WWW.KONFERENCIYA.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Конференции, лекции

 

RU 2 458 123 C2

(19) (11) (13)

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

(51) МПК

C12N 5/09 (2010.01)

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА

ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

(21)(22) Заявка: 2009137826/10, 13.10.2009 (72) Автор(ы):

Меерович Ирина Геннадьевна (RU), (24) Дата начала отсчета срока действия патента: Жердева Виктория Вячеславовна (RU), 13.10.2009 Арсланбаева Ляйсан Равиловна (RU), Савицкий Александр Павлович (RU), Приоритет(ы):

Бурова Ольга Семеновна (RU), (22) Дата подачи заявки: 13.10. Михайлова Ирина Николаевна (RU), RU (43) Дата публикации заявки: 20.04.2011 Бюл. № 11 Морозова Лидия Федоровна (RU), Барышников Анатолий Юрьевич (RU) (45) Опубликовано: 10.08.2012 Бюл. № (73) Патентообладатель(и):

(56) Список документов, цитированных в отчете о Учреждение Российской академии наук

поиске: Фундаментальные науки - медицине. Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН (RU) Тезисы докладов на конференциях и семинарах по научным направлениям.

Программы в 2008 году, составители: М.В.

Угрюмов, А.А. Макоско, В.В. Круговых. М.: Фирма "Слово", 2008, с.92, 93.

САВИЦКИЙ А.П. и др. Определение иммунофенотипа флуоресцирующих клеток MEL KOR-TURBO-RFP.

C КАМЕНСКИЙ В.А. и др. Разработка C методов (см. прод.) Адрес для переписки:

119071, Москва, Ленинский пр-кт, 33, стр.2, Учреждение Российской академии наук Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН (54) ФЛУОРЕСЦИРУЮЩАЯ КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ mel Kor-TurboRFP И СПОСОБ ЕЕ

ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЙ IN VITRO В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ

ОНКОЛОГИИ

(57) Реферат: первого и второго классов. Клеточная линия Изобретение относится к области характеризуется стабильной экспрессией биотехнологии, конкретно к исследованиям красного флуоресцирующего белка TurboRFP.

RU противоопухолевого действия препаратов in Оценить количество выживших опухолевых vitro, и может быть использовано в клеток после воздействия противоопухолевых экспериментальной онкологии. Клеточная препаратов возможно путем измерения линия меланомы человека mel Kor-TurboRFP интенсивности собственной флуоресценции обладает стабильными культуральными и клеток mel Kor-TurboRFP в лунках морфологическими характеристиками. микропланшетов. Изобретение позволяет Клеточная линия характеризуется экспрессией повысить эффективность и достоверность меланомных (дифференцировочных) исследований противоопухолевых препаратов.

маркеров - CD63, НМВ45, MelanA, Tyrozinase, 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.

отсутствием антигенов гистосовместимости.: ru RU прижизненного мониторинга молекулярных процессов в живых организмах на основе принципов флуоресцентной томографии, 16.07.2007, найдено в Интернет [30.08.2010] по адресу: http:

//www.strf.ru/innovation.aspx?CatalogId=223&d-no=12770. V съезд Российского фотобиологического общества. Международная конференция: Преобразование энергии света при фотосинтезе, Пущино, 8-13 июня 2008. Программа. Тезисы докладов./Под ред. И.И. Проскурякова. - Пущино, 2008, с.198, 227, найдено в Интернет [30.08.2010] по адресу: http://www.photobiology.ru/files/5rsp-2008.pdf.

АРСЛАНБАЕВА Л.Р. и др. Изучение роста и флюоресценции опухолей, экспрессирующих красный флюоресцентный белок Turbo RFP в мышах линии Nu/Nu методом флюоресцентной диффузионной томографии, Российский биотерапевтический журнал, 2008, т.7, №1, с.11. МЕЕРОВИЧ И.Г. и др.

Мониторинг опухолей экспериментальных животных, трансфицированных цветными белками, с использованием флюоресцентной диффузионной томографии, Российский биотерапевтический журнал, 2008, т.7, №1, c.22. TURCHIN I.V. et al., Fluorescence diffuse tomography for detection of red fluorescent protein expressed tumors in small animals, J. Biomed. Opt., 2008, v.13, №4, 041310.

RUSSIAN FEDERATION

FEDERAL SERVICE

FOR INTELLECTUAL PROPERTY

(12)

Abstract

OF INVENTION

(45) Date of publication: 10.08.2012 Bull. Uchrezhdenie Rossijskoj akademii nauk Institut (54) FLUORESCENT CELL LINE mel Kor-TurboRFP AND METHOD FOR USING IT FOR IN VITRO

STUDIES IN EXPERIMENTAL ONCOLOGY

(57) Abstract: preparations.

Kor-TurboRFP possess the stable cultural and morphological characteristics. The cell line is characterised by the expression of melanoma (differentiation) markers -CD63, HMB45, MelanA, histocompatibility antigens. The cell line is characterised by the expression of red fluorescent protein TurboRFP. The survivor tumour cell count is evaluated after the effect of anti-cancer preparations by measuring the intrinsic fluorescence Изобретение относится к области биотехнологии и экспериментальной онкологии, в частности к клеточным линиям, используемым для исследований in vitro в экпериментальной онкологии, а именно к клеточной линии mel Kor, полученной из опухолевого образца диссеминированной меланомы кожи человека [Патент РФ №2287578 с приоритетом от 22.04.2005].

Известны способы оценки потенциальной противоопухолевой активности и цитотоксичности новых противоопухолевых препаратов in vitro. Для этого на опухолевые клетки воздействуют растворами противоопухолевых препаратов в разной концентрации в течение различного времени, при этом получают зависимость доли выживших (погибших) клеток в результате такого воздействия. Оценка количества выживших клеток производится косвенными методами:



колориметрическим методом с использованием МТТ [J.Carmichael, W.G.DeGraff, A.F.Gazdar, J.D.Minna, J.B.Mitchell. Evaluation of a tetrazolium-based semiautomated colorimetric assay: assessment of chemosensitivity testing. Cancer Res. 1987, Vol. 47, №4, p.936-942] или флуоресцентным методом с использованием флуоресцеиндиацетата (ФДА) [J.R.Sellers, S.Cook, V.C.Goldmacher. A cytotxicity assay utilizing a fluorescent dye that determines accurate surviving fractions of cells. J. Immunol. Meth. 1994. V. 172, p. 255либо с использованием радиоактивных меток [M.Korbelik, G.Krosl. Enhanced macrophage cytotoxicity against tumor cells treated with photodynamic therapy. Photochem Photobiol. 1994, Vol. 60, №5, p.497-502]. Во всех этих методах клетки после воздействия дополнительно инкубируют с растворами, содержащими вещества, которые в зависимости от жизнедеятельности клеток изменяют уровень поглощения, флуоресценции или радиоактивный сигнал, что позволяет, измеряя количественно уровень поглощения, флуоресценции или радиоактивный сигнал, количественно оценить долю выживших либо погибших клеток.

Все вышеперечисленные способы оценки количества выживших клеток являются длительными и трудоемкими ввиду необходимости дополнительной инкубации клеток.

Известны опухолевые культуры, трансфицированные цветными флуоресцентными белками. Цветные флуоресцирующие белки являются уникальными генетическими маркерами для изучения молекулярных процессов в живых постоянно развивающихся клетках и организмах. Эти белки могут быть гетерологически экспрессированы в любых клетках, а для появления их флуоресцентного сигнала не требуются дополнительные ферменты или кофакторы [R.M.Hoffman. Advantages of multi-color fluorescent proteins for whole-body and in vivo cellular imaging. J. of Biomed. Optics. 2001.

Известен вектор pTurboRFP-C [Международная заявка WO 2007085923, опубл.

02.08.2007], кодирующий экспрессию красного флуоресцирующего белка TurboRFP и предназначенный для клеток млекопитающих.

Задачей настоящего изобретения является расширение номенклатуры клеточных линий, используемых в экспериментальной онкологии для изучения in vitro 45 потенциальных противоопухолевых препаратов, что дает возможность повысить эффективность, сократить длительность и трудоемкость исследований цитотоксичности противоопухолевых препаратов.

Поставленная задача решается тем, что получена новая клеточная линия mel KorTurboRFP из клеточной линии mel Kor путем введения гена, кодирующего экспрессию цветного флуоресцирующего белка TurboRFP.

Поставленная задача решается тем, что в способе оценки количества выживших опухолевых клеток после воздействия противоопухолевых препаратов, включающем измерение флуоресценции в лунках микропланшетов, измеряют собственную флуоресценцию клеток mel Kor-TurboRFP.

Сущность изобретения поясняется Фиг.1-4, где на Фиг.1 представлены микрофотографии опухолевых клеток флуоресцирующей меланомы, на Фиг.2 - кривые выживаемости клеток после использования противоопухолевого препарата "Лизомустин", на Фиг.3 - кривые выживаемости клеток после использования противоопухолевого препарата циклофосфамид, который действует только in vivo, а в случае in vitro был использован в качестве отрицательного контроля, на Фиг.4 корреляция между данными по выживаемости клеток, полученными исходя из флуоресценции экспрессируемого клетками красного флуоресцирующего белка TurboRFP и по результатам ФДА-теста.

Полученная клеточная линия обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками.

Родословная клеточной линии mel Kor-TurboRFP Линия клеток получена из клеточной линии mel Kor следующим образом: клетки трансфицировали плазмидной ДНК pTurboRFP-C с использованием метода липосомальной трансфекции с последующей селекцией при помощи генетицина (антибиотик G418, аналог неомицина) и клонированием для получения индивидуальных клонов флуоресцирующих клеток; отбор среди клонов осуществляли по интенсивности флуоресценции и стабильности экспрессии флуоресцирующего белка в отсутствие селектирующей среды.

Морфологические признаки клеточной линии Полученная клеточная линия характеризуется наличием множественных плотных центров роста опухолевых клеток, полиморфных меланомных клеток вытянутой, округлой и неправильной формы. В клетках обнаруживаются нормо- и гиперхромные ядра округлой и овальной формы, содержащие одиночные нуклеолы; базофильная негомогенная, иногда вакуолизированная цитоплазма. Имеются гигантские многоядерные клетки, фигуры митоза. Клеточная линия характеризуется наличием множественных плотных центров роста опухолевых клеток; полиморфных меланомных клеток вытянутой, округлой и неправильной формы.

Культуральные свойства клеточной линии Культивируется в питательной среде DMEM, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки и антибиотики (пенициллин и стрептомицин в концентрации 100 ед./мл и 100 мкг/мл соответственно). В культуральные флаконы объемом 25 см 2 в 5 мл среды засевают 1х10 клеток. Температура культивирования 37°С. Монослой клеток формируется через 3-4 дня.

Клетки снимаются с использованием стандартного раствора Трипсин-ЭДТА ("Панэко", Россия).

Условия криоконсервации Для длительного хранения клетки консервируют путем замораживания в жидком азоте. Клетки ресуспендируют в среде для замораживания - фетальная телячья сыворотка 90%, ДМСО - 10%. Режим замораживания: жидкий азот, снижение температуры на 1°С в минуту до минус 25°С, затем быстрое замораживание до минус 70°С. Хранение в жидком азоте при температуре минус 196°С.





Размораживание быстрое при 37°С. Клетки разводят в 10 мл бессывороточной среды и осаждают центрифугированием, ресуспендируют в 5 мл той же среды, содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки, и переносят в культуральный флакон объемом 25 см 2. Жизнеспособность клеток оценивают по включению трипанового синего. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 80-90%.

При длительном наблюдении бактерии и грибы в культуре не обнаружены.

Стабильность экспрессии флуоресцирующего белка в отсутствие селектирующей среды наблюдается в течение более чем 10 циклов культивирования.

Клетки полученной клеточной линии экспрессируют цветной флуоресцирующий белок, что позволяет эффективно исследовать действие противоопухолевых агентов на монослои этих клеток in vitro, не применяя трудоемкий подсчет клеток при помощи камеры Горяева или функциональные тесты жизнеспособности клеток, требующие дополнительных манипуляций с соответствующими реагентами.

Клеточная линия депонирована в Российской коллекции клеточных культур (позвоночных) под номером РККК(П) 730 (Д).

Пример 1. Культивирование клеточной линии mel Kor Плазмидную ДНК pTurboRFP-C ("Евроген", Россия) нарабатывали с использованием штамма E.coli DH5, затем выделяли и очищали при помощи набора "Endofree Plasmid Maxi Kit" (Qiagen) с целью очистки от эндотоксинов, что уменьшает токсичность процесса трансфекции для клеток За 2 суток до трансфекции клетки рассаживали в лунки 24-луночного планшета в 0,5 мл ростовой среды (DMEM), содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки, не содержащей антибиотиков, таким образом, чтобы во время трансфекции клетки составляли бы 90-95%-ный монослой. 6,0 мкл Lipofectamine 2000 (Invitrogen, США) разводили в 150 мкл среды Opti-MEM I (Invitrogen, США) без сыворотки и инкубировали 5 минут при комнатной температуре. 3,6 мкг плазмидной ДНК растворяли в 150 мкл среды Opti-MEM I без сыворотки и перемешивали пипетированием. Затем смешивали растворенную ДНК и разведенный Lipofectamine 2000 (общий объем 300 мкл), осторожно перемешивали и инкубировали в течение минут при комнатной температуре. Затем добавляли по 100 мкл комплекса Lipofectamine 2000-ДНК в каждую из трех лунок 24-луночного планшета, содержавшую клетки и по 0,5 мл ростовой среды без антибиотиков. Осторожным покачиванием планшета распределяли добавленный комплекс по всей площади лунок.

Клетки инкубировали при 37°С в СO2-инкубаторе в течение 24 часов перед исследованием экспрессии флуоресцирующего белка и манипуляциями, связанными с селекцией и клонированием.

После трансфекции смесь трансфицированных и нетрансфицированных клеток подвергали селекции при помощи генетицина (антибиотик G418, аналог неомицина) в концентрации в ростовой среде 800 мкг/мл. Смену селектирующей среды с антибиотиком производили каждый 4-й день, селекцию производили в течение Из полученной популяции трансфицированных клеток выделяли индивидуальные клоны флуоресцирующих клеток меланомы с использованием клонирующих цилиндров.

Для повышения эффективности клонирования в полную среду добавляли кондиционную среду от гомологичных клеток, отобранную в log-фазе от клеток mel Kor меланомы и обогащенную среду Ham's F12 (DMEM, Ham's F12 и кондиционная среды взяты в соотношении 1:1:1).

Из полученных клонов производили отбор по следующим признакам:

а) интенсивность флуоресценции определялась визуально при помощи флуоресцентного инвертированного микроскопа и компьютеризированной спектрально-флуоресцентной установки «СПЕКТР-«Кластер» («Кластер», Россия) (в качестве базовой линии принималась автофлуоресценция нетрансфицированных клеток);

б) стабильность флуоресценции после многократных пассажей в среде без селектирующего антибиотика G-418.

Количество жизнеспособных клеток определяли по стандартной методике в камере Горяева, используя 0,5% раствор трипанового синего в PBS. В культуральные флаконы объемом 25 см 2 в 5 мл среды засевали 1106 клеток. Температура культивирования 37°С. Клетки культивировали в среде DMEM, содержащей 10% телячьей фетальной сыворотки, пенициллин (100 ед./мл), стрептомицин (100 мкг/мл) в культуральных флаконах (Costar).

Пример 2. Флуоресценция клеток клеточной линии mel Kor-Turbo-RFP in vitro Подтверждена при помощи флуоресцентной микроскопии (Фиг.1).

На Фиг.1 приведены микрофотографии опухолевых клеток флуоресцирующей меланомы mel Kor-TurboRFP (А, Б) и исходной меланомы mel Kor (В, Г).

Микроскоп Nikon-TE2000U, x10, экспозиция 1/5 для флуоресценции (А, В), 1/50 для фазового контраста (Б, Г).

Пример 3. Способ оценки количества выживших опухолевых клеток после воздействия противоопухолевых препаратов Клетки mel Kor-TurboRFP, находящиеся в log-фазе роста, рассаживали на 96луночные культуральные планшеты за исключением крайних вертикальных и горизонтальных рядов в полной ростовой среде (DMEM, содержащей 10% телячьей фетальной сыворотки, пенициллин (100 ед./мл), стрептомицин (100 мкг/мл) в количестве, необходимом для получения 80% монослоя к моменту исследования противоопухолевого действия. При получении необходимой плотности монослоя ростовую среду заменяли на ростовую среду, содержащую противоопухолевый агент в различных концентрациях (каждая концентрация - в 6 повторах), и оставляли клетки в условиях СO2-инкубатора. После инкубации заменяли среду, содержащую противоопухолевый агент, на полную ростовую среду и оставляли на сутки. Затем параллельно проводили два теста для определения количества выживших клеток. В одном случае клетки отмывали от среды при помощи фосфатно-солевого буфера Дюльбекко (PBD) и добавляли по 100 мкл этого же буфера в каждую лунку планшета, а затем измеряли интенсивность флуоресценции при помощи флуориметра Labsystems Fluoroscan II (для возбуждения флуоресценции использовался интерференционный фильтр с длиной волны спектрального максимума 544 нм, для регистрации - фильтр с длиной волны максимума 607 нм). В другом случае использовали известный метаболитический тест, отражающий жизненную активность клеток, основанный на использовании производного флуоресцеиндиацетата [J.R-Sellers, S.Cook, V.C.Goldmacher. A cytotoxicity assay utilizing a fluorescent dye that determines accurate surviving fractions of cells. J. Immunol. Meth. 1994. V.172, p.255-264], проведенный по методике, описанной в [I.G.Meerovich, V.V.Jerdeva, V.M.Derkacheva, G.A.Meerovich, E.A.Lukyanets, E.A.Kogan, A.P.Savitsky. Photodynamic activity of dibiotinylated aluminium sulphphthalocyanine in vitro and in vivo. J. Photochem Photobiol. B: Biology. 2005. V.80, p.57В обоих случаях число выживших клеток определялось на основе калибровочной кривой. Калибровочная кривая строилась как зависимость флуоресцентного сигнала от количества посаженных клеток, для чего использовался культуральный микропланшет, в котором клетки были посажены одновременно с вышеуказанными планшетами, но следующим образом: во 2-м ряду - то же количество клеток, что и в планшетах для определения противоопухолевой активности, в 3-11 рядах раститровка от этого количества в 2 раза. 12 ряд на всех планшетах использовался как Произведенные эксперименты с противомеланомным препаратом "Лизомустин" продемонстрировали хорошую корреляцию между полученными кривыми выживаемости клеток, основанными на флуоресценции TurboRFP (Фиг.2А) и производного ФДА при использовании ФДА-теста (Фиг.2Б), пример приведен на Фиг.4, а также между концентрациями, необходимыми для достижения доли погибших клеток 50% и 90%, определенными при помощи этих методов (Фиг.2).

Эксперименты с циклофосфамидом, который не действует на опухолевые клетки в условиях in vitro, также показали корреляцию между кривыми выживаемости клеток, основанными на флуоресценции TurboRFP (Фиг.3А) и производного ФДА при использовании ФДА-теста (Фиг.3Б).

Использование флуоресцирующей клеточной mel Kor-TurboRFP позволяет быстро, эффективно и с минимальными затратами изучать цитотоксичность противомеланомных препаратов in vitro.

1. Клеточная линия меланомы человека mel Kor-TurboRFP, экспрессирующая красный флуоресцирующий белок и используемая для исследования противоопухолевого действия препаратов in vitro.

2. Способ оценки количества выживших опухолевых клеток после воздействия противоопухолевых препаратов, включающий измерение интенсивности флуоресценции в лунках микропланшетов, отличающийся тем, что измеряют интенсивность собственной флуоресценции клеток mel Kor-TurboRFP.

RU 2 458 123 C RU 2 458 123 C

Похожие работы:

«ПРАВИТЕЛЬСТВО АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО РЫБОЛОВСТВУ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ ФГОУ ВПО АСТРАХАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ II Региональная конференция молодых ученых и инноваторов ИННО-КАСПИЙ Тезисы докладов Астрахань 18–22 апреля 2011 г. Астрахань Издательство АГТУ 2011 1 Под общей редакцией: д-ра хим. наук, проф. Берберовой Н.Т., д-ра биол. наук, проф. Котельникова А.В. Ответственный за выпуск: д-р биол. наук, проф. Котельников...»

«Российская академия наук Институт химии растворов РАН Ивановский государственный химико-технологический университет Российский фонд фундаментальных исследований Российское химическое общество им. Д.И. Менделеева XI МЕЖДУНАРОДНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ ПРОБЛЕМЫ СОЛЬВАТАЦИИ И КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЯ В РАСТВОРАХ и VI КОНФЕРЕНЦИЯ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ХИМИЯ ЖИДКОФАЗНЫХ СИСТЕМ (КРЕСТОВСКИЕ ЧТЕНИЯ) Конференция посвящена 80-летию со дня рождения члена-корреспондента РАН Крестова Г.А....»

«Научно-издательский центр Социосфера Учреждение Российской Академии Образования Институт психолого-педагогических проблем детства Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет Информационный центр МЦФЭР ресурсы образования ИГРА И ИГРУШКИ В ИСТОРИИ И КУЛЬТУРЕ, РАЗВИТИИ И ОБРАЗОВАНИИ Материалы международной научно-практической конференции 1–2 апреля 2012 года Пенза – Витебск – Москва 2012 УДК 008+159.9+37 ББК 71.0+74.100.58 И 27 И 27 Игра и игрушки в истории и культуре,...»

«1 Сибирский НИИ сельского хозяйства и торфа СО Россельхозакадемии Томский политехнический университет Материалы Международной заочной научно-практической конференции Проблемы изучения и использования торфяных ресурсов Сибири 24-27 августа 2009 года г. Томск, Россия 2 Секция 1 Генезис, разведка и ресурсы торфа 3 СОДЕРЖАНИЕ Zurek S., Ralska-Jasiewiczowa M., Kloss M. Genesis and age mires and lakes Gostyninskie Lake District.. Валяев Б.М. Торф в системе горючих ископаемых. Вершинин К.Е. Условия и...»

«Химия биологически активных веществ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. Н.Г. ЧЕРНЫШЕВСКОГО Министерство образования и наук и Российской Федерации Российский фонд фундаментальных исследований ФГБОУ ВПО Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского Химия биологически активных веществ ХимБиоАктив-2012 Межвузовский сборник научных трудов 2012 г УДК [541+542] ББК Х40 Х40 Химия биологически активных веществ: Межвузовский сборник научных трудов...»

«Дальневосточное отделение Российской академии наук Биолого-почвенный институт ДВО РАН (БПИ ДВО РАН) Приморское отделение Гидробиологического общества при РАН Дальневосточное отделение Научного совета РАН по экологии и чрезвычайным ситуациям Лаборатория пресноводной гидробиологии БПИ ДВО РАН Лаборатория пресноводных сообществ БПИ ДВО РАН “Чтения памяти профессора Владимира Яковлевича Леванидова” 21 – 23 марта 2011 г. г. Владивосток Первое информационное письмо Глубокоуважаемые коллеги!...»

«Организмы, популяции, экосистемы: проблемы и пути сохранения биоразнообразия ГОУ ВПО Вологодский государственный педагогический университет Вологодская лаборатория ФГНУ ГосНИОРХ Вологодское отделение гидробиологического общества РАН НП Научный центр экологических исследований Водные и наземные экосистемы: проблемы и перспективы исследований Материалы Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 70-летию кафедры зоологии и экологии ГОУ ВПО Вологодский государственный...»

«УДК [619:616:98:579.894.115]: 636.7 ПОЛУЧЕНИЕ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЛЕПТОСПИРОЗА СОБАК М.Н. ВЕРЕВКИНА А.П. СУРМИЛО Ключевые слова: лептоспироз, гипериммунизация, иммунитет, сыворотка, продуценты, ареактивность. Аннотация: Остается необходимость в дополнительном изучении и усовершенствовании многих вопросов научной и практической значимости, таких как поиски биологических и химиотерапевтических препаратов, высокоэффективных при лечении клинически выраженных форм лептоспироза и...»

«МЕЖДУНАРОДНАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ И СТУДЕНТОВ 24-29 апреля 2009 г. ФИЗИЧЕСКАЯ ХИМИЯ УДК 548.52:54-38:546.3 ВЫРАЩИВАНИЕ КРИСТАЛЛОВ СОЛЕЙ, МОЛЕКУЛЯРНЫХ ВЕЩЕСТВ И САМОРОДНЫХ МЕТАЛЛОВ ВОЛКОВ А. И., ПАВЛОВ В. В. ГОУ ВПО Уральский государственный горный университет Кристаллы (от греч., первоначально лед, в дальнейшем горный хрусталь, кристалл), твердые тела, в которых атомы расположены закономерно, образуя трехмернопериодическую пространственную укладку кристаллическую...»

«Министерство образования и наук и Российской Федерации Амурский государственный университет Биробиджанский филиал УСТОЙЧИВОЕ РАЗВИТИЕ СОЦИАЛЬНЫХ И ПРИРОДНЫХ СИСТЕМ Областная научная конференция учащихся муниципальных образовательных учреждений средних общеобразовательных школ Биробиджан, 10 ноября 2011 года Сборник материалов Биробиджан 2012 УДК ББК 20.1 У 79 Устойчивое развитие социальных и природных систем: материалы областной научной конференции учащихся муниципальных образовательных...»

«Сервис виртуальных конференций Pax Grid ИП Синяев Дмитрий Николаевич Химическая наук а: современные достижения и историческая перспектива. I Всероссийская научная Интернет-конференция с международным участием Казань, 29 марта 2013 года Материалы конференции Казань ИП Синяев Д. Н. 2013 УДК 54(082) ББК 24 X46 X46 Химическая наука: современные достижения и историческая перспектива.[Текст]: I всероссийская научная Интернет-конференция с международным участием : материалы конф. (Казань, 29 марта...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ ФГБОУ ВПО ВОРОНЕЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИНЖЕНЕРНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ МАТЕРИАЛЫ СТУДЕНЧЕСКОЙ НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ ЗА 2013 ГОД ВОРОНЕЖ 2013 1 УДК 378:001.891(04) ББК Ч 481(2)+Ч 214(2)70 М34 Р е д а к ц и о н н а я к о л л е г и я: С.Т. Антипов д.т.н., профессор (науч. редактор); М.А. Шаров ассистент (зам. науч. редактора); В.В. Пойманов к.т.н., доцент; Ю.В. Пятаков к.ф-м.н., доцент; М.В. Попова к.ф.н., доцент; И.М. Жаркова к.т.н., доцент; Л.В. Молоканова...»

«Министерство образования и наук и Российской Федерации ГОУ ВПО Сибирский государственный технологический университет МОЛОДЫЕ УЧЕНЫЕ В РЕШЕНИИ АКТУАЛЬНЫХ ПРОБЛЕМ НАУКИ Сборник статей студентов, аспирантов и молодых ученых по итогам Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 80-летию Сибирского государственного технологического университета (13-14 мая 2010 г.) Том 1 Красноярск 2010 Молодые ученые в решении актуальных проблем науки: Всероссийская научно-практическая конференция....»

«Учреждение Российской академии наук Институт общей и неорганической химии им. Н.С. Курнакова РАН Научно-образовательный центр по общей и неорганической химии Совет молодых ученых ИОНХ РАН I КОНФЕРЕНЦИЯ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ПО ОБЩЕЙ И НЕОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ 19 – 21 апреля 2011 года г. Москва ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ Москва, 2011 г. КАРБОНИЛКАРБОКСИЛАТНЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПАЛЛАДИЯ НЕНАСЫЩЕННЫХ КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ Анкудинова П.В.a,b Лаборатория энергоемких веществ и материалов a Высшая школа фундаментальной химии РАН (при...»

«Министерство образования и наук и Российской Федерации ГОУ ВПО Сибирский государственный технологический университет МОЛОДЫЕ УЧЕНЫЕ В РЕШЕНИИ АКТУАЛЬНЫХ ПРОБЛЕМ НАУКИ Сборник статей студентов, аспирантов и молодых ученых по итогам Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 80-летию Сибирского государственного технологического университета (13-14 мая 2010 г.) Том 2 Красноярск 2010 Молодые ученые в решении актуальных проблем науки: Всероссийская научно-практическая конференция....»

«ISSN 1563-0331 Индекс 75879: 25879 Л-ФАРАБИ АТЫНДАЫ КАЗАХСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ АЗА ЛТТЫ УНИВЕРСИТЕТІ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ АЛЬ-ФАРАБИ АЗУ ВЕСТНИК ХАБАРШЫСЫ КазНУ ХИМИЯ СЕРИЯСЫ СЕРИЯ ХИМИЧЕСКАЯ Кмірсутекті шикізатты тере деу жне Глубокая переработка углеводородного сырья, экологиялык мселелер экологические проблемы атты гылыми-тэжірибелік конференция научно-практическая конференция (Алматы, 25-26 желтоксан 2008 ж.) (Алматы. 25-26 декабря 2008 г.) АЛМАТЫ №3(55) МАЗМНЫ Т.К. Туркбенов, Х.А. Суербаев....»

«Пятигорский медико-фармацевтический институт – филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России Беликовские чтения ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ КОНФЕРЕНЦИИ 12-14декабря 2013 г. ПЯТИГОРСК УДК615:001.92:37 ББК 52.82 Б 43 Б 43 Беликовские чтения: тезисы докладов всероссийской научнопрактической конференции. – Пятигорск: ПМФИ – филиал ВолгГМУ, 2013. – 47 с. В сборник вошли работы, представленные на ежегодной всероссийской научно-практической конференции Беликовские чтения, посвящённые...»

«АЗАСТАН РЕСПУБЛИКАСЫ БІЛІМ ЖНЕ ЫЛЫМ МИНИСТРЛІГІ Ш.УЛИХАНОВ атындаы ККШЕТАУ МЕМЛЕКЕТТІК УНИВЕРСИТЕТІ ШОАН ТАЫЛЫМЫ – 17 атты Халыаралы ылыми-практикалы конференция МАТЕРИАЛДАРЫ 24-26 суір МАТЕРИАЛЫ Международной научно-практической конференции ВАЛИХАНОВСКИЕ ЧТЕНИЯ – 17 24-26 апреля Том 6 Ккшетау, 2013 УДК 001.83 В 17 Валихановские чтения-17: Сборник материалов Международной научноВ 17 практической конференции. – Кокшетау, 2013. – 306 с., Т.6. ISBN 978-601-261-171-7 Бл басылыма 2013 жылды 24-26...»

«Полная исследовательская публикация Тематический раздел: Физико-химические исследования. Подраздел: Супрамолекулярная химия. Регистрационный код публикации: 12-29-1-15 Публикация доступна для обсуждения в рамках функционирования постоянно действующей интернет-конференции “Бутлеровские чтения”. http://butlerov.com/readings/ Поступила в редакцию 10 декабря 2011 г. УДК 544-72. Рецепторные свойства 2,2’-тиобис-4-трет-бутилфенола – ациклического аналога трет-бутилтиакаликс[4]арена, по отношению к...»

«Приложение 1 НАУЧНЫЕ ПУБЛИКАЦИИ ИНСТИТУТА ВОДНЫХ ПРОБЛЕМ СЕВЕРА КарНЦ РАН за 2006 год Монографии, сборники статей, научные издания 1. Водные ресурсы Республики Карелия и пути их использования для питьевого водоснабжения. Опыт карельско - финляндского сотрудничества. Петрозаводск: КарНЦ РАН. 2006. 263 с. 2. Материалы II Республиканской школы-конференции молодых ученых Водная среда Карелии: исследование, использование, охрана. Петрозаводск: КарНЦ РАН. 2006. 107 с. 3. Материалы юбилейной...»









 
2014 www.konferenciya.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Конференции, лекции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.