатков применяемых реактивов и реагентов [3].

Одним из способов очистки полисахаридов H. influenzae, предложенный учеными из института Бразилии (Centro de Biotechnologia, Instituto Butantan, Sao Paulo, Brazil), является использование гидролитических ферментов и тангенциальной ультрафильтрации, которые в значительной степени уменьшают количество этанола при осаждении. Депротеинизация фенолом в этом случае была также заменена ферментативной обработкой и центрифугированием – ультрафильтрацией в присутствии катионных детергентов [4].

Цель данной работы – оценка эффективности очистки полисахаридов H.

influenzae с использованием гидролитических ферментов и тангенциальной ультрафильтрации.

В процессе очистки стремятся получить продукт «с заданными показателями при максимальной прибыли и минимизации стоимости процесса».Для достижения этой цели рассматриваются различия между физико-химическими свойствами продукта, а также примеси, образующиеся при проведении культивирования.

Загрязняющими веществами при очистке полисахарида Ніb-инфекции являются: белки, нуклеиновые кислоты, пигменты и другие полисахариды, например, полисахариды клеточной стенки или липополисахариды [3].

Из полученных результатов, которые представлены в табл.1, можно сделать вывод, что необходимый продукт (PRP) находится в малом количестве по сравнению с примесями (липополисахариды, белки, нуклеиновые кислоты и т.д.), характеризующие относительную чистоту (RPХХ=мг PRP/мг ХХ, где ХХ протеин (Prt), нуклеиновые кислоты (NA), липополисахариды (KDO)). Фактор очистки (РF) показывает, во сколько раз относительная чистота продукта Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии увеличивается по отношению к начальному состоянию (РF=RPstep/RPпочат). Для оценки выделения липополисахаридов (LPS) введена величина KDO. Это число, показывающее количество 2-кето-3-дезоксиоктоновой кислоты из которой состоит трисахарид (R-сердцевидная зона) всех LPS [4].

Результаты очистки PRP от белков при ультрафильтрации на мембранах с порогом отсечения 100 кДа показали, что РFProt=3.7 i RPProt=0.87 (1 мг PRP на мг белка). Малые молекулы из культуральной среды, соли и другие молекулы меньше, чем 100 кДа, легко могли пересекать мембрану. Очистка на этом этапе составила 75% (данный показатель является самым низким по сравнению с очисткой полисахаридов Streptococcus pneumoniae i Neisseria meningitides от белков). При осаждении 30% раствором этанола очистка по отношению к белкам составляет PFPrt=0,9. Второй шаг осаждения этанолом (80%), после ресуспендирования в воде, показал также небольшой уровень очистки PFPrt = 3,2. Лучший результат был достигнут после ферментативного гидролиза (протеазами), где белки с молекулярной массой более 100 кДа гидролизуются и в результате малые пептиды отфильтровываются на мембранах с размером пор 100 кДа (2СТUF100): RPProt = 51,8 и PFprot = 20,1 [4].

Фракц PRP При очистке полисахарида от нуклеиновых кислот на первом этапе (1СТUF 100) было получено PFNA = 6,6. Многие компоненты со спектром поглощения 260 нм были легко устранены ультрафильтрацией. При осаждении с этанолом 30% получили PFNA = 8,5, что по сравнению с очисткой белков дало лучший результат. Высокая степень очистки от нуклеиновых кислот наблюдалась при обработке нуклеазами (бензоазамы) – 2СТUF 100 кДа: RPNA = 579.91 и PFNA = 69.4. Кроме этого ферменты гидролизуют остатки геномной ДНК, РНК и других олигонуклеотидов [4].

Относительно LPS, то при диафильтрации на мембранах с порогом отсечения 100 кДа не произошло значительной очистки – 16% против 80-90% при ликвидации нуклеиновых кислот с белками. При осаждении этанолом, LPSагрегаты ведут себя как полисахариды. Поэтому очистка осуществляется в Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии взаимодействия жирных кислот липидных частей и хелатобразователя (EDTA).

Это позволяет уменьшить взаимодействие между агрегатами и отделить их с образованием низкомолекулярных мономеров [4].

В процессе очистки полисахарида Ніb-инфекции на каждом шаге наблюдалось значительное снижение загрязняющих веществ. Однако высокий результат для трх веществ (белки, нуклеиновые кислоты, липополисахариды) было получено при ферментативном гидролизе: РFProt = 16,6, PFNA = 70 и KDO с устранением на 95% [4].

Из вышеизложенного можно сделать вывод, что разработанный процесс с применением гидролитических ферментов и тангенциальной ультрафильтрации значительно снижает количество этанола при осаждении, но полностью заменить его ферментативной обработкой/ультрафильтрацией не позволяет.

При использовании только ферментативной обработки/ультрафильтрации данный продукт не достигал заданной степени очистки. Осаждение фенолом и ультрацентрифугирование были заменены ферментативной обработкой плюс ультрафильтрацией в присутствии хелатагента и детергента. Новый метод имеет преимущество в том, что не использовались токсичные и агрессивные растворители, кроме этого такой процесс значительно дешевле. Следует также отметить, что этот простой, эффективный и экологически чистый метод может быть легко расширен и развит [3,4].

1. Апарин П. Г. Полисахаридные вакцины против бактериальных инфекций:

Автореф. дис. на соискание ученой степени д-ра. мед. наук - Москва, иммунобиологическом препаратов. - М.: Изд. «Фармитэк», 2008. - 312 с.

3. Goncalves V. M., Takagi M., Carmo T.S. Simple and efficient method of bacterial polysaccharides purification for vaccines production using hydrolytic enzymes and tangential flow ultrafiltration / / Appl. Microbiol. Biotechnol. P. 450-457.

4. Takagi M., Barbosa R. Purification of capsular polysaccharide produced by Haemophilus influenzae type b through a simple, efficient and suitable method for scale-up / / Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2008. - 35. - P. 1217-1222.

PURIFICATION OF POLYSACCHARIDE HAEMOPHILUS INFLUENZAE

TYPE b USING HYDROLYTIC ENZYMES AND TANGENTIAL FLOW

ULTRAFILTRATION

Haemophilus influenzae type b is a Gram-negative bacterium that causes meningitis infections in infants less than five years old. The capsular polysaccharide of H. influenzae type b has been purified and conjugated to a protein to produce a very effective vaccine in children.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 662.7:663.

БИОТЕХНОЛОГИИ АЛЬТЕРНАТИВНЫХ ИСТОЧНИКОВ ЭНЕРГИИ

Донец О.С., 5 курс, факультет биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: к.т.н., доцент Красинько В.О.

Национальный университет пищевых технологий, г. Киев, Украина Энергетические потребности человечества покрываются за счет нефти на 36%, угля – 29%, газа – 24%, ядерного топлива - 7%. В условиях резкого уменьшения запасов минеральных видов топлива и ограниченных возможностей наращивания природных возобновляемых энергетических ресурсов (гидроэнергия, солнечная и ветровая энергия и т.д.), использование энергии биомассы (эффективность аккумуляции солнечной энергии составляет от 0,8% - в полевых условиях, до прогнозируемых 5% - в условиях обеспечения высокого уровня агротехнологий) для производства твердых, жидких и газообразных топлив приобретает актуальное значение. С помощью механических, химических, термических, биологических или комплексных технологических процессов биомассу в условиях агропромышленных предприятий на новейшем оборудовании трансформируют в газовое (биогаз), жидкое (дизельное биотопливо и биоэтанол) или твердое (топливные брикеты, гранулы из соломы и т.п.) биотоплива [1].

Проблема использования альтернативных источников энергии из возобновляемого сырья становится все более актуальной для современного общества как в связи с энергетическим кризисом, так и состоянием экологии.

Биоэтанол - это бесцветная жидкость, биодеградабельна, мало токсичен и продукты распада которого не загрязняют окружающую среду. Этанол имеет высокое октановое число. При смешивании с бензином (или газолином) оксигенеруе топливную смесь, обеспечивая более полное сгорание и уменьшение выброса загрязнений. В США наиболее распространенной является марка E10, или «газохол» (10% биоэтанола + 90% бензинового топлива). Конструктивных изменений в двигателях автомобилей при этом не требуется.

Биогаз – это газ, получаемый с помощью анаэробной метановой ферментации биомассы. В состав биогаза входят 55... 65% метана, 35... 45% двуокиси углерода, по 1% водорода и сероводорода, незначительные примеси азота, аммиака, ароматических и галоген-ароматических углеводородов [3].

Производство биогаза экономически выгодно и экологически целесообразно, особенно при переработке постоянного потока отходов - стоков животноводческих ферм, скотобоен, растительных отходов). В связи с этим промышленное получение биогаза получило значительное распространение в странах Европы (Германия, Дания, Швейцария), США и Азии (Китай, Индия, Вьетнам) [5].

Согласно расчетам, в среднем 1 тонна навоза или другой биомассы, которая подвергается метаногенеза, дает около 500 м3 биогаза, который энергетически эквивалентное 350 л бензина. [3].

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Биодизель, или биодизельное топливо - это экологически чистый вид топлива, получаемый из растительных масел, животных жиров и липидов микроорганизмов. Биодизель является альтернативой минеральным видам энергоносителей и используется для замены обычного дизельного топлива [4].

С химической точки зрения биодизель представляет собой метиловый эфир. В процессе его производства в процессе этерификации масла и жиры вступают в реакцию с метиловым спиртом и щелочью, катализатором, в результате чего образуются метиловые эфиры жирных кислот, а также основной побочный продукт - глицерин. Французская компания Ахе разработала принципиально новую технологию производства биодизеля, основанную на использовании гетерогенного катализа [2].

Биодизель может использоваться в обычных двигателях внутреннего сгорания как самостоятельно, так и в смеси с обычным дизтопливом, без внесения изменений в конструкцию двигателя.

Микроводоросли – одноклеточные «фабрики», преобразующие солнечную энергию и углекислый газ на биотопливо, продукты питания, корма и ценные биологически активные компоненты. Водоросли - динамичные растения в мире, могут удваивать свою массу несколько раз в день.

Микроводоросли содержат рекордное количество масла (до 80%), чему нет аналогов в растительном мире.

Преимущества использования водорослей в процессах получения биотоплива [6]:

1. Водоросли не относятся к пищевой биомассы, поэтому ее использование для производства топлив не представляет угрозы продовольственной безопасности.

2. Скорость роста водорослей в 20-30 раз превышает скорость роста наземных растений (некоторые виды водорослей могут удваивать свою массу несколько раз в сутки).

3. Производительность водорослей по маслу с гектара площади превышает в 15-100 производительность таких высокомасличных растительных культур как рапс, пальма, соя или ятрофа.

4. Отсутствие твердой оболочки и практическое отсутствие лигнина делает переработку водорослей в жидкие топлива значительно проще и эффективнее по сравнению с переработкой растительной биомассы.

5. Водоросли характеризуются неприхотливостью: растут в пресной, соленой воде или промышленных стоках, где используются для их 6. Водоросли являются технологической культурой: разработаны и введены в эксплуатацию современные высокопроизводительные промышленные биореакторы или фотобиореакторов за искусственного освещения для их выращивания; культивирования также проводится в открытых резервуарах на непригодных для растениеводства почвах, включая Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 7. Фотобиореакторов легко встраиваются в технологические линии существующих промышленных предприятий (ТЭЦ, нефтехимические производства, цементные заводы).

8. Водоросли уменьшают эмиссию углекислого газа.

Необходимое оборудование для выращивания микроводорослей достаточно простое в техническом оформлении и экслуатации. Установка для выращивания биомассы водорослей представляет собой полностью автоматизированную систему фотобиореакторов, работающих в полунепрерывного режиме, она представляет собой замкнутую систему, где контролируются все параметры роста культуры микроводорослей.

Компания Green Star Products разработала гибридную систему выращивания водорослей в прудах (Hybrid Algae Production System). Обычные водоросли живут при температуре воды около 30 ° С, Chlorella vulgaris zx- выживает при температуре около - 44 ° С. Chlorella vulgaris zx-13 также продемонстрировали высокую устойчивость к повышенному содержанию солей в воде. Для выращивания этих водорослей необходима определенная территория. С этой целью можно использовать земли, не пригодные для выращивания пищевых сельхозкультур [8].

Для получения липидной фракции осуществляют разрушение клеточных оболочек микроводоросли Chlorella в аппарате создает вихревое электромагнитное поле с ферромагнитными частицами, которые хаотично движутся и влияют на сырье. Подвергают полученную суспензию биомассы экстракции органическим растворителем (нефрас-С 2-70/85, хлороформ, четыреххлористый углерод) с наложением импульсно-кавитационного воздействия в роторном импульсно-кавитационного аппарате. Данный пособ позволяет получить липидную фракцию из биомассы микроводорослей с высоким выходом (90%) и использовать ее в дальнейшем как сырье для биодизеля. Обезжиренная биомасса содержит смесь остатков оболочек и клеточного белка в легкоусвояемой форме, которую можно использовать как кормовую добавку [7].

1. Блюм Я.Б., Гелетуха Г.Г., Григорюк И.П., Дубровин В.А., Емец А.И.

Новейшие технологии биоенергоконверсии: Монография / - М.: «Аграр Медиа Групп», 2010. - 326 с.

2. Василов Р.Г. Перспективы развития производства Биотопливо в России.

Сообщение 1: биодизель / / Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. - 2007. - Т. 3. - № 1. - С. 47-54.

3. Василов Р.Г. Перспективы развития производства Биотопливо в России.

Сообщение 3: биогаз / / Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. - 2007. - Т. 3. - № 3. - С. 54-61.

4. Вишлина Р.И., Петров П.В., Босаковська В. Г.. Перспективы и проблемы производства дизельного биотоплива в Одесской области / / Аграрный вестник Причерноморья, Экономические науки. -2009. - Выпуск № 49. С.76-79.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 5. Стребков Д.С., Ковалев А.А. Биогазовые установки для обработки отходов животноводства. / / Техника и оборудование для села - 2006. - № 6. Моисеев И.С., Тарасов В.М., Трусов Л.В., Эволюция биоенергетики.

Время водорослей. / / Альтернативная энергетика. - 2010. - № 11 - С. 24Патент RU 2388812 C1, C12N1/12. Способ извлечения липидов из биомассы. Нагорнов С.А., Клеймнов О.А., Романцова С.В., Матвеев А.В., Рязанцева И.А. - Опубл. 10.05.2010.

8. Биотопливо из водорослей - от большой нефти к большим водорослям. / / http://venture-biz.ru/tekhnologii-innovatsii/207-biotoplivo-iz-vodorosley

BIOTECHNOLOGY OF ALTERNATIVE SOURCES OF ENERGY.

The article describes the main types of biofuels and effective methods of their producing. The review and comparison of the advantages and disadvantages of biotechnological production of fuels are given. Production of biodiesel from the culture of microalgae Chlorella is shown more detailed.

УДК 579:636.084.42:636.084.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

ГЛАУКОНИТА КАК КОРМОВОЙ ДОБАВКИ

Касьянова Л.В., 3 курс, факультет ветеринарной медицины и биотехнологии Научный руководитель: д.м.н., профессор Назарова Л.С.

ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ им. Н.И. Вавилова»

Глауконит был известен как агроруда с 19 века, однако в настоящее время к нему стали проявлять повышенное внимание не только земледелы, но и животноводы. Это связано с тем, что, будучи природным минералом, он в своем составе имеет богатый набор макроэлементов – окислов кремния, алюминия, кальция, калия, магния, натрия, железа, а также микроэлементов – марганца, кобальта, молибдена, меди, цинка, и других [Левченко, 2008 ]. Все это делает глауконит хорошим дополнением к минеральным удобрениям [Колягин, Мешков, 2008] и позволяет использовать в качестве добавок к корму животных. [Чуйкина, 2008; Тагиров и др., 2010 ].

Вместе с тем только в одном доступном нам литературном источнике было сказано о том, что 85% глауконитов содержат аномально высокую примесь мышьяка в сульфитной форме. В среднем в месторождениях России количество этого микроэлемента составляет 8-11 мг/кг, тогда как, согласно требованиям СанПин 42-128-4453-87, его содержание не должно превышать мг/кг [Патыка – Кара и др., 2007]. Мы полагаем, что наряду с другими химическими элементами, именно мышьяк глауконита оказывает положительное действие на организм сельскохозяйственных животных.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Одной из наиболее полных работ, описывающих роль микроэлементов в жизни человека и животных, является монография А.П. Авцына и соавторов [1991]. В частности, что касается мышьяка, то эти авторы указывают, что в птицеводстве и животноводстве дефицит мышьяка вызывает целый ряд негативных явлений: задержку роста и уменьшение образования молока, повышенную смертность матерей и потомства, снижение функции воспроизводства, уменьшение содержания меди и марганца в органах и тканях животных. Мышьяк используют для профилактики ряда заболеваний [Авцын и др.,1991].

В доступной литературе имеются работы, говорящие о стимуляции глауконитом микрофлоры почв [Андропов, Быков,2006], что касается арсенитов (трехвалентной формы мышьяка), то есть сведения о стимуляции штамма Pseudomonas putida 18 этими соединениями за счет активации каталазной активности. Выявлены бактерии, которые восстанавливают пятивалентную форму мышьяка с превращением его в триметиларсин – ядовитый газ. В аэробных условиях метилирование мышьяка осуществляют плесневые грибы, в анаэробных условиях - метаногенные бактерии [Авцын и др., 1991]. Микрофлора рубца обладает повышенной чувствительностью к мышьяку, который ингибирует ее рост и ферментативную активность [Forsbery, 1978,,цитпо А.П. Авцыну и др,1991].

В настоящей работе мы не определяли уровень мышьяка в глауконите, что будет выполнено в дальнейшем, а целью поставили исследовать какие микроорганизмы присутствуют в его вытяжке, их влияние на некоторых представителей микрофлоры тела животного, а так же рост условнопатогенных микроорганизмов на мясо-пептонном агаре, сваренном на этой вытяжке.

Материалы и методы Первый этап исследования заключался в определении микроорганизмов, содержащихся в самом глауконите. Для этого 10 г глауконита и 80 мл стерильной водопроводной воды 5 минут мы растирали пальцем в стерильной резиновой перчатке, после чего полученную смесь смыли в пустую стерильную колбу стерильной водопроводной водой. После пятиминутного встряхивания раствор развели до 105 м.к/мл, затем сделали посевы на мясопептонный агар (МПА) с каждого разведения, и сутки инкубировали в термостате при температуре 37 0С. Был сделан подсчет количества микроорганизмов в 1 г глауконита, определены культуральные и морфологические признаки выросшей культуры. Чистую культуру бацилл, выросших на МПА, инкубировали в жидкой питательной среде с культурой Escherichia coli из музея кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии СГАУ им.Н.И.

Вавилова. Обе культуры были взяты в количестве 109 м.к./мл. После суточной инкубации при 37 0С был проведен пересев на среду Эндо. Из колоний, выросшей на этой среде сделаны мазки, которые окрашивали по Граму.

Вторым этапом было приготовление среды из вытяжки из глауконита:

100 г глауконита растерли в ступке до образования пудры и смешали в колбе с 500 мл дистиллированной воды, взбалтывали раствор в течение 5 минут. Затем Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии освободили экстракт от взвешенных частиц путем многократной фильтрации до получения прозрачного раствора, из которого в дальнейшем была приготовлена питательная среда из сухого МПА согласно инструкции. Для контроля был приготовлен МПА на дистиллированной воде.

На опытной и контрольной средах были высеяны чистые культуры музейных штаммов (E. coli, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aerugenosa) по 10 мк/мл. После инкубирования в термостате в течение суток при температуре 37 0С сделаны мазки, которые были окрашены по Граму.

Третий этап включал взятие содержимого рубца у теленка и посев его на две среды: МПА и МПА на экстракте глауконита с созданием аэробных и анаэробных условий. Инкубирование посевов и приготовление мазков проводили согласно указанному выше.

Результаты и их обсуждение Установлено, что глауконит содержал в 1г 88,4 * 10 6 м.к. На МПА выросли колонии двух видов. Колонии первого вида были представлены крупными колониями с морщинистой поверхностью, неровными краями, белого цвета. В мазках обнаружены грамположительные спорообразующие палочки, короткие, прямые, расположенные как одиночно, так и попарно.

Споры располагались в центре (типичные бациллы). Колонии второго типа были средних размеров, края фестончатые, рельеф выпуклый, гладкие. Они содержали грамположительные палочки, короткие, без спор.

Результаты второго опыта представлены в виде таблицы (табл 1.).

Таблица 1 – Количество колониеобразующих единиц на МПА Вид микроорганизма В результате подсчета колониеобразующих единиц было установлено, что на среде, приготовленной из экстракта глауконита выросло в 2-3 раза меньше колоний всех видов условно-патогенных микроорганизмов, используемых в опыте, по сравнению с МПА, приготовленным на дистиллированной воде. То есть, экстракт глауконита угнетал рост всех видов микроорганизмов, перечисленных выше. Колонии на обеих средах выглядели одинаково. Что касается морфологии и тинкториальных признаков культур, то все они были одинаковыми, за исключением кишечной палочки, у которой размеры клеток были меньше обычных.

При посеве содержимого рубца на обеих средах отмечен рост в аэробных условиях плесневых грибов и бацилл, но на среде с экстрактом глауконита колоний плесеней было в 2 раза меньше. Бациллы везде росли одинаково. В анаэробных условиях на обеих средах выросли бледные колонии в форме линз, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии очевидно, это были молочнокислые бактерии, поскольку в мазках присутствовали типичные для них формы. Рядом авторов, напротив, было установлено бактерицидное действие глауконита на микрофлору желудочнокишечного тракта [Тагиров, Миронова, 2008 ].

Заключение Таким образом, в результате проведенных исследований было установлено, что глауконит содержит достаточно большое количество аэробных бактерий двух типов: палочковидных грамположительных микроорганизмов, одна часть из которых является бациллами, другие же бактерии были аспорогенными. Бациллы, выделенные из глауконита, изменили морфологические свойства клеток кишечной палочки в сторону уменьшения их размеров, но не угнетали их рост на среде Эндо. Экстракт из глауконита угнетал рост всех условно-патогенных микроорганизмов, взятых в опыт. Нами был установлено, что бактерицидный эффект экстракта из глауконита проявлялся только по отношению к плесневым грибам.

1. Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строкова Л.С. Микроэлементы человека: этиология, классификация, органопатология. – М.: Медицина, 2. Андропов С.А., Быков В.И. Глауконит – минерал будущего//Материал первой Международной конференции « Значение промышленных минералов в мировой экономике: месторождение, технология, экономическая оценка». - М.: ГЕОС, 2006. – С. 79-83.

3. Ершов Ю.А., Плетенова Т.В. Механизмы токсического действия неорганических соединений - М.: Медицина, 1989. – 272с.

4. Колягин Ю.С., Мешков В.Н. Глауконит –ценное дополнение к минеральным удобрениям//Картофель и овощи. – 2008. - №8.- С.8-9.

5. Левченко М.Л. Состояние сырьевой базы и возможности использования глауконитов в России//Минеральные ресурсы России.- 2008 - №2.- С.27Патыка-Кара Н.Г., Дубинчук В.Т.,Левченко М.Л., Андрианова Е.А.

Состав глауконитов верхнемеловой осадочной формации центральных районов России// Доклады Академии наук.- 2008.-Т.423, №6,-С.780-782.

7. Природа структурно-кристаллохимической неоднородности глауконита с повышенным содержанием Mg (Рифей, Анабарское поднятие)/В,А. Дритц [и др]// Полезные ископаемые.-2010.-№6.-С.620-643.

8. Тагиров Х., Миронова И. Использование глауконита в качестве кормовой добавки //Молочное и мясное скотоводство.-2008.-№1.-С 26-28.

9. Тагиров Х.Х., Карнаухов Ю.А., Токарев И.Н. Использование глауконитов в рационе свиней для получения чистой свинины в условиях промышленной технологии//Хранение и переработка сельхоз сырья.С15-16.

10. Чуйкина Т. Влияние глауконита на качественный состав белка молока//Молочное и мясное скотоводство. – 2008. - №5. – С. 33-34.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии

MICROBIOLOGICAL GROUND THE USING OF GLAUCONITE AS

FORAGE ADDITION

Glauconite contains two tupes of aerobian grampositive rod bacterium strains one of which has spores and that is why belongs to bacillus, other is asporogenes.

The pure culture of bacillus received from glauconite leads to diminish the size of E.

coli cells. Nutrient medium prepared on glauconite extract suppresses the growth of opportunistic microbes: E. coli, P. aerugenosa, B. cereus and S. aureus and mould in cow stomach.

УДК 579.

РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО

ШТАММА – ПРОДУЦЕНТА ЛАКТОФЕРРИНА ЧЕЛОВЕКА

Новоселова М.В., 5 курс, факультет экономический Асякина Л. К., ведущий инженер научно-образовательного центра Научный руководитель: к.т.н., доцент Бабич О.О.

ФГБОУ ВПО «Кемеровский технологический институт пищевой Лактоферрин представляет собой полифункциональный белок из семейства трансферринов, обладающий антибактериальными, антивирусными, противогрибковыми, противопаразитическими, антиканцерными, противовоспалительными, иммуномодуляционными, антиоксидантными и регенеративными свойствами.

Лактоферрин представлен преимущественно в молоке человека и других млекопитающих [1].

Мировая потребность в лактоферрине сегодня значительно превышает предложение. Лактоферрин продолжает оставаться в ряду дорогостоящих белков вследствие большого интереса исследователей к уникальным свойствам этого лекарственного белка и имеющихся трудностей выделения его в чистом виде [5].

Российский рынок представлен импортными дорогостоящими препаратами высокоочищенного лактоферрина, предназначенными для биохимических, медицинских исследований, а также для фармацевтической промышленности.

Использование донорского женского молока, как источника лактоферрина, во многих странах ограничено, а в Российской Федерации, запрещено, в связи с возможностью вирусной контаминации (СПИД, гепатит) [3].

Белок содержится и в обычном коровьем молоке, но его очень мало и выделить его оттуда и сделать доступным для человека не так-то просто.

Существующие на Западе технологии производства этого препарата довольно дорогие. В частности, коровий лактоферрин – один из тех молочных белков, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии которые могут вызывать у аллергиков нежелательную реакцию. К тому же он не идентичен человеческому лактоферрину.

Целью является получение бактериального штамма, продуцирующего лактоферрин по своим свойствам максимально приближенный к природному лактоферрину человека.

Во многих странах уже развернут широкий фронт исследований по получению рекомбинантного лактоферрина человека в микроскопических грибах (Aspergillus awamori, Aspergillus oryzae -компания Agennix, США), растениях (табак, картофель, рис-Япония, компания Amgen -США). Делаются попытки организовать в промышленных масштабах выпуск рекомбинантного лактоферрина человека, выделенного из молока трансгенных коров – Южная Корея, группа компаний Pharming- Голландия), из молоко трансгенных коз (совместный проект российских и белорусских ученых «БелРоссТрансген»;

Китай), а также из куриных яиц (Россия) [3; 4].

Однако, до сих пор предложенные технологические решения обладают рядом недостатков, таких как низкий выход целевого продукта, высокая себестоимость, низкая биодоступность и пр.

Преимуществами перед аналогами, делающие микробный синтез получения лактоферрина перспективным, являются: гибкость метаболизма и высокая способность микроорганизмов к адаптации, высокая скорость роста, простота культивирования, изученность генетики, разработанные методы направленного создания штаммов с заданными свойствами.

Новизна предлагаемого технического решения заключается в использовании оптимальной генной конструкции, позволяющей эффективно осуществлять индуцируемую экспрессию лактоферрина человека и сверхпродукцию белка в бактериальных культурах.

Для получения штамма-продуцента лактоферрина, трансформировали компетентные клетки Escherichia coli B F-dcm ompT hsdS (rB-mB-) gal (Stratagene, США) рекомбинантной плазмидной ДНК pTAC-MAT-Tag2 (Sigma, США).

В компетентных клетках Е. coli отсутствуют lon и ompT протеазы для предотвращения расщепления рекомбинантного белка (стабилизации мРНК) в бактерии.

Генетическая конструкция плазмиды pTAC-MAT-Tag-2 представлена на рис. Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Рис.1. Физическая карта рекомбинантной плазмиды pTAC-MAT-Tag- В область полилинкера МСS плазмиды pTAC-MAT-Tag-2 по месту действия рестриктаз EcoRI - XhoI встроили мРНК гена лактоферрина человека, синтезированную компанией Евроген (Россия) исходя из последовательности базы данных GenBank (23268458) [6].

Синтезированную и встроенную в вектор изготовителя pAL-TA мРНК, амплифицировали методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью специально подобранных праймеров.

Для получения липких концов полученный фрагмент XhoI-мРНК-EcoRI (2136 п.о.) обрабатывали ферментами эндонуклеазами рестрикции XhoI и EcoRI с последующей электрофоретической очисткой в 1% агарозном геле.

Необходимые участки вырезали и выделяли из агарозного геля.

При подготовке к клонированию выбранный вектор pTAC-MAT-Tag- («Sigma», США), содержащий в своем составе ген резистентности к ампициллину, обработали эндонуклеазами рестрикции XhoI и EcoRI с образованием липких концов, комплементарных липким концам мРНК.

Получаемые фрагменты исследовали и очищали методом электрофореза в 0,8%-ном агарозном геле. Необходимые для клонирования участки вырезали из геля.

Далее электрофоретически очищенные фрагмент XhoI-мРНК-EcoRI и фрагмент вектора pTAC-MAT-Tag-2 лигировали ферментом лигаза фага Т4 в течение 12 часов при 10 °С. После этого лигазу инактивировали прогреванием смеси в течение 5 минут при 70°С. Очистку от неслигированных фрагментов ПЦР проводили вырезанием из геля.



Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 7 |
Похожие работы:

«Материалы международной научно-практической конференции (СтГАУ,21.11.2012-29.01.2013 г.) 75 УДК 619:616.995.1:136.597 КОНСТРУИРОВАНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИНДИКАЦИИ БАКТЕРИЙ РОДА AEROMONAS Н.Г. КУКЛИНА, И.Г. ГОРШКОВ, Д.А. ВИКТОРОВ, Д.А. ВАСИЛЬЕВ Ключевые слова: Aeromonas, выделение, индикация, питательные среды, микробиология, биотехнология, аэромоноз. Авторами публикации сконструированы две новые питательные среды для выделения и идентификации бактерий рода Aeromonas: жидкая...»

«Министтерство о образован и наук Россий ния ки йской Фед дерации Российск академия наук кая к Не еправител льственны эколог ый гический фонд име В.И. В ф ени Вернадско ого Коми иссия Росссийской Федерации по дел ЮНЕ лам ЕСКО Адми инистрация Тамбо овской облласти Ас ссоциация Объеди я иненный универсиитет имен В.И. Ве ни ернадског го Федералльное гос сударствеенное бю юджетное образоваательное учреж ждение выысшего ппрофессиоональног образо го ования Тамбоввский госсударственный теехническ униве...»

«Уважаемые коллеги! Миркин Б.М., д.б.н., профессор, Башкирский Оргкомитет планирует опубликовать научные гос. университет материалы конференции к началу ее работы. Приглашаем Вас принять участие в работе П е н ч у ко в В. М., а к а д е м и к РАСХ Н, Для участия в работе конференции Международной научной конференции необходимо до 1 февраля 2010 года Ставропольский гос. аграрный университет Теоретические и прикладные проблемы П е т р о в а Л. Н., а к а д е м и к РА С Х Н, н ап р а в и т ь...»

«Институт биологии Коми НЦ УрО РАН РЕГИСТРАЦИОННАЯ ФОРМА КЛЮЧЕВЫЕ ДАТЫ Коми отделение РБО Заявка на участие и тезисы докладов в электронном виде 1.02.2013 Министерство природных ресурсов и охраны Фамилия Второе информационное письмо 1.03.2013 окружающей среды Республики Коми Оплата оргвзноса 15.04.2013 Имя Управление Росприроднадзора по Республике Коми Регистрация участников Отчество и открытие конференции 3.06. ФИО соавтора (соавторов) Представление материалов БИОРАЗНООБРАЗИЕ ЭКОСИСТЕМ для...»

«16.11.2013 (суббота) Регистрация, кофе, плюшки 8:30-9:30 Открытие конференции 9:30-10:30 Проректор по обеспечению реализации образовательных программ и осуществления научной деятельности по направлениям география, геология, геоэкология и почвоведение СПбГУ С.В. Аплонов Декан факультета географии и геоэкологии Н.В. Каледин Зав. кафедры гидрологии суши Г.В. Пряхина ООО НПО Гидротехпроект А.Ю. Виноградов Организационный Комитет Л.С. Лебедева Посвящение Ю.Б. Виноградову 10:30-11:00 Т.А. Виноградова...»

«Фундаментальная наук а и технологии - перспективные разработки Fundamental science and technology promising developments III Vol. 2 spc Academic CreateSpace 4900 LaCross Road, North Charleston, SC, USA 29406 2014 Материалы III международной научно-практической конференции Фундаментальная наука и технологии перспективные разработки 24-25 апреля 2014 г. North Charleston, USA Том 2 УДК 4+37+51+53+54+55+57+91+61+159.9+316+62+101+330 ББК 72 ISBN: 978-1499363456 В сборнике собраны материалы докладов...»

«Учреждение образования Брестский государственный университет имени А.С. Пушкина Мониторинг окружающей среды Сборник материалов II Международной научно-практической конференции Брест, 25–27 сентября 2013 года В двух частях Часть 1 Брест БрГУ имени А.С. Пушкина 2013 2 УДК 502/504:547(07) ББК 20.1 М77 Рекомендовано редакционно-издательским советом учреждения образования Брестский государственный университет имени А.С. Пушкина Рецензенты: доктор геолого-минералогических наук, профессор М.А....»

«CBD Distr. GENERAL КОНВЕНЦИЯ О БИОЛОГИЧЕСКОМ UNEP/CBD/WG-ABS/2/2 16 September 2003 РАЗНООБРАЗИИ RUSSIAN ORIGINAL: ENGLISH СПЕЦИАЛЬНАЯ РАБОЧАЯ ГРУППА ОТКРЫТОГО СОСТАВА ПО ДОСТУПУ К ГЕНЕТИЧЕСКИМ РЕСУРСАМ И СОВМЕСТНОМУ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ВЫГОД Второе совещание Монреаль, 1-5 декабря 2003 года Пункты 3, 4, 5, 6 и 7 предварительной повестки дня* ДАЛЬНЕЙШЕЕ ИЗУЧЕНИЕ НЕУРЕГУЛИРОВАННЫХ ВОПРОСОВ, КАСАЮЩИХСЯ ДОСТУПА К ГЕНЕТИЧЕСКИМ РЕСУРСАМ И СОВМЕСТНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ВЫГОД: ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕРМИНОВ, ДРУГИЕ...»

«Российская академия наук Институт озероведения РАН Российский государственный педагогический университет им. А.И. Герцена Гидробиологическое общество РАН II Международная конференция Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем 10-14 октября 2011г., Санкт-Петербург ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ II International Conference Bioindication in monitoring of freshwater ecosystems 10-14 October 2011, St.-Petersburg, Russia ABSTRACTS При поддержке: Отделения наук о Земле РАН, СПб Научного Центра РАН, РФФИ...»

«Международная научно-практическая конференция МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ: ПРОШЛОЕ, НАСТОЯЩЕЕ И БУДУЩЕЕ 26 МАЯ 2014Г. Г. УФА, РФ ИНФОРМАЦИЯ О КОНФЕРЕНЦИИ ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ КОНФЕРЕНЦИИ Цель конференции: поиск решений по актуальным проблемам современной наук и и Клиническая медицина. 1. распространение научных теоретических и практических знаний среди ученых, преподавателей, Профилактическая медицина. 2. студентов, аспирантов, докторантов и заинтересованных лиц. Медико-биологические науки. 3. Форма...»

«Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова Студенческий союз МГУ Биологический факультет ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ XIII МЕЖДУНАРОДНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ЛОМОНОСОВ-2006 12–15 апреля 2006 г. Секция Биология Москва – 2006 УДК 57 Председатель оргкомитета секции Биология Проф. Гостимский С.А. Члены оргкомитета: С.н.с. Ботвинко И.В. Проф. Максимов Г.В. Доц. Медведева М.В. Проф. Соколов Д.Д. Проф. Онищенко Г.Е. С.н.с. Авилова К.В. Ст. преп. Сергеев И.Ю. Доц....»

«ФОРМА ЗАЯВКИ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ МАТЕРИАЛОВ Министерство природных ресурсов и экологии на участие в конференции: Заявки и материалы, объемом до 5 страниц Российской Федерации (включая таблицы, рисунки и библиографический Фамилия Управление Федеральной службы список), принимаются в печатном и электронном по надзору в сфере природопользования виде до 12 мая 2014 г. по Кировской области Имя Федеральное государственное бюджетное Электронный вариант: стандартный формат Word учреждение Государственный...»

«Международная экологическая ассоциация хранителей реки Eco-TIRAS Образовательный фонд имени Л.С.Берга Eco-TIRAS International Environmental Association of River Keepers Leo Berg Educational Foundation Академику Л.С. Бергу – 135 лет: Сборник научных статей Academician Leo Berg – 135: Collection of Scientific Articles Eco-TIRAS Бендеры - 2011 Bendery - 2011 CZU[91+57]:929=161.1=111 A 38 Descrierea CIP a Camerei Naionale a Crii Academician Leo Berg – 135 years: Collection of Scientific Articles =...»

«Российская Академия Наук Институт географии РАН Геологический институт РАН Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова Палинологическая комиссия России Комиссия по эволюционной географии Международного географического Союза Палинологическая школа-конференция с международным участием МЕТОДЫ ПАЛЕОЭКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ (Москва, 16-19 апреля 2014) Тезисы докладов International Palynological Summer School METHODS OF PALAEOENVIRONMENTAL RESEARCHES (Moscow, April, 16-19, 2014) Book...»

«МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ Московская международная научно-практическая конференция ЭКОЛОГИЯ КРУПНЫХ ГОРОДОВ Проводится в рамках Московского международного конгресса Биотехнология: состояние и перспективы развития 15 - 17 марта 2010 March, 15 - 17 Под патронажем Правительства Москвы Sponsored by Moscow Government The Moscow International Scientific and Practical Conference ECOLOGY OF BIG CITIES Held within the framework of Moscow International Congress Biotechnology: State of the Art and Prospects...»

«Отделение биологических наук РАН Научный Совет по гидробиологии и ихтиологии РАН Российский фонд фундаментальных исследований Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии внутренних вод им. И.Д. Папанина Российской академии наук Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Тюменский государственный университет МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ КОНФЕРЕНЦИИ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ Борок 2012 Отделение биологических наук...»

«УСТАВ РУССКОГО ЭНТОМОЛОГИЧЕСКОГО ОБЩЕСТВА ПРИ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК (Принят Бюро Отделения общей биологии РАН 27 марта 1995 г.) 1. Общие положения 1.1. Русское энтомологическое общество при Российской академии наук, в дальнейшем именуемое РЭО, является некоммерческой организацией — научным обществом Отделения общей биологии при РАН — и осуществляет свою деятельность в соответствии с существующим законодательством и настоящим Уставом. 1.2. РЭО является юридическим лицом. Оно имеет свои...»

«Российская академия наук Институт озероведения РАН Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем II Bioindication in monitoring of freshwater ecosystems II Издательство Любавич Санкт-Петербург 2011 УДК 504.064.36 Ответственные редакторы: Член-корр. РАН В.А. Румянцев, д.б.н. И.С. Трифонова Редакционная коллегия: д.б.н. И.Н. Андроникова, к.б.н. В.П. Беляков, к.б.н. О.А. Павлова, к.б.н. М.А. Рычкова Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем II. Сборник материалов международной...»

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Чебоксарский филиал учреждения Российской академии наук Главного ботанического сада им. Н.В. Цицина РАН Чувашское отделение Русского ботанического общества РАН Чувашское отделение Териологического общества РАН МИНИСТЕРСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ЭКОЛОГИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБУ Государственный природный заповедник Присурский МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Филиал ГОУ ВПО Российский государственный социальный университет, г. Чебоксары...»

«НИИЦМиБ ФГБОУ ВПО Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина Кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы VI-й Международной студенческой научной конференции, посвящённой 70-летию ФГБОУ ВПО Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина 14 – 15 мая 2013 года Часть I Ульяновск – 2013 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии НИИЦМиБ ФГБОУ ВПО...»









 
2014 www.konferenciya.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Конференции, лекции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.