WWW.KONFERENCIYA.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Конференции, лекции

 

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |

«АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы V-й Всероссийской (с международным участием) студенческой научной конференции 25 – 26 апреля 2012 года Ульяновск – ...»

-- [ Страница 5 ] --

Таким образом, получили рекомбинантную конструкцию, которой впоследствии трансформировали компетентные клетки E.coli. Трансформацию компетентных клеток вели температурным шоком. Для этого 1 мл ночной Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии культуры клеток выращивали при температуре 30°С с интенсивной аэрацией в среде с SOB с добавлением 0,9% глицина, 0,02 М MgCl2 и ампициллина на качалке. После охлаждения на льду в течение 10 минут клетки осаждали центрифугированием. Полученный осадок ресуспендировали в 1 мл охлажденного буфера TB1, далее пробирки инкубировали на льду в течении мин и помещали на 30 сек в водяную баню, предварительно нагретую до 42°С.

После температурного шока в пробирку добавляли 2М глюкозу и инкубировали 1 час при 37C (или 1,5 часа при 30C), затем высевали на чашки Петри с агаризованной средой LB, содержащей 50 мкг/мл ампициллина.

Инкубировали в термостате при 37° С примерно 16 часов.

Таким образом, получили штамм Escherichia coli, способный продуцировать лактоферрин человека.

1. Никишина, И.Н. Полифункциональная наночастица лактоферрин / И.Н.

Никишина, С.В. Симоненко // Пищевая промышленность.- 2010.- №2.С.10-11.

2. Бейкер, Е.Н. Лактоферрин: свойства и применение / Е.Н. Бейкер // Молочная промышленность.- 2006.- № 2.- С.38-39.

3. Сертификация рекомбинантного лактоферрина человека.// http://www.transgen.ru.

4. Найден, М. Козий реактор / К. Бочарский // Коммерсантъ Секрет Фирмы.-2010.- №8 (300).- C.8-10.

5. Костина Г. Лактоферрин: медленный бег с барьерами // Эксперт.- 2011.С.2-4.

6. Новоселова, М.В. Получение лактоферрина человека микробным синтезом / М.В. Новоселова, Л.С. Солдатова // Материалы научной школы для участников программы «Участник молодежного научноинновационного конкурса», под общей ред. В.П.Юстратова; КемТИПП.Кемерово, 2011.- С. 42-46.

DEVELOPMENT OF THE METHOD FOR

PRODUCING HIGHLY STRAIN-PRODUCER OF HUMAN LACTOFERRIN

Novoselova M.V., Asyakyna L.S., Babich O.O.

This paper describes a method for producing strain-producer of recombinant human lactoferrin Escherichia coli. Lactoferrin is a multifunctional protein of the transferrin family, presented mostly in the milk of humans and other mammals. For the producer of lactoferrin, transformed competent cells of Escherichia coli recombinant plasmid DNA pTAC-MAT-Tag2, containing in its composition of human lactoferrin mRNA.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 579.

ВЛИЯНИЕ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ПОСОЛА НА МИКРОФЛОРУ

МЯСНОГО ПРОДУКТА

Панасюк И.В., магистр, Национальный университет пищевых технологий Гарда С.О., магистр, Национальный технический университет Украины «КПИ»

Недоризанюк Л.П., аспирант, Технологический институт мяса и молока Научный руководитель: к.т.н. Даниленко С.Г., старший научный сотрудник Технологического института молока и мяса НААН Украины Производство мясных продуктов основывается на биохимических превращениях составных частей мяса (белка, жира, гликогена и др.), происходящих под воздействием ферментов микробиологического происхождения. Направленность этих превращений зависит от характера ферментных систем, которые в свою очередь являются следствием жизнедеятельности микрофлоры. В связи с этим типичность и качество мясных продуктов во многом определяются видовым составом, а также биологической активностью микроорганизмов, принимающих участие в их созревании.

Одной из важнейших технологических операций при выработке балычных изделий является посол, оказывающий существенное влияние на жизнедеятельность микроорганизмов. При этом интенсивность и направление биохимических превращений зависит от длительности посола [1-3].

Цель данной работы – исследование влияния длительности посола мяса на количественный и качественный состав микрофлоры продукта.

Опытные выработки балыка проводили в лабораторных условиях, используя свиную вырезку.

В рассол вносили бактериальную закваску КПК в количестве 20 % бактериальной массы к общему объему рассола.

Образцы разделили на пять групп. Образцы первой группы солили в течение одних суток; второй – двух; третьей – трех; четвертой – четырех; пятой – пяти.

Определение количества микрофлоры осуществляли по общепринятым в в микробиологии методикам и ГОСТам.

С момента посола мясных продуктов в динамике соления и созревания во всех опытных образцах изменялось количественное соотношение состава микрофлоры.

Было установлено, что в образцах, в основном, присутствовали такие группы микроорганизмов как молочнокислые бактерии и микрококки.

Изменение общего количества микрофлоры в образцах, независимо от продолжительности посола, имело единую направленность. Максимального развития микрофлора достигала на третье сутки. Затем происходило постепенное снижение ее количества. Разница в содержании микрофлоры отмечена лишь в зрелом продукте, в частности было отмечено, что с увеличением длительности посола балыка общая численность Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии микроорганизмов снижалась ( в продукте, подвергнутом посолу в течение двух дней, было 4,5·106 КОЕ/г, пяти – 2,2·104 КОЕ/г).

Различная длительность посола оказала некоторое влияние на соотношение в продукте молочнокислых бактерий и микрококка в начальный период созревания. Так в образцах, солившихся одни сутки, имелось 62 % молочнокислых бактерий, двух – 65%, трех – 67%, четырех -63 %, а соотношение микрококков практически не изменялось. Характерной закономерностью состава микрофлоры готового продукта было установлено преобладание молочнокислых бактерий над остальными группами микроорганизмов.



В продукте после посола было незначительное количество молочнокислых бактерий.

На пятые сутки посола микрофлора продукта была представлена, в основном, бактериями родов Lactobacillus и Micrococcus и некоторыми видами неспорообразующих грамотрицательных палочек.

Таким образом, качественный состав микрофлоры изменяется как в результате конкуренции между разными видами микроорганизмов, так и в результате адаптации некоторых видов к условиям посола.

1. Talon R. Microbial ecosystems of traditional fermented meat products: The importance of indigenous starters / R. Talon, S. Leroy, I. Lebert // Meat Science.

– 2007. – Vol. 77, № 1. – Р. 55-62.

2. Spaziani M. Changes of physicochemical, microbiological, and textural properties during ripening of Italian low-acid sausages. Proteolysis, sensory and volatile profiles / M. Spaziani, M. Del Torre, M.L. Strecchini // Meat Science. – 2009. – Vol. 81, № 1. – Р. 77-85.

3. Martin B. Molecular B., Tehnological and safety characterization of Grampositive cocci from slightly fermented sausages / B. Martin, M. Garriga, M.

Hugas et al. // Int. J. Food Microbiol. – 2007. – Vol. 107, № 2. – Р. 148-158.

INFLUENCE OF SALTING PROCESS DURATION ON MEAT

PRODUCT MICROFLORA.

Panasyuk I.V., Garda S.O., Nedorizanyuk L.P., Danylenko S.G.

The research of micoflora of fermented balyk it qualitative and quantitative content under the different terms of salting with the usage a bacterial starter KPK in quantity of 20% of bacterial mass to the whole volume of brine was conducted. The duration of salting process was found to influence qualitative and quantitative correlation in the microflora of the ready product.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 759.873.088.5:661.

ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ ACINETOBACTER CALCOACETICUS

ИМВ В-7241, RHODOCOCCUS ERYTHROPOLIS ИМВ Ac-5017 И

NOCARDIA VACCINII K-8 КАК ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ БИОКОНТРОЛЯ НАД

ФИТОПАТОГЕНАМИ

Покора К.А., 4 курс, факультет биотехнологии и экологического контроля Чеботарева К.В., 3 курс, факультет биотехнологии и экологического контроля Софилканич А.П., аспирант 3-го года обучения Научный руководитель: д.б.н., профессор Пирог Т.П.

Консультант – член-корреспондент НАН Украины, Национальный университет пищевых технологий, г. Киев, Украина Необходимость разработки современных препаратов с антимикробными свойствами обусловлена увеличением патогенных микроорганизмов, резистентных к известным биоцидам. Микробные поверхностно-активные вещества (ПАВ) рассматриваются многими исследователями как альтернатива синтетическим антимикробным агентам [4]. В литературе имеются данные об ингибировании фитопатогенных грибов препаратами гликолипидных микробных ПАВ [5] и липопептидов [6]. Однако актуальной проблемой на сегодняшний день остается борьба с бактериозами сельскохозяйственных растений, которая рассматривается как существенный вклад в решение глобальных продовольственных проблем. Использование средств биологического контроля над фитопатогенами является важным условием устойчивого развития агроэкосистем [7].

Ранее из загрязненных нефтью образцов почвы нами были выделены нефтеокислящие бактерии, идентифицированные как Acinetobacter calcoaceticus К-4 (ИМВ В-7241), Rhodococcus erythropolis ЭК-1 (ИМВ Ас-5017), Nocardia vaccinii K-8 и установлена способность данных штаммов синтезировать ПАВ на различных субстратах. В предыдущих исследованиях было установлено антимикробное действие препаратов ПАВ R. erythropolis ИМВ Ac-5017 и A.

calcoaceticus ИМВ В-7241 по отношению к некоторым бактериям и дрожжам (Bacillus subtilis БT-2, Escherichia coli ІЕМ-1, Candida tropicalis ПБТ-5, Candida albicans Д-6, Candida utilis БВС-65, Saccharomyces cerevisiea ОБ-3 и др.) [1].

Отметим, что в работе [1] использовали неочищенные препараты ПАВ в виде стерильного супернатанта культуральной жидкости.

Из литературы известно, что антимикробные свойства микробных ПАВ зависят от способа их выделения и степени очистки. Так, с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии было установлено, что комплекс синтезируемых Bacillus circulans ПАВ липопептидной природы состоит из шести фракций. Исследование антимикробных свойств одной из фракций показало, что е действие значительно эффективнее, чем комплекс ПАВ, выделенный экстракцией органическимим растворителями [3].

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии В связи с изложенным выше цель данной работы – исследовать антимикробные свойства ПАВ A. calcoaceticus ИМВ В-7241, R. erythropolis ИМВ Ас-5017 и N. vaccinii K-8 различной степени очистки по отношению к некоторым фитопатогенным бактериям.

В работе использовали фитопатогенные бактерии из Украинской коллекции микроорганизмов (УКМ): Pectobacterium carotovorum УКМ В-1095 – полифаг, возбудитель гнилей у широкого круга сельскохозяйственных и цветочных растений; Pseudomonas syringae УКМ В-1027 – полифаг, возбудитель пятнистостей широкого круга сельскохозяйственных растений, цветочных и древесных культур; Pseudomonas syringae pv. atrofaciens УКМ Ввозбудитель базального бактериоза пшеницы, ржи и ячменя;





Pseudomonas syringae pv. coronafaciens – УКМ В-1154 – возбудитель ореольного бактериоза ржи; Xanthomonas campеstris pv. campestris УКМ В- –возбудитель сосудистого бактериоза многих сельскохозяйственных растений.

Объектами исследования также были фитопатогенные бактерии из коллекции отдела фитопатогенных бактерий Института микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного НАН Украины: Pseudomonas corrugatе – вызывает некроз сердцевины стеблей томатов; Pseudomonas savastanoi pv.

glycinea 8571 – вызывает угловатую пятнистость сои; Xanthomonas translucens pv. translucens 7696 – возбудитель черного бактериоза зерновых; Xantomonas vesicatoria 7790 – возбудитель черной бактериальной пятнистости томатов.

Штаммы фитопатогенных бактерий были любезно предоставлены сотрудниками отдела фитопатогенных бактерий Института микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного НАН Украины.

Культивирование A. calcoaceticus ИМВ В-7241, R. erythropolis ИМВ Аси N. vaccinii K-8 проводили на минеральных питательных средах, описанных ранее [1, 2]. Выделение поверхностно-активных веществ из супернатанта культуральной жидкости, содержащего ПАВ (препарат 1), осуществляли экстракцией смесью Фолча (хлороформметанол 2:1) и получали препарат 2. Оставшаяся после экстракции ПАВ водная фаза условно названа нами препарат 3. Начальная концентрация поверхностно-активных веществ в препаратах 1 и 2 R. erythropolis ИМВ Ac-5017 составляла 0,4 мг/мл, A.

сalcoaceticus ИМВ В-7241 – 0,15 мг/мл, N. vaccinii K-8 – 0,85 мг/мл. В некоторых вариантах исследовали антимикробные свойства препарата штаммов ИМВ Ac-5017 и K-8 более низкой концентрации. Установлено, что после экстракции ПАВ из супернатанта культуральной жидкости исследуемых штаммов последний не обладал поверхностно-активными свойствами, что позволяет утверждать об отсутствии ПАВ в препаратах 3.

Эксперименты показали, что как для штамма ИМВ Ac-5017, так и ИМВ В-7241 наибольшее ингибирующее действие на фитопатогенные бактерии оказывал препарат 2 – раствор ПАВ. Практически во всех случаях эффективность этих препаратов по отношению к фитопатогенным бактериям родов Pseudomonas и Xanthomonas усиливалась с увеличением времени экспозиции. Так, через 2 ч экспозиции препарат 2 штамма A. calcoaceticus ИМВ В-7241 оказался эффективнее аналогичного препарата R. erythropolis ИМВ AcАктуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии 5017 по отношению к X. vesicatoria 7790 и P. carotovorum УКМ В-1095. И только в одном случае после обработки в течение 2 ч суспензии P. syringae pv.

coronafaciens УКМ В-1154 препаратом 2 штамма ИМВ Ac-5017 наблюдали гибель значительно большего количества клеток, чем в присутствии препарата 2 A. calcoaceticus ИМВ В-7241 (выживание 10 и 33 % соответственно). Таким образом, препарат ПАВ A. calcoaceticus ИМВ В-7241 с концентрацией 0, мг/мл обладал более сильным антимикробным действием, чем препарат R.

erythropolis ИМВ Ac-5017 более высокой концентрации (0.4 мг/мл). Такое явление можно объяснить различным химическим составом исследованных ПАВ. Так, в составе ПАВ штамма ИМВ В-7241 обнаружены аминолипиды [7], которые, как известно, характеризуются достаточно сильным антимикробным действием [3]. Отметим, что после обработки X. vesicatoria ИМВ 7790 и P.

syringae УКМ В-1027 препаратами 2 штамма ИМВ Ас-5017 более низкой концентрации (0,2 и 0,1 мг/мл) наблюдали увеличение количества живых клеток фитопатогенных бактерий, которое коррелировало со снижением концентрации ПАВ в препаратах.

Препарат 1 штамма ИМВ В-7241, представляющий собой супернатант культуральной жидкости, проявлял эффективное антимикробное действие только по отношению к X. vesicatoria 7790 и P. syringae УКМ В-1027, выживание которых через 2 ч экспозиции составляло 0 и 18–19 % соответственно. Препарат 1 штамма ИМВ Ас-5017 оказался не таким эффективным и в лучшем случае в его присутствии наблюдали гибель 20 % клеток P. corrugatе 9070. Отметим, что обработка препаратом 1 тест-культур сопровождалась даже стимуляцией роста некоторых фитопатогенных бактерий, например Xanthomonas campеstris pv. campestris УКМ В-1049.

На следующем этапе исследовали влияние на фитопатогенные бактерии препаратов 3 (водная фаза, оставшаяся после экстракции ПАВ из супернатанта культуральной жидкости) штаммов ИМВ В-7241 и Ас-5017. Отметим, что после обработки суспензии тест-культур X. vesicatoria 7790, P. corrugatе 9070, P. syringae pv. coronafaciens УКМ В-1154 препаратом 3 A. calcoaceticus ИМВ Внаблюдали существенное увеличение количества клеток. Максимальная стимуляция роста в присутствии препарата 3 штамма ИМВ В-7241 установлена для P. syringae УКМ В-1027: уже через 1 ч экспозиции количество клеток этих фитопатогенных бактерий увеличивалось в 3,3 раза. В некоторых случаях препарат 3 A. calcoaceticus ИМВ В-7241 проявлял слабую антимикробную активность (например, против X. campеstris pv. campestris УКМ В-1049 и P.

carotovorum УКМ В-1095).

Препарат 3 R. erythropolis ИМВ Ac-5017 практически не влиял на P.

corrugatе 9070 и незначительно стимулировал рост P. carotovorum УКМ В- через 2 ч экспозиции. В то же время обработка в течение 1 ч препаратом штамма ИМВ Ас-5017 суспензии тест-культур X. сampеstris pv. campestris УКМ В-1049 и P. syringae УКМ В-1027 сопровождалась более существенной стимуляцией роста этих фитопатогенных бактерий (численность 150–165 %).

Максимальную активацию роста в присутствии препарата 3 R. erythropolis Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ИМВ Ac-5017 наблюдали для X. vesicatoria 7790 и P. syringae pv. coronafaciens УКМ В-1154: количество клеток через 2 ч экспозиции возрастало в 3,5–3,7 раза.

Наблюдаемое увеличение количества клеток после обработки препаратами 1 и 3 может быть объяснено тем, что штаммы ИМВ В-7241 и ИМВ Ac-5017, кроме ПАВ, синтезируют ряд других биологически активных веществ, в том числе стимулирующих рост микроорганизмов.

Совершенно другие закономерности наблюдали при действии внеклеточных метаболитов N. vaccinii K-8 на представителей родов Xanthomonas и Pseudomonas. Во-первых, антимикробное действие установлено для всех исследуемых препаратов 1–3 N. vaccinii K-8. Во-вторых, обработка препаратами 1–3 штамма К-8 сопровождалась гибелью значительного количества клеток (80 % и выше). В-третьих, наиболее сильным антимикробным действием обладал препарат 3 (выживание до 3 % максимум, как установлено для Р. syringae УКМ В-1027, для остальных – 100 % гибель через 2 ч экспозиции). В-четвертых, из исследованных препаратов ПАВ всех штаммов препарат 2 N. vaccinii К-8 оказался наиболее эффективным, что может быть объяснено более высокой концентрацией содержащихся в нем ПАВ по сравнению с аналогичными препаратами A. calcoaceticus ИМВ В-7241 и R.

erythropolis ИМВ Ac-5017.

Дальнейшие эксперименты показали, что снижение концентрации ПАВ в препарате 2 штамма К-8 до 0,42 и 0,21 мг/мл практически не влияло на выживание клеток Х. vesicatoria 7790, которое составляло 20–25 % и было таким же, как и после обработки препаратом 2 с более высокой концентрацией ПАВ. Однако при концентрации препарата ПАВ 0,085–0,105 мг/мл наблюдали снижение количества живых клеток до 2–5 %. Обработка суспензии клеток Р. corrugatе 9070 как исходным, так и разбавленным препаратом 2 N.

vaccinii K-8 (концентрация ПАВ до 0,085 мг/мл) не сопровождалась существенным изменением количества живых клеток, которое для всех исследованных в диапазоне 0,085–0,85 мг/мл концентраций ПАВ составляло от 12 до 20 %. При дальнейшем снижении концентрации ПАВ в препарате 2 до 0,042–0,021 мг/мл (разбавление исходного препарата в 2040 раз) выживание клеток постепенно увеличивалось до 80 %.

Данные, представленные в настоящей работе, показывают возможность применения в качестве антимикробного по отношению к фитопатогенным бактериям препарата супернатанта культуральной жидкости N. vaccinii K-8 (без дополнительного выделения ПАВ и других веществ), что значительно удешевляет технологию получения. Кроме того, наши результаты могут быть использованы для разработки безотходной биотехнологии на основе A.

calcoaceticus ИМВ В-7241 и R. erythropolis ИМВ Ac-5017 с целью получения микробных препаратов различного биологического действия. Так, при получении препаратов ПАВ штаммов ИМВ В-7241 и ИМВ Ac- осажденные клетки могут быть использованы для очистки воды от нефти [2];

полученный супернатант культуральной жидкости – для дальнейшего выделения ПАВ с антимикробными (в том числе, и по отношению к фитопатогенным бактериям) свойствами. Учитывая, что водная фаза, Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии оставшаяся после экстракции ПАВ активизировала рост клеток, необходимо в дальнейшем изучить перспективность е использования для стимуляции роста микроорганизмов и растений.

Пирог Т.П., Конон А.Д., Софилканич А.П., Скочко А.Б. Антимикробное действие поверхностно-активных веществ Acinetobacter calcoaceticus K- и Rhodococcus erythropolis EK-1 // Микробиол. журнал. – 2011. – Т.73, № Пирог Т.П., Шевчук Т.А., Волошина И.Н., Гречирчак Н.Н. Использование микроорганизмов для очистки воды от нефти // Прикл. биохимия и микробиология. – 2005. – Т. 41, № 1. – С. 58–63.

3. Das P., Mukherjee S., Sen R. Antimicrobial potential of a lipopeptide biosurfactant derived from a marine Bacillus circulans // J. Appl. Microbiol. – 2008. – V. 104, № 6. – P. 1675–1684.

4. Kalyani R., Bishwambhar M, Suneetha V. Recent potential usage of surfactant from microbial origin in pharmaceutical and biomedical arena: a perspective // International research journal of pharmacy. – 2011. – V. 2, № 8. – P. 11–15.

5. Kulakovskaya, T.V., Golubev, W.I., Tomashevskaya, M.A., Kulakovskaya E.V., Shashkov A.S., Grachev A.A., Chizhov A.S., Nifantiev N.E. Production of antifungal cellobiose lipids by Trichosporon porosum // Mycopathologia. – 6. Velho R.V., Medina L.F.C., Segalin J., Brandelli A. Production of lipopeptides among Bacillus strains showing growth inhibition of phytopathogenic fungi // Folia Microbiol. (Praha). – 2011. – V. 56, № 4. – P. 297–303.

7. Xu X.M., Jeffries P., Pautasso M., Jeger M. J. Combined use of biocontrol agents to manage plant diseases in theory and practice // Phytopathology. –

EXOCELLULAR METABOLITES OF ACINETOBACTER CALCOACETICUS

IMV B-7241, RHODOCOCCUS ERYTHROPOLIS IMV Ac-5017 AND

NOCARDIA VACCINII K-8 AS PREPARATIONS FOR BIOCONTROL OF

PHYTOPATHOGEN BACTERIA

Pokora Kh.A., Chebotarova K.V., Konon A.D., Sofilkanych A.P., Pirog T.P.

It was shown that after 2 hours of treatment by surfactant preparations (0.15– 0.4 mg/mL) of Rhodococcus erythropolis IMV Ac-5017 and Acinetobacter calcoaceticus IMV B-7241 the cell survival (105–107 CFU/mL) of pathogenic bacteria was 0–33%. In the presence of surfactant preparation (0.085–0.85 mg/mL) and other exocellular metabolites of Nocardia vaccinii K-8 the amount of cells of studied phytopathogenic bacteria reduced by 95–100%.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 637.146.

ПОДБОР ШТАММОВ ЛАКТОБАКТЕРИЙ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В

ПРОИЗВОДСТВЕ КИСЛОСЛИВОЧНОГО МАСЛА

Савчук А.И., 5 курс, факультет промышленной биотехнологии Научный руководитель: к.т.н., ст.н.с. Боднарчук О.В., Король Е.В.

Технологический институт молока и мяса НААН г. Киев, Украина Сливочное масло является одним из распространенных продуктов повседневного питания человека. Секретом его популярности на протяжении столетий является органолептическая привлекательность, универсальность использования, высокая пищевая ценность, физиологическая незаменимость [1].

В настоящее время отечественный рынок масложировых продуктов представлен преимущественно сладкосливочным видом масла. Количество кислосливочного масла составляет лишь около 10% от общего объема производства масла, что объясняется сложным и технологически длительным процессом его изготовления, и в первую очередь, отсутствием современных отечественных заквасочных препаратов для него.

Существуют две принципиально разные технологии кислосливочного масла. Одна предусматривает биологическое созревание сливок, по второй – закваску молочнокислых бактерий вносят в масляное зерно на стадии его обработки в таком количестве, чтобы сразу обеспечить желаемую кислотность плазмы масла, вкус и аромат готового продукта. Главным из преимуществ последней технологии является получение сладкой пахты, которая имеет широкую сферу дальнейшего применения [2].

Естественно, что в обоих случаях основными требованиями к штаммам молочнокислых бактерий – компонентов заквасочных культур – является их кислотопродуцирующая активность и способность к накоплению ароматических соединений. Следует отметить, что культуры мезофильных лактококов с умеренным кислотообразованием, и также закваски на их основе, вполне пригодны для применения в первой технологии производства кислосливочного масла. Однако их невозможно автоматически использовать во второй, поскольку для обеспечения необходимой величины рН в условиях внесения закваски на стадии формирования структуры продукта могут только сильные кислотообразователи, которыми являются лактобациллы [3,4].

Таким образом, ключевым критерием перспективности является отбор штаммов молочнокислых бактерий, которые активно продуцируют молочную кислоту и интенсивно синтезируют вкусо-ароматические вещества (летучие органические кислоты, диацетил, эфиры) для создания с их участием бактериального препарата для использования в технологии кислосливочного масла путем внесения в пласт является актуальным вопросом.

Целью работы было проведение скрининга и селекции штаммов лактобактерий, исследование их активности к продуцированию вкусоароматических веществ и основных технологических свойств для создания на Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии их основе заквасочных композиций, перспективных для производства кислосливочного масла.

Материалы и методы исследований. Идентификацию исследуемых штамов проводили за их морфологическими, культуральными и физиологобиохимическими свойствами согласно определителя Берджи. Липолитическую активность определяли дифузным методом лунок с использованием индикаторной среды с твином 80 [5]. Общее количество молочнокислых бактерий и ароматообразующих лактококов определяли стандартным методом высева десятикратных разведений по ГОСТ 10444.11-89. Активную кислотность (рН) кисломолочных сгустков – потенциометрически.

Способность к продуцированию вкусо-ароматических веществ монокультурами молочнокислых бактерий в обезжиренном молоке оценивали по количеству диацетила – по методу Залашко и Макариной, летучих органических кислот – после дистиляции с водяным паром и эфиром – с помощью щелочного гидролиза [6].

Результаты исследований. Путем изучения некоторых технологических и биохимических свойств 108 штаммов, выделенных из образцов масла импортного производства, и 68 коллекционных культур были отобраны для дальнейших исследований 21 штамм мезофильных и термофильных молочнокислых микроорганизмов видов Lactococcus lactis ssp. diacetylactis, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, основные характеристики которых представлены в таблице 1.

Как свидетельствуют данные таблицы 1, исследуемые культуры молочнокислых бактерий проявляют довольно значительную штаммовую вариабельность в характеристиках, важных для будущей закваски для кислосливочного масла. Но универсальных штаммов, которые проявляли бы весь комплекс желаемых свойств на высшем уровне, получить не удалось.

Поэтому по степени получения кислоты и аромата мы оценили их технологическую перспективность относительно использования в составе разрабатываемой закваски, распределив на следующие условные группы: не перспективные, средне перспективные и перспективные (табл.2).

Как свидетельствуют данные, приведенные в табл. 2, практическое использование штаммов молочнокислых бактерий в составе заквасок для кислосливочного масла ограничивается в основном низким производством ними ароматических соединений. Лишь 5% из почти двух сотен исследованных культур по количеству образованного диацетила оценены нами как перспективные.

Определено, что высшей способностью к синтезу вкусо-ароматических соединений, характеризовались отобранные штаммы мезофильных ароматобразующих лактококов вида L. diacetylactis. Так, за ферментирования обезжиреного молока они накапливали летучих органических кислот и диацетила около 333 мкэкв/100 г и 0,590 мг/100 г соответственно. Отмечено, что термофильным стрептококам и лактобацилам свойственно висшее кислотообразование и молокосвертывающая активность. В частности, в кисломолочных згустках лактобацилы продуцировали от 2,5% до 4% молочной Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии кислоты и образовывали згусток не более, чем через 6 часов. Количество молочной кислоты, продуцируемая лактококами, находилась в пределах 1%.

Таблица 1 – Основные характеристики отобранных штаммов при Исследуемые характеристики 4-9 ч 21132, 21133, 21134, 21135, 35031, 35064, 35076, 35094, Количество молочной кислоты на время образования сгустка 0,9 – 1,2% 21132, 21134, 21135, 35031, 35064, 35076, 35094, 31062, до 0,2 мг/100 г 21133, 21134, 21135, 35031, 35064, 35076, 35094, 31062, 0,2 - 0,5 мг/100 г 13061, 13081, 13212, 1353, 1354, 1355, до 30 мкгэкв/100 г 1163, 1164, 1165, 21134, 21135, 35031, 35064, 35076, 30-100 мкгэкв/100 г 21132, 21133, 13061, 13212, больше за мкгэкв/100 г Таблица 2 – Расспределение исследуемых штаммов лактобактерий за их Молокосвертывающая активность Количество молочной кислоты на время образования сгустка Образование летучих органических кислот Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Таким образом, изучение основных характеристик штаммов мезофильных и термофильных молочнокислых бактерий позволило отобрать для дальнейшей работы культуры с наиболее ценными биохимическими свойствами, что соответствуют требованиям, предъявляемым к ним при создании бактериальных культур для кислосливочного масла.

Известно, что гидролитическое расщепление молочного жира может привести к прогорканию продукта. Хотя бактерии, которые осуществляют молочнокислое брожение, характеризуются низким уровнем липолитической активности, однако они могут усиливать активность липазы первичной микрофлоры сливок, которая осталась после их пастеризации. Установлено, что все привлеченные к дальнейшей работе штаммы не проявляют липолитической активности, о чем свидетельствовало отсутствие зон лизиса твина 80 на 7-е сутки их выращивания чашечным методом при оптимальнойтемпературе их роста.

Таким образом, изучение основных характеристик штаммов мезофильных и термофильных молочнокислых бактерий позволило отобрать для дальнейшей работы культуры с наиболее ценными биохимическими свойствами, что соответствуют требованиям, предъявляемым к ним при создании бактериальных культур для кислосливочного масла.

Полученные результаты позволяют считать целесообразным объединение в одной закваске слабых кислотообразователей L. diacetilactis (13202, 13081, 1354, 1355), которые в то же время являются активными продуцентами ароматических соединений, с болгарской и ацидофильной палочками (21132, 21134, 21135, 35031, 35064, 35076, 35094, 31062, 31311), которые накапливают большое количество молочной кислоты. Благодаря такой особенности появляется возможность получить заквасочные препараты, которые предоставят конечному продукту желаемого кисломолочного вкуса и аромата.

1. Лукащук А. Как совместить приятное с полезным, или натуральностьпревышевсего// Молочное дело – 2007 – № 2 – с. 36-37.

2. Котова О. Г. Повышения качества сливочного масла – М.: Пищ. пром-сть, 3. Вышемирский Ф.А., Топникова Е.В., Павлова Т.А., Перфильев Г.Д., Матевосян Л.С. Исследования технологи кислосливочного масла // Сыроделие и маслоделие. – 2008. – №5 – с.45-46.

4. Mallia S., Escher F., Schlichtherle-Cerny H. Aroma-active compounds of butter: a review // European Food Research and Technology – 2008. – Vol. 226.

5. Уманский М.С., Боровкова Ю. А. Липолитическая активность промышленность. – 1998. – №4. – С. 20- 6. Инихов Г.С., Брио Н.П. Методы анализа молока и молочных продуктов. – М.: «Пищев. пром.». – 1971. – С.132-133.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии

SELECTION OF LACTIC ACID BACTERIA FOR CREAT

OF STARTER FOR SOUR-CREAM BUTTER

It was performed the selection of strain of mesophilic and thermophilic lactic acid bacteria with high biological activity for creat bacterial composition for manufacture of acid-cream butter, including active accumulation of lactic acid and substances with flavorous properties.

УДК

ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ

ПРОИЗВОДСТВ НА ОСНОВЕ БАЗЫ ДАННЫХ ГОТОВЫХ

ПРОДУКТОВ И КАТАЛОГА ТИПИЧНЫХ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ И

АППАРАТУРНЫХ СХЕМ

Погребной Ю.Н., 5 курс, факультет биотехнологии и микробиологии.

Научный руководитель: к.т.н., доцент Карлаш Ю.В.

Национальный университет пищевых технологий г. Киев, Украина Моделирование является одним из наиболее значимых направлений при разработке биотехнологических процессов, так как с помощью моделирования, экспериментального и математического, исследуются и разрабатываются новые процессы, совершенствуются аппараты и технологические схемы производств [1].

Бурное развитие вычислительной техники привело к тому, что слово «автоматизация» все чаще используется не только применительно к технологическим установкам, механизмам и машинам, но и по отношению к труду инженера или научного сотрудника. При этом важно, что современные средства автоматизации инженерного труда облегчают и ускоряют проведение рутинных расчетов, а также позволяют решать задачи, которые без использования вычислительной техники решить практически невозможно [3].

Использование передовых информационных технологий (ИТ) является важнейшим фактором развития системы современного биотехнологического образования. Компьютерные технологии создают принципиально новые возможности не только в получении новых знаний в области биотехнологии, но и в приобретении профессиональных навыков. Внедрение ИТ-технологий влияет как на содержание, так и на качество биотехнологического образования [4].

Биотехнологические объекты характеризуются сложной, многоуровневой организацией, которая обладает следующими признаками:

многофакторность влияний и отзывов биотехнологической системы;

большой размерностью первичных данных, регистрируемых в ходе эксперимента, доступ к которым должен быть быстрым, простым, с возможностью использования полученной информации для дальнейших расчетов;

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии сложностью алгоритмов планирования, проведения и обработки биотехнологического эксперимента;

необходимостью проведения имитационных экспериментов;

потребностью в манипуляторах, транспортных работах как для улучшения работы экспериментатора, так и соблюдение регламентов и стерильности процесса [2].

биотехнологических процессов – задача сложная и во многом еще не решенная. Однако именно разработка адекватных моделей различных биотехнологических процессов и на их основе создание совершенных методов оптимизации и управления – важнейшее направление биотехнологии, без которого невозможен прогресс [1].

Сложность изучения биотехнологических объектов приводит к необходимости использования систем автоматизированного проектирования (САПР) для расчетов в режиме имитации объекта и введения его в контур управления биотехнологическим процессом. Применение вычислительной техники вместе с соответствующим программным обеспечением приводит к более эффективной обработки получаемой информации, оценке ее надежности в ходе эксперимента и организации исследований с таким расчетом, чтобы максимально увеличить информативность и ценность получаемых данных.

Эффективный метод общения исследователя с электронновычислительной машиной (ЭВМ) в диалоговом режиме (интерактивное взаимодействие) позволяет быстро оценивать задачи, которые возникают перед ним, и принимать оперативные решения. С точки зрения исследователя ЭВМ является крайне удобным инструментом (прибором), а САПР – методом, на которые можно положить множество обязательств [3].

В настоящее время в мире существуют различные элементы биотехнологического САПР, но через свою приватность они остаются недоступными для рядового исследователя. Единственным же путем решения этой проблемы остается собственноручное создание такой технологии и то, если она понадобится для будущих исследований такого рода. Все, что же является более или менее доступным (некоторая информация является платной), – это базы данных (БД), размещенные во всемирной паутине. Среди них БД, содержащие сведения в области наук о жизни, которые составляют фундаментальную основу для исследований в области биотехнологии (Medline, Science Citation Index) и специализированные биотехнологические БД (Derwent Biotechnology Abstracts, BioBusiness, Cell).

Цель работы. Создание собственных элементов САПР на основе базы данных «биотехнологический продукт», а также каталога типовых технологических и аппаратурных схем (для общего пользования).

Материалы и методы решения проблемы. Предложенная САПР программируется на базе стандартного пакета Windows, Microsoft Office и включает в себя: базу данных Microsoft Access и каталог типовых схем в Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Microsoft Visio. Именно такой выбор программного обеспечения не является случайным, ведь из-за своей распространенности и легкодоступности не возникает никаких проблем с установкой этого программного пакета на компьютер пользователя. Также понятен и знакомый всем интерфейс не требует особых навыков при использовании, даже у людей, которые впервые сталкиваются с этим САПР, чего не скажешь о AutoCAD, COMPAS и т.п.

Создаваемая база данных содержит информацию о современных биотехнологиях получения готовых продуктов: общие сведения о них (использование, необходимость), основные и возможные продуценты, пути синтеза (изготовления), в том числе и альтернативные. Каталог типовых схем состоит из стандартных блоков для построения технологической и аппаратурной схем.

Выводы. Дальнейшее развитие биологических технологий во многом связано с прогрессом в области технических наук. Повышение эффективности биотехнологических процессов невозможно без автоматизации и совершенствования аппаратурного и технологического оформления процессов. Это позволит повысить эффективность традиционных биотехнологических процессов и расширит сферы применения получаемых продуктов. Сегодня огромные средства инвестируются на масштабирование биотехнологических процессов. По оценкам специалистов, инвестиции в этой области будут возрастать в среднем на 9 % в год [1].

Имеющийся опыт автоматизации биотехнологических исследований показывает, что автоматизированные системы перестали быть вспомогательными, отсутствие системы автоматизации не может быть скомпенсировано умением, изобретательностью и находчивостью исследователя.

Комплексная система автоматизации научных исследований в биотехнологии позволяет:

обеспечить высокий уровень научно-технического прогресса;

повысить эффективность и качество научных исследований на основе получения с помощью ЭВМ более полных моделей изучаемых объектов, явлений или процессов, а также применение этих моделей для прогнозирования и управления;

повысить эффективность разработок объектов исследования и уменьшить затраты на их создание (генная инженерия);

получить качественно новые научные результаты;

сократить сроки и уменьшить трудоемкость научных исследований [2].

И так, создаваемые элементы САПР предоставляют каждому их пользователю возможность быстро найти необходимую информацию о необходимом ему биотехнологическом продукте с помощью интерактивного поиска. Ознакомившись с ней, исследователь перейдет ко второй части – построения технологической и аппаратурной схем, теперь не придется тратить много времени на вырисовывание каждого блока, все, что нужно Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии сделать – это просто выбирать определенные стандартные блоки вспомогательных и основных процессов при построении технологической схемы, а также –необходимое оборудование для ферментации, выделения, очистки и т.п. при проектировании аппаратурной схемы.

«Источником питания» данной САПР может быть каждый его пользователь, который с легкостью сможет обновить или создать новую информацию. Данная программа может стать незаменимой при анализе биотехнологий в целом и при выполнении дипломных и курсовых проектов.

1. Волова, Т. Г. Введение в биотехнологию. Версия 1.0 [Электронный ресурс] : электрон. учеб. пособие / Т. Г. Волова. – Электрон. дан. ( Мб). – Красноярск : ИПК СФУ, 2008. – (Введение в биотехнологию :

УМКД № 143-2007 / рук. творч. коллектива Т. Г. Волова).

2. Зудин Д.В., Кантере В.М., Угодчиков Г.А. Биотехнология: Учеб.

Пособие для вузов: В 8 кн./Под ред. Егорова Н.С., Самуилова В.Д. Кн.

4. Автоматизация биотехнологических исследований. – М.: Высш. шк., 1987. – 112 с. [4] л. ил.: ил.

3. Кантере В.М. Теоретические основы технологии микробиологических производств: Учебники и учеб. Пособия для студентов высш. учеб.

заведений. – М.: Агропромиздат, 1990. – 271с: ил.

4. Орловская Т.Т., Тележинская И.Н. Базы данных для биотехнологов.

Интернет-журнал «Коммерческая биотехнология» [Електронний ресурс] http://www.cbio.ru/modules/news/print.php?storyid=785.

THEORETICAL MODELING OF BIOTECHNOLOGY BASED ON

DATABASE AND FINISHEDPRODUCT CATALOG TYPICAL FLOW AND

HARDWARE SCHEMES

The work is devoted to theoretical modeling of biotechnological production.

Improving the efficiency of biotechnological processes is impossible without the automation and improvement of instrumentation and process design process. This will improve theefficiency of traditional biotechnological processes and broaden the scope of the products.

УДК

ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ДНК-ВАКЦИН В ПРОФИЛАКТИКЕ

ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

Таранова-Ибрагимова Р.Ф., 4 курс, факультет ветеринарной медицины Научный руководитель: к.б.н., ст. преподаватель Н.П. Журавская В ближайшие 5-15 лет ожидаются кардинальные изменения в области вакцинации. Один из новых подходов связан с разработкой ДНК-вакцин для профилактики инфекционных болезней человека и животных.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии ДНК-вакцины – вакцины, полученные из плазмидных ДНК, кодирующих антигены возбудителей заболеваний. На животных была показана возможность выработки не только антител, но и специфического цитотоксического ответа (клеточный иммунитет), что ранее считалось достижимым только с помощью живых вакцин [2, 3].

Метод ДНК-вакцинации основан на введении в организм плазмидной ДНК, кодирующей белок патогена. Такой подход позволяет получить полный иммунный ответ к различным бактериальным и вирусным антигенам [2, 5].

Метод ДНК-вакцинации обладает рядом преимуществ, наиболее важным из которых, возможно, является то, что он запускает как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ. Вакцины на основе ДНК также вызывают долговременную экспрессию антигена и, соответственно, стойкий иммунный ответ. К дополнительным факторам, благоприятствующим разработке плазмидных стратегий ДНК-иммунизации, относятся относительная простота и низкая стоимость производства таких вакцин, а также их стабильность [6, 7].

Впервые предположение, что гены могут быть использованы для вакцинации, появилось в 50-60-е гг. после серии экспериментальных исследований. Эксперименты, к слову вовсе не имевшие отношения к созданию вакцин, продемонстрировали один интересный эффект, который сегодня, впрочем, кажется очевидным. Ученые обнаружили, что фрагменты «чужой»

ДНК, имплантированные в клетки животных, способны в некотором количестве синтезировать собственные белки. Сами клетки, получившие гены другого организма, в ответ начинают вырабатывать антитела. Позднее результаты этих экспериментов подтвердились в ходе других исследований, проводившихся с целью создания новых методов лечения различных заболеваний, прежде всего наследственного характера. Имеется в виду генная терапия, первые попытки применения которой были не слишком удачными.

Опыты на животных показали, что «терапевтические» гены, имплантируемые с целью исправить различные нарушения, провоцируют иммунную реакцию и потому долго не живут. Такое наблюдение позволило рассматривать иммунный ответ на появление чужеродных генов как принцип действия вакцин нового типа [1, 4].

В последние 10 лет ДНК-вакцины из сомнительной идеи превратились в чрезвычайно перспективное направление биомедицинских исследований.

Из уже созданных ДНК-вакцин протективный иммунный ответ вызывают лишь две – против гепатита В и малярии, причем наибольший эффект достигается при их чрезкожном или внутрикожном введении [6, 7]. Ученые бьются над созданием вакцин будущего: от синдрома иммунодефицита человека и синдрома хронической усталости, отита и лихорадки Денге, ОРЗ и гипертонии. Врачи мечтают о введении иммуннопаспортов для каждого человека, в которых подробно пропишут, как организм их владельцев реагирует на лекарства и инфекции. Средства массовой информации активно повышают иммунологическую грамотность населения и знакомят с открытиями в области вакцинологии. Вот лишь некоторые изобретения, которые в скором будущем сильно облегчат нашу жизнь.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Синтетические вакцины – искусственно созданные молекулы, аналогичные молекулам естественных антигенов, способны формировать иммунитет к разным видам инфекций. В настоящее время экспериментально получены синтетические вакцины против холеры, стрептококковой инфекции, гепатита В, гриппа, ящура. Синтетические вакцины не имеют недостатков, характерных для живых вакцин (возврат патогенности, неполная инактивация и т. п.).

Вакцины-леденцы – в основу их производства положено свойство сахара трегалозы сохранять клетки живыми даже при крайней степени обезвоживания.

При охлаждении насыщенного раствора трегалоза постепенно переходит в состояние «леденца», которое обездвиживает, защищает и сохраняет белковые молекулы. Чтобы высвободить белки, нужно всего лишь плеснуть на «леденец»

водой. Использование этой технологии позволит не только сократить расходы на транспортировку и хранение вакцин, но и поможет создать новые формы лекарства. Например, «сахарные» вакцинные иглы станут просто вводить в кожу, где они будут растворяться и постепенно высвобождать вакцину.

Возможно приготовление вакцины и в виде быстрорастворимого порошка.

Микрокапсулированные вакцины – для получения таких вакцин используются биодеградирующие микросферы, которые с одной стороны предохраняют антиген от вредного влияния окружающей среды, а с другой стороны распадаются и освобождают антиген в заданное время. Микрокапсулы состоят из нетоксичных полимеров лактида или гликолида их сополимеров.

Микросферы могут быть разной величины, максимальный диаметр обычно не превышает 10 микрон. Вакцины можно вводить любым способом (парентерально, орально, интраназально). С помощью микросфер можно проводить комплексную вакцинацию против нескольких инфекций одновременно: каждая капсула может содержать несколько антигенов, а для иммунизации можно брать смесь различных микрокапсул. Таким образом, микрокапсулирование позволяет значительно сократить количество инъекций при вакцинации.

Вакцина будущего: пластырь от болезней – это еще одно новшество в производстве вакцин. Было показано, что кожные пластыри, пропитанные Всубъединицей холерного токсина, не вызывают токсического эффекта. В то же время, они активируют антиген-презентирующие клетки, находящиеся в изобилии в коже. При этом развивается мощный иммунный ответ – как антительный, так и клеточный. Если в пластыре холерный токсин смешать с другим вакцинным антигеном, то иммунный ответ развивается и к нему. Такой путь испытывается для иммунизации против столбняка, бешенства, дифтерии, гриппа [7].

Вакцина против кариеса – исследователи из Института вирусологии в Вухэне (Китай) получили вакцину против кариеса, составив ее из ДНК и белка двух разных бактерий. Суть е заключается в том, что в организм вводится не белок патогенного микроорганизма, а его ДНК. Эта ДНК проникает в клетки, транспортируется в ядро и служит матрицей для синтеза бактериального или вирусного белка. Последний выставляется на наружной мембране, где его Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии могут увидеть иммунные клетки и «потренироваться» на нм, чтобы при появлении настоящего патогенного микроорганизма иммунитет был готов к встрече [7].

1. Букринская А.Г., Жданов В. М. Молекулярные основы патогенности вирусов.– М., 1991.

2. Дебабов В.Г. // Молекулярная биология, 1997.

3. Иммунопрофилактика – 2000 / под ред. В.К. Таточенко и Н.А.

Озерецковского. – М., 4. Медуницын Н.В. Вакцинология. – М., 1999.

5. Никоноров Ю.М., Чубукова О.В. Перспективы применения ДНК-вакцин в профилактике хантавирусных инфекций. – Тихоокеанский медицинский 6. Denise R. Shaw, Theresa V. Strong DNA VACCINES FOR CANCER Frontiers in Bioscience 11, 1189-1198, January 1, 2006.

7. http://bio.fizteh.ru

PROSPECTS OF DNA VACCINE IN PREVENTION

OF INFECTIOUS DISEASES

Zhuravskaya N.P., Taranova-Ibragimova R.F.

This article contains information about methods of prevention of infectious diseases using DNA vaccines УДК 759.873.088.5:661.

СИНТЕЗ МИКРОБНЫХ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ В

ПРИСУТСТВИИ КАТИОНОВ МЕДИ

Филюк И.В., 5 курс, факультет биотехнологии и экологического контроля Софилканич А.П., аспирант 3-го года обучения Научный руководитель: д.б.н., профессор Пирог Т.П.

Национальный университет пищевых технологий, г. Киев, Украина Ранее мы сообщали о способности изолированных нами штаммов Rhodococcus erythropolis ИМВ Ас-5017 и Acinetobacter calcoaceticus ИМВ Всинтезировать поверхностно-активные вещества (ПАВ) при культивировании на гидрофильных и гидрофобных субстратах: н-гексадекан, жидкие парафины, этанол, глюкоза, глицерин [1–3]. В дальнейших исследованиях была показана возможность интенсификации синтеза ПАВ штаммами ИМВ В-7241 и ИМВ Ас-5017 при внесении в среду с этанолом (нгексадеканом, глицерином) органических кислот, использовании смешанных энергетически неравноценных ростовых субстратов и масштабировании процесса на ферментационное оборудование.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Установлено, что препараты ПАВ R. erythropolis ИМВ Ас-5017 и A.

calcoaceticus ИМВ В-7241 повышают степень деструкции нефтяных загрязнений в воде и почве, а также обладают антимикробными свойствами.

Из литературы известно, що микробные поверхностно-активные вещества (рамнолипиды, софоролипиды, липопептиды) характеризуются также способностью к образованию стабильных комплексов с тяжелыми токсичными металлами (Al3+, Zn2+, Fe2+, Hg2+, Ca2+, Co2+, Ni2+, Mn2+, Mg2+, K+, Сu2+, Pb2+, Cd2+), благодаря чему защищают клетки продуцента от их действия, а также могут использоваться в природоохранных технологиях для удаления металлов [5, 4].

Цель данной работы – исследовать рост и синтез ПАВ при культивировании R. erythropolis ИМВ Ас-5017 и A. calcoaceticus ИМВ В- на средах с различными источниками углерода в присутствии катионов меди.

Культивирование A. calcoaceticus ИМВ В-7241 и Rhodococcus erythropolis ИМВ Ас-5017 проводили на описанных нами ранее питательных средах [1–3].

В качестве источника углерода и энергии использовали этанол, н-гексадекан, жидкие парафины (С10–С18), а также подсолнечное масло в концентрации 2 % (по объему). При культивировании R. erythropolis ИМВ Ас-5017 на среде с подсолнечным маслом в среду дополнительно вносили 0,1 % глюкозы. В начале процесса культивирования, в экспоненциальной и стационарной фазе роста штаммов ИМВ В-7241 и ИМВ Ас-5017 в среду вносили Сu2+ (0,01–0,5 мМ) в виде 1М раствора CuSO4·5H2O.

Рост бактерий и синтез ПАВ оценивали по таким показателям:

концентрация биомассы, поверхностное натяжение (s) свободной от клеток культуральной жидкости, условная концентрация ПАВ (ПАВ*, безразмерная величина), индекс эмульгирования культуральной жидкости (Е24, %) [1–3].

На первом этапе исследовали рост и синтез ПАВ при внесении в этанолсодержащую среду культивирования R. erythropolis ИМВ Ас-5017 Сu2+ в концентрации 0,1 и 0,5 мМ. Установлено, что в этом случае независимо от концентрации катионов меди и момента их внесения (начало процесса, экспоненциальная или стационарная фаза роста) наблюдалось полное ингибирование роста бактерий и образования ПАВ. Поэтому в дальнейших исследованиях концентрацию Сu2+ снижали в 10 раз. Показано, что внесение Сu2+ (0,01 и 0,05 мМ) в среду с этанолом в начале процесса культивирования штамма ИМВ Ас-5017 сопровождалось снижением в 3–4 раза уровня биомассы и в 1,7 раза концентрации ПАВ по сравнению с показателями на среде без катионов меди. В связи с этим в последующих экспериментах внесение Сu2+ осуществляли только в экспоненциальной и стационарной фазе роста бактерий.

При добавлении 0,01 мМ Сu2+ в экспоненциальной фазе роста R.

erythropolis ИМВ Ас-5017 на среде с этанолом наблюдали увеличение условной концентрации ПАВ на 25 % посравнению с культивированием штамма на среде без Сu2+. При этом концентрация биомассы незначительно снижалась, а индекс эмульгирования культуральной жидкости практически не изменялся. Внесение 0,01 мМ Сu2+ в стационарной фазе роста R. erythropolis ИМВ Ас-5017 на среде с этанолом или повышение концентрации катионов меди до 0,05 мМ не Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии сопровождалось каким-либо существенным изменением концентрации биомассы, показателя ПАВ* и Е24. После пересева бактерий, выращенных в присутствии Сu2+, на среду без катионов меди наблюдали некоторое снижение показателей синтеза ПАВ по сравнению с использованием посевного материала, полученного на среде с этанолом без Сu.

В то же время при культивировании штамма ИМВ Ас-5017 на нгексадекане или подсолнечном масле наблюдали совсем другие закономерности, чем при выращивании на этаноле. Во-первых, клетки, растущие на гидрофобных субстратах, оказались устойчивыми к более высоким концентрациям катионов меди. Во-вторых, стимуляция синтеза ПАВ в присутствии катионов меди была более существенной, чем на этаноле. Так, внесение 0,1 мМ Сu2+ в экспоненциальной фазе роста R. erythropolis ИМВ Асна среде с н-гексадеканом или подсолнечным маслом сопровождалось увеличением условной концентрации ПАВ на 40–42 % по сравнению с культивированием бактерий на средах без Сu2+.

Независимо от момента внесения более высокой (0,5 мМ) концентрации Сu в среду с подсолнечным маслом наблюдали снижение показателя ПАВ* в 1,6–1,7 раза по сравнению с таковым на среде без катионов меди. При культивировании штамма ИМВ Ас-5017 на среде с н-гексадеканом условная концентрация ПАВ снижалась всего в 1,2–1,3 раза при добавлении 0,5 мМ Сu2+ только в экспоненциальной фазе роста. Отметим, что при внесении катионов меди в среду с гидрофобными субстратами не отмечали существенных изменений концентрации биомассы и индекса эмульгирования культуральной жидкости по сравнению с показателями на среде без Сu2+.

Внесение максимальной из исследованых концентраций Cu2+ (0,5 мМ) в экспоненциальной фазе роста штамма ИМВ В-7241 на среде с этанолом, нгексадеканом и жидкими парафинами сопровождалось увеличением условной концентрации ПАВ на 50–60 % по сравнению с показателем на среде без катионов меди. Добавление катионов меди как в экспоненциальной, так и стационарной фазе роста A. calcoaceticus ИМВ В-7241 на всех исследуемых субстратах практически не сказывалось на значении индекса эмульгирования (Е24) и концентрации биомассы. Максимальное повышение (на 140 %) значения ПАВ* было зафиксировано при внесении 0,1 мМ Cu2+ в экспоненциальной фазе роста штамма ИМВ В-7241 на среде с жидкими парафинами. Отметим, что при культивировании A. calcoaceticus ИМВ В-7241 на этом субстрате существенное (в 2 и более раз) повышение условной концентрации ПАВ наблюдали во всех вариантах добавления катионов меди (независимо от их концентрации и момента внесения).

Интересным оказался тот факт, что пересев бактерий A. calcoaceticus ИМВ В-7241, выращенных на всех субстратах в присутствии Cu2+, на среду без катионов меди сопровождался существенным повышением показателя ПАВ* по сравнению с использованием аналогичного инокулята, полученного на среде без Cu2+. При этом максимальное (в 2,1–3,5 раза) увеличение условной концентрации ПАВ было отмечено при культивировании штамма ИМВ В- на жидких парафинах.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Данные, представленные выше, свидетельствуют, что увеличение синтеза ПАВ в ответ на внесение катионов меди более значительное при культивировании A. calcoaceticus ИМВ В-7241 и R. erythropolis ИМВ Ас- на средах с гидрофобными субстратами. Мы предположили, что положительное влияние Cu2+ на синтез ПАВ при выращивании бактерий на средах с углеводородами (н-гексадекан, жидкие парафины) может быть обусловлено активирующим действием катионов меди на активность монооксигеназ, катализирующих первую реакцию катаболизма этих субстратов. Ранее [1] нами было показано, что окисление н-гексадекана у алкангидроксилазным комплексом, состоящим из растворимой НАДНрубредоксинредуктазы, растворимого рубредоксина и мембран- связанной монооксигеназы, или алкангидроксилазы (АлкБ). Эксперименты показали, что этот фермент функционирует и у штамма A. calcoaceticus ИМВ В-7241, растущего на углеводородах.

Исследование активности алкангидроксилазы обоих штаммов в присутствии Cu2+ показало, что катионы меди являются активаторами этого фермента. Так, присутствии 0,05 и 0,1 мМ Cu2+ активность алкангидроксилазы штамма ИМВ Ас-5017 повышалась в 1,5 и 2 раза соответственно. Более существенным было увеличение после внесения катионов меди активности алкангидроксилазы A. calcoaceticus ИМВ В-7241. Так, в присутствии 0,01 и 0, мМ Cu2+ алкангидроксилазная активность штамма ИМВ В-7241 повышалась в 3 раза. Отметим, что при концентрации катионов меди 0,01 мМ активность данного фермента у R. erythropolis ИМВ Ас-5017 увеличивалась незначительно (с 769 до 870 нмольмин-1мг-1 белка).

Поскольку увеличение синтеза ПАВ наблюдалось и при внесении Cu2+ в этанолсодержащую среду, мы предположили, что катионы меди могут также являться активаторами ключевых ферментов С2-метаболизма и биосинтеза ПАВ. Показано, что в присутствии определенных (разных для различных ферментов) концентраций Cu2+ в реакционной смеси наблюдается увеличение активности как 4-нитрозо-N,N-диметиланилин(НДМА)-зависимой алкогольдегидрогеназы, так и ферментов биосинтеза поверхностно-активных глико- (фосфоенолпируват-(ФЕП)-синтетаза) и аминолипидов (НАДФ+зависимая глутаматдегидрогеназа) у бактерий A. calcoaceticus ИМВ В-7241, растущих на этаноле.

Таким образом, в результате проведенной работы установлена возможность интенсификации синтеза ПАВ R. erythropolis ИМВ Ас-5017 и A.

calcoaceticus ИМВ В-7241 на гидрофобных (н-гексадекан, жидкие парафины, подсолнечное масло) и гидрофильных (этанол) субстратах при внесении катионов меди в экспоненциальной фазе роста обоих штаммов или использовании посевного материала A. calcoaceticus ИМВ В-7241, выращенного до стационарной фазы роста на среде с Cu2+.

Полученные результаты могут быть основой для повышения эффективности технологий микробного синтеза путем увеличения в среде Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии культивирования продуцента активаторов ключевых ферментов метаболизма ростового субстрата и биосинтеза целевого продукта.

1. Пирог Т.П., Шевчук Т.А., Клименко Ю.А. Интенсификация синтеза поверхностно–активных веществ при культивировании Rhodococcus erythropolis ЕК-1 на н-гексадекане // Прикл. биохимия и микробиология.

– 2010. – Т. 46, № 6. – С. 651–658.

2. Пирог Т.П., Антонюк С.И., Карпенко Е.В., Шевчук Т.А. Влияние условий культивирования штамма Acinetobacter calcoaceticus K-4 на синтез поверхностно-активных веществ // Прикл. биохимия и микробиология. – 3. Пирог Т.П., Шевчук Т.А., Конон А.Д., Шулякова М.А., Иутинская Г.А.

Синтез поверхностно-активных веществ Acinetobacter calcoaceticus ИМВ В-7241 и Rhodococcus erythropolis ИМВ Ас-5017 в среде с глицерином // Микробиол. журнал. – 2012. – Т. 74, № 1. – С. 20–27.

4. Orell A., Navarro C.A., Arancibia R., Mobarec J.C., Jerez C.A. Life in blue:

copper resistance mechanisms of bacteria and archaea used in industrial biomining of minerals // Biotechnol. Adv. – 2010. – V. 28, N 6. – P. 839848.

5. Jayabarath J., Sundar S.S., Arulmurugan R., Giridhar R. Bioremediation of heavy metals using biosurfactants // Int. J. Biotechnol. Appl. – 2009. – V. 1, N

SYNTHESIS OF MICRIBIAL SURFACTANTS IN PRESENCE OF

COPPER CATIONS

It was established that the addition of Cu2+ in the exponential growth phase of Rhodococcus erythropolis IMV B-7241 and Acinetobacter calcoaceticus IMV Acon hydrophobic (n-hexadecane, liquid paraffin, sunflower oil) and hydrophilic (ethanol) substrates was accompanied by increased conditional concentrations of surfactants by 25–140% compared to the indexes on medium without copper cations.

УДК 579.

ПОДБОР ОПТИМАЛЬНЫХ УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ДЛЯ

ПРОДУКЦИИ ЭКЗОПОЛИСАХАРИДА БАКТЕРИЯМИ

Шипулина О.С., 5 курс, факультет ветеринарной медицины и биотехнологии Научный руководитель: аспирант Кичемазова Н.В., к.б.н., доцент Бухарова Е.Н., д.б.н., профессор Карпунина Л.В.

ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет Экзополисахариды (ЭПС) микробного происхождения все больше привлекают внимание исследователей в связи с их применением в различных отраслях народного хозяйства. В связи с этим поиск новых микроорганизмовАктуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии продуцентов этих биополимеров является актуальным. В этом плане малоизученными являются бактерии рода Xantobacter. Поэтому цель работы состояла в подборе оптимальных условий культивирования для продукции ЭПС бактериями Xantobacter xylophilus Z-0055. Xantobacter xylophilus Z- были получены из лаборатории реликтовых культур ФГБУН Института Микробиологии им. С.Н. Виноградского РАН.

Культуру выращивали при 25 °С и 31 °С в течение 100 ч на термостатированном шейкере-инкубаторе (Шейкер-инкубатор ES-20 (Литва)), при встряхивании 200 об/мин, 100 об/мин и без аэрации на среде «МС» (рН 5,5), содержащей: модифицированные соли Хатнера (1 мл/л) в качестве минеральной основы, дрожжевой экстракт (0,1 г/л) в качестве фактора роста, сукцинат (1 г/л) в качестве источника углерода и 0,1 мл спиртового раствора витаминов и среде «МСО», содержащей все компоненты среды «МС» и дополнительно внесенные источники азота (0,25 г/л) и фосфора (0,07 г/л) [1]. О росте бактерий судили по оптической плотности при 425 нм. Содержание сахаров в растворе определяли фенол-серным методом [2].

При выращивании бактерий на вышеперечисленных средах наблюдали различную динамику выделения ЭПС культурой X. xylophilus Z-0055 в зависимости от температуры культивирования. При 25 °С на среде «МС»

продукция ЭПС составила 0,25 г с 1г клеток, на среде «МСО» 0,1 г с 1 г клеток (рис.1). При повышении температуры до 31 °С на среде «МС»

продукция ЭПС составила 0,3 г с 1 г клеток, а на среде «МСО» 0,1 г с 1 г клеток (рис.2). При встряхивании на шейкер-инкубаторе при 200 об/мин наблюдали максимальный выход ЭПС на среде «МС» при 31°С.

Рис.1 Динамика роста (1, =425 нм) и выхода экзополимера (2, =490 нм) X. xylophilus Z-0055 при 25° С на средах «МС» (А) и «МСО» (В) Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Рис.2 Динамика роста (1, =425 нм) и выхода экзополимера (2, =490 нм) X. xylophilus Z-0055 при 31°С на средах «МС» (А) и «МСО» (В) Таким образом, для максимальной продукции ЭПС бактериями X. xylophilus Z-0055 оптимальными являются среда «МС», температура 31 °С, встряхивание 200 об/мин.

1. Cohen-Bazire G., Sistrom W.R., Stanier R.Y. // J.Cell. Comp. Physiol. 1957. V.

2. Dubois M., Gilles K. A., Hamilton J. K., Rebers P. A., Smith F. Colorimetris method for determination of sugars and related substances // Anal. Chem.

1956. Vol. 28, № 3. Р. 350 – 356.

SELECTION OF OPTIMAL CONDITIONS FOR CULTIVATION OF

BACTERIA XANTOBACTER FOR THE PRODUCTION OF

EXOPOLYSACCHARIDE.

Shipulina O.S., Kichemasova N.V., Boukharova E.N., Karpunina L.V.

The article gives information about the selection of optimal conditions for culturing bacteria Xantobacter xylophilus Z-0055 in order to obtain the maximum exopolysaccharide output. The object of research is bacteria Xantobacter xylophilus Z-0055. In the future, optimization of culture conditions for the production of EPS will allow to apply them in various sectors of national economy.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии УДК 759.873.088.5:661.

СИНТЕЗ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

ACINETOBACTER CALCOACETICUS К-4 И RHODOCOCCUS

ERYTHROPOLIS ЕК-1 НА ГЛИЦЕРИНЕ

Шулякова М.А., 5 курс, факультет биотехнологии и экологического контроля Мащенко О.Ю., 4 курс, факультет биотехнологии и экологического контроля Научный руководитель: д.б.н., профессор Пирог Т.П.

Национальный университет пищевых технологий, г. Киев, Украина Институт микробиологии и вирусологии НАН Украины В связи с увеличением объемов производства биодизеля в мире возникает проблема утилизации глицерина – побочного продукта трансэтерификации растительных масел или животных жиров [1]. Существующие на данный момент технологии его использования являются не достаточно экологически безопасными и экологически выгодными. Поиск новых, более современных методов переработки технического глицерина позволит не только решить проблему его утилизации, но и повысить рентабельность производства биотоплива. Одним из возможных путей использования глицерина является применение его в качестве субстрата в биотехнологических процессах для получения практически ценных продуктов, в том числе и микробных поверхностно-активных веществ (ПАВ) [1]. Благодаря уникальным свойствам ПАВ микробного происхождения используются в различных отраслях промышленности, а также природоохранных технологиях [2].

В предыдущих исследованиях из загрязненных нефтью образцов почвы были выделены нефтеокисляющие бактерии, идентифицированные как Rhodococcus erythropolis ЕК-1 и Acinetobacter calcoaceticus К-4, и показана способность изолированных штаммов к синтезу ПАВ на гидрофильных (этанол, глюкоза) и гидрофобных (гексадекан, жидкие парафины) субстратах [3, 4]. По химической природе ПАВ R. erythropolis ЕК-1 являются комплексом глико-, фосфо- и нейтральних липидов, а A. calcoaceticus К-4 – глико-, амино- и нейтральных липидов. Гликолипиды обох штаммов представлены трегалозомиколатами [3, 4].

Цель данной работы – исследовать возможность использования глицерина в качестве субстрата для получения ПАВ R. erythropolis ЕК-1 и A.

calcoaceticus К-4, а также поиск путей интенсификации биосинтеза этих метаболитов на данном субстрате.

Исследование роста и образования ПАВ на среде с глицерином (степень очистки 98%) показало, что данные штаммы способны ассимилировать этот субстрат и синтезировать метаболиты с поверхностно-активными и эмульгирующими свойствами. Поскольку количество синтезированных ПАВ было ниже, чем на традиционных субстратах [3, 4], на следующем этапе исследовали возможность интенсификации их синтеза штаммами ЕК-1 и К-4 на среде с «чистым» глицерином.

Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии Учитывая химический состав ПАВ, мы предположили, что внесение в среду цитрата натрия (регулятора синтеза липидов) и фумарата натрия (С 4дикарбоновая кислота, предшественник глюконеогенеза) позволит повысить эффективность процесса их биосинтеза [5]. Так, было показано, что одновременное внесение цитрата (0,1%) и фумарата (0,2%) в среду с глицерином сопровождалось повышением показателей синтеза ПАВ R.

erythropolis ЕК-1 на 32%, а добавление предшественников биосинтеза в концентрации 0,01% в среду культивирования A. calcoaceticus Кувеличением количества ПАВ в 22,5 раза по сравнению с выращиванием бактерий на среде без органических кислот.

Для R. erythropolis ЕК-1 замена цитрата натрия на эквимолярную по углероду концентрацию лимонной кислоты дала возможность повысить количество синтезированных ПАВ на 10-15% по сравнению с использованием цитрата натрия. Даже при условии периодического доведения рН до 8, лимонной кислотой после внесения 0,2% фумарата наблюдали повышение концентрации ПАВ на 30%, 45% и 77% по сравнению с показателями процесса без регуляции рН, при одновременном внесении фумарата и цитрата натрия и культивирования бактерий на среде без органических кислот соответственно.



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |
Похожие работы:

«CBD Distr. GENERAL КОНВЕНЦИЯ О БИОЛОГИЧЕСКОМ UNEP/CBD/WG-ABS/2/2 16 September 2003 РАЗНООБРАЗИИ RUSSIAN ORIGINAL: ENGLISH СПЕЦИАЛЬНАЯ РАБОЧАЯ ГРУППА ОТКРЫТОГО СОСТАВА ПО ДОСТУПУ К ГЕНЕТИЧЕСКИМ РЕСУРСАМ И СОВМЕСТНОМУ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ВЫГОД Второе совещание Монреаль, 1-5 декабря 2003 года Пункты 3, 4, 5, 6 и 7 предварительной повестки дня* ДАЛЬНЕЙШЕЕ ИЗУЧЕНИЕ НЕУРЕГУЛИРОВАННЫХ ВОПРОСОВ, КАСАЮЩИХСЯ ДОСТУПА К ГЕНЕТИЧЕСКИМ РЕСУРСАМ И СОВМЕСТНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ВЫГОД: ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕРМИНОВ, ДРУГИЕ...»

«Международная научно-практическая конференция МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ: ПРОШЛОЕ, НАСТОЯЩЕЕ И БУДУЩЕЕ 26 МАЯ 2014Г. Г. УФА, РФ ИНФОРМАЦИЯ О КОНФЕРЕНЦИИ ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ КОНФЕРЕНЦИИ Цель конференции: поиск решений по актуальным проблемам современной наук и и Клиническая медицина. 1. распространение научных теоретических и практических знаний среди ученых, преподавателей, Профилактическая медицина. 2. студентов, аспирантов, докторантов и заинтересованных лиц. Медико-биологические науки. 3. Форма...»

«НИИЦМиБ ФГБОУ ВПО Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина Кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Научно-исследовательский инновационный центр микробиологии и биотехнологии АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ Материалы VI-й Международной студенческой научной конференции, посвящённой 70-летию ФГБОУ ВПО Ульяновская ГСХА им. П.А. Столыпина 14 – 15 мая 2013 года Часть I Ульяновск – 2013 Актуальные проблемы инфекционной патологии и биотехнологии НИИЦМиБ ФГБОУ ВПО...»

«МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ Московская международная научно-практическая конференция ЭКОЛОГИЯ КРУПНЫХ ГОРОДОВ Проводится в рамках Московского международного конгресса Биотехнология: состояние и перспективы развития 15 - 17 марта 2010 March, 15 - 17 Под патронажем Правительства Москвы Sponsored by Moscow Government The Moscow International Scientific and Practical Conference ECOLOGY OF BIG CITIES Held within the framework of Moscow International Congress Biotechnology: State of the Art and Prospects...»

«Ukraine, Russia, Kazakhstan and Turkmenistan, shows its relationship with the 11-year cycle of solar activity, when it peaks occur during periods of sharp increase or decrease in solar activity near the maximum, and minimum - for periods of low solar activity ( fig.) Among the countries of Eastern and Western Europe is characterized by similar dynamics only for Romania. For other countries the situation is not so clear, it is associated with dominance or high-frequency oscillation periods of...»

«Министтерство о образован и наук Россий ния ки йской Фед дерации Российск академия наук кая к Не еправител льственны эколог ый гический фонд име В.И. В ф ени Вернадско ого Коми иссия Росссийской Федерации по дел ЮНЕ лам ЕСКО Адми инистрация Тамбо овской облласти Ас ссоциация Объеди я иненный универсиитет имен В.И. Ве ни ернадског го Федералльное гос сударствеенное бю юджетное образоваательное учреж ждение выысшего ппрофессиоональног образо го ования Тамбоввский госсударственный теехническ униве...»

«Отделение биологических наук РАН Научный Совет по гидробиологии и ихтиологии РАН Российский фонд фундаментальных исследований Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии внутренних вод им. И.Д. Папанина Российской академии наук Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Тюменский государственный университет МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ КОНФЕРЕНЦИИ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ Борок 2012 Отделение биологических наук...»

«Институт систематики и экологии животных СО РАН Териологическое общество при РАН Новосибирское отделение паразитологического общества при РАН ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ СОВРЕМЕННОЙ ТЕРИОЛОГИИ 18–22 сентября 2012 г., Новосибирск Тезисы докладов Новосибирск 2012 УДК 599 ББК 28.6 А43 Конференция организована при поддержке руководства ИСиЭЖ СО РАН и Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 12-04-06078-г) Редакционная коллегия: д.б.н. Ю.Н. Литвинов...»

«Институт биологии Коми НЦ УрО РАН РЕГИСТРАЦИОННАЯ ФОРМА КЛЮЧЕВЫЕ ДАТЫ Коми отделение РБО Заявка на участие и тезисы докладов в электронном виде 1.02.2013 Министерство природных ресурсов и охраны Фамилия Второе информационное письмо 1.03.2013 окружающей среды Республики Коми Оплата оргвзноса 15.04.2013 Имя Управление Росприроднадзора по Республике Коми Регистрация участников Отчество и открытие конференции 3.06. ФИО соавтора (соавторов) Представление материалов БИОРАЗНООБРАЗИЕ ЭКОСИСТЕМ для...»

«Российская академия наук Институт озероведения РАН Российский государственный педагогический университет им. А.И. Герцена Гидробиологическое общество РАН II Международная конференция Биоиндикация в мониторинге пресноводных экосистем 10-14 октября 2011г., Санкт-Петербург ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ II International Conference Bioindication in monitoring of freshwater ecosystems 10-14 October 2011, St.-Petersburg, Russia ABSTRACTS При поддержке: Отделения наук о Земле РАН, СПб Научного Центра РАН, РФФИ...»

«Уважаемые участники конференции! От имени Дальневосточного государственного технического рыбохозяйственного университета я рад приветствовать вас на очередной Международной научно-технической конференции Актуальные проблемы освоения биологических ресурсов Мирового океана. Я уверен, что в ходе работы мы сможем обсудить множество актуальных тем: совершенствование существующих технологий, нахождение путей оптимизации эксплуатации биоресурсов, исчезновение некоторых видов рыб, а также многие другие...»

«алтайский государственный университет Ботанический институт им. в.л. комарова ран Центральный сиБирский Ботанический сад со ран алтайское отделение русского Ботанического оБЩества Проблемы ботаники Южной сибири и монголии Сборник научных статей по материалам Деcятой международной научно-практической конференции (Барнаул, 24–27 октября 2011 г.) Барнаул – 2011 уДК 58 П 78 Проблемы ботаники Южной сибири и монголии: сборник научных статей по материалам X международной научно-практической...»

«Труды VI Международной конференции по соколообразным и совам Северной Евразии ОСЕННЯЯ МИГРАЦИЯ СОКОЛООБРАЗНЫХ В РАЙОНЕ КРЕМЕНЧУГСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА М.Н. Гаврилюк1, А.В. Илюха2, Н.Н. Борисенко3 Черкасский национальный университет им. Б. Хмельницкого (Украина) 1 gavrilyuk.m@gmail.com Институт зоологии им. И.И. Шмальгаузена НАН Украины 2 ilyuhaaleksandr@gmail.com Каневский природный заповедник (Украина) 3 mborysenko2905@gmail.com Autumn migration of Falconiformes in the area of Kremenchuh...»

«Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова Студенческий союз МГУ Биологический факультет ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ XIII МЕЖДУНАРОДНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ЛОМОНОСОВ-2006 12–15 апреля 2006 г. Секция Биология Москва – 2006 УДК 57 Председатель оргкомитета секции Биология Проф. Гостимский С.А. Члены оргкомитета: С.н.с. Ботвинко И.В. Проф. Максимов Г.В. Доц. Медведева М.В. Проф. Соколов Д.Д. Проф. Онищенко Г.Е. С.н.с. Авилова К.В. Ст. преп. Сергеев И.Ю. Доц....»

«Фундаментальная наук а и технологии - перспективные разработки Fundamental science and technology promising developments III Vol. 2 spc Academic CreateSpace 4900 LaCross Road, North Charleston, SC, USA 29406 2014 Материалы III международной научно-практической конференции Фундаментальная наука и технологии перспективные разработки 24-25 апреля 2014 г. North Charleston, USA Том 2 УДК 4+37+51+53+54+55+57+91+61+159.9+316+62+101+330 ББК 72 ISBN: 978-1499363456 В сборнике собраны материалы докладов...»

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Чебоксарский филиал учреждения Российской академии наук Главного ботанического сада им. Н.В. Цицина РАН Чувашское отделение Русского ботанического общества РАН Чувашское отделение Териологического общества РАН МИНИСТЕРСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ЭКОЛОГИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБУ Государственный природный заповедник Присурский МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Филиал ГОУ ВПО Российский государственный социальный университет, г. Чебоксары...»

«В защиту наук и Бюллетень № 8 67 Королва Н.Е. Ботаническую науку – под патронаж РПЦ? (по поводу статьи члена-корреспондента РАН, д.б.н. В.К. Жирова Человек и биологическое разнообразие: православный взгляд на проблему взаимоотношений)119 1. Проблема Проблемы взаимодействия власти и религии, науки и религии, образования и религии требуют современного переосмысления и анализа. Возможен ли синтез научного и религиозного знания, и не вредит ли он науке и научной деятельности, и собственно,...»

«Международная экологическая ассоциация хранителей реки Eco-TIRAS Образовательный фонд имени Л.С.Берга Eco-TIRAS International Environmental Association of River Keepers Leo Berg Educational Foundation Академику Л.С. Бергу – 135 лет: Сборник научных статей Academician Leo Berg – 135: Collection of Scientific Articles Eco-TIRAS Бендеры - 2011 Bendery - 2011 CZU[91+57]:929=161.1=111 A 38 Descrierea CIP a Camerei Naionale a Crii Academician Leo Berg – 135 years: Collection of Scientific Articles =...»

«В.К. Шитиков, Г.С. Розенберг ОЦЕНКА БИОРАЗНООБРАЗИЯ: ПОПЫТКА ФОРМАЛЬНОГО ОБОБЩЕНИЯ 1. Общий подход к оценке биологического разнообразия 1.1. Развитие концепций и определение основных понятий Понятие биологическое разнообразие за сравнительно короткий отрезок времени получило расширенное многоуровневое толкование. Собственно его биологический смысл раскрывается через представления о внутривидовом, видовом и надвидовом (ценотическом) разнообразии жизни. Однако, в добавление к этому, сначала...»

«ФОРМА ЗАЯВКИ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ МАТЕРИАЛОВ Министерство природных ресурсов и экологии на участие в конференции: Заявки и материалы, объемом до 5 страниц Российской Федерации (включая таблицы, рисунки и библиографический Фамилия Управление Федеральной службы список), принимаются в печатном и электронном по надзору в сфере природопользования виде до 12 мая 2014 г. по Кировской области Имя Федеральное государственное бюджетное Электронный вариант: стандартный формат Word учреждение Государственный...»









 
2014 www.konferenciya.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Конференции, лекции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.