WWW.KONFERENCIYA.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Конференции, лекции

 

RU 2 421 513 C2

(19) (11) (13)

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

(51) МПК

C12N 1/20 (2006.01)

C12P 21/06 (2006.01)

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА

ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,

ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

(21)(22) Заявка: 2009120982/10, 02.06.2009 (72) Автор(ы):

Тимченко Людмила Дмитриевна (RU), (24) Дата начала отсчета срока действия патента: Пенькова Надежда Ивановна (RU), 02.06.2009 Вакулин Валерий Николаевич (RU), Пономаренко Анастасия Петровна (RU) Приоритет(ы):

RU (22) Дата подачи заявки: 02.06.2009 (73) Патентообладатель(и):

Государственное общеобразовательное (43) Дата публикации заявки: 10.12.2010 Бюл. № учреждение высшего профессионального (45) Опубликовано: 20.06.2011 Бюл. № 17 образования Ставропольский государственный университет (RU), (56) Список документов, цитированных в отчете о Российская академия наук

, южный научный поиске: Носков В.В., Самойленко Н.В., Тимченко центр (RU) Л.Д. Технология получения гидролизата из субстанции "Тибетский молочный гриб" и предварительная оценка его свойств.

Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Материалы 52-й научной конференции "Университетская наукарегиону". - Ставрополь: СГУ, 2007, с.239-240.

C Телишевская Л.Я. Белковые (см. прод.) C Адрес для переписки:

355009, г.Ставрополь, ул. Пушкина, 1, ГОУ ВПО СГУ, НИЧ

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗАТА ИЗ ТИБЕТСКОГО

МОЛОЧНОГО ГРИБА И ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ ГИДРОЛИЗАТ МОЛОЧНОГО ГРИБА

(57) Реферат: тампоном с пергаментом и помещают в Изобретение относится к биотехнологии и термокамеру при температуре (48±1)°С.

может быть использовано как стимулятор Выдерживают в течение 9-10 суток, встряхивая роста или компонент питательных сред для в течение первых суток через каждые 10-15 мин культивирования лактобактерий, а также в по 4-5 мин, а в последующие дни через медицинской микробиологии. Промытый каждые 1,5-2 ч по 4-5 мин. Динамику тибетский молочный гриб помещают в ферментативного процесса контролируют по RU стеклянную емкость и добавляют 65,7 л (1:3) нарастанию аминного азота. На 9-10 сутки водопроводной воды, подогретой до увеличение данного показателя прекращается, температуры (45±1)°С. Смесь расщелачивают термокамеру отключают, гидролизат Nа2СО3 до рН 8,2-8,3 по фенолфталеину. Затем оставляют на сутки. Затем фильтруют через фильтровальное полотно. В фильтрат загружают измельченную поджелудочную добавляют 2% хлороформа, пробкуют железу крупного рогатого скота в резиновой пробкой, хранят при температуре количестве 0,101 кг. К общему объему от 2 до 8°С. Аминный азот в готовом содержимого добавляют 2% хлороформа, гидролизате 567,8 л/гр. Цвет: прозрачный, запробковывают плотно ватно-марлевым.: ru удешевление и упрощение способа получения показателем сухого вещества. 2 н.п. ф-лы, гидролизаты. - М., 2000, с.246-249. RU 2216587 С2, 20.11.2003. RU 2202609 С2, 10.02.2002.

RUSSIAN FEDERATION

FEDERAL SERVICE

FOR INTELLECTUAL PROPERTY,

PATENTS AND TRADEMARKS

(12)

Abstract

OF INVENTION

(43) Application published: 10.12.2010 Bull.

(54) METHOD OF OBTAINING ENZYMATIC HYDROLYSATE FROM TIBETAN MILK MUSHROOM

AND ENZYMATIC HYDROLYSATE OF MILK MUSHROOM

(57) Abstract: every 1.5-2 hours for 4-5 minutes. The flow of the

put into a glass vessel and 65.7 l (1:3) tap water at indicator stops. The heat chamber is switched off and phenolphthalein. Crushed pancreatic gland of a cow added to the overall volume and the vessel is tightly temperature (48±1)°C. The vessel is kept for 9- days, while shaking during the first days every 10- minutes for 4-5 minutes, and during the next days Область техники, к которой относится изобретение Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам получения ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба и ферментативному гидролизату из тибетского молочного гриба, используемому в качестве стимулятора роста, который может быть использован как компонент питательных сред для культивирования лактобактерий, а также в медицинской микробиологии.

Известен способ получения ферментативного гидролизата, включающий обработку белоксодержащего сырья, разведенного водой медицинским панкреатином или нативной поджелудочной железой свеньи, в щелочной зоне рН 7,6-7,8 в присутствии хлороформа при 37-38°С в течение 6-7 суток, прогревание при 90°С в течение 5-10 мин, последующее осаждение высокомолекулярных соединений в изоэлектрической точке белка, фильтрование целевого продукта и его высушивание, при этом в качестве белоксодержащего сырья используют обезжиренную, обезвоженную мозговую ткань крупного рогатого скота, фермент растворяют в воде в соотношении 1:25 и перед осаждением высокомолекулярных соединений проводят обработку гидролизата 20ным раствором хлористого кальция в течение 5-10 мин (см. пат. RU №2020153, МПК С12N 5/00, С12Р 21/06, опубл. 30.09.1994).

Недостатком данного способа является сложность технологического процесса, высокая себестоимость конечного продукта.



Известна полужидкая питательная среда МРС-2 для культивирования лактобактерий, включающая 50 г марганца сернокислого, 200 мл цистеина солянокислого, 200 мл магния сернокислого, 2 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 20 г глюкозы, 1 г микробиологического агара, 2 г лимоннокислого аммония и 5 г натрия уксуснокислого. Вышеуказанные ингредиенты растворяют в мл дистиллированной воды. Затем прибавляют 50 мл дрожжевого автолизата и 50 мл печеночного экстракта. Отдельно растворяют 10 г сухого ферментативного пептона в небольшом объеме горячей дистиллированной воды и вносят 1 мл Твин-80, тщательно перемешивая, добавляют в выше указанную смесь. Затем добавляют 330 мл гидролизованного молока Богданова и доводят весь объем жидкости дистиллированной водой до 1000 мл. РН среды не требует корректировки и устанавливается на уровне 6,2-6,6. Среду фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в пробирки и стерилизуют 15 минут при t 120±3°C и давлении 1,0±0,1 кг с/см 2 (0,10±0,010) МПа (см. Регламент. Производство лактобактерина сухого, 23-75. Недостатком данной питательной среды является небольшое накопление объема бактериальной массы лактобактерий.

Известны способ получения ферментативного гидролизата и питательная среда на его основе. Говяжье или конское мясо очищают от жира и сухожилий, нарезают кусочками или полосками в толщину пальца. Кладут в кипящую водопроводную воду из расчета 2 л водопроводной воды на 1 кг мяса; кипятят в течение 5 минут. Мясо вылавливают и пропускают через мясорубку. Смешивают фарш с жидкостью и остуживают до 45°С, добавляют 5-10 г панкреатина или 40-80 г поджелудочной железы КРС (в зависимости от того, какую степень расщепления хотят получить), с последующим добавлением 2% хлороформа от общего объема (см. Козлов, Ю.А.

Питательные среды в медицинской микробиологии / Ю.А.Козлов, 1950. - С.51).

Недостатком данного способа получения ферментативного гидролизата и питательной среды на его основе является высокая стоимость, недостаточное обогащение микро- и макроэлементами, витаминами, углеводами и аминокислотами, оказывающими высокий биостимулирующий эффект культивирования лактобактерий.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятым авторами за прототип является способ получения гидролизата из тибетского молочного гриба, заключающийся в следующем: молочный гриб тщательно промывают в проточной водопроводной воде, предварительно поместив его в марлю. Промытый гриб помещают в стеклянную емкость и добавляют подогретую водопроводную воду. Затем загружают измельченную поджелудочную железу сельскохозяйственных животных. Смесь подщелачивают углекислым натрием.

Добавляли хлороформ и помещали в термокамеру при 45°С. Первые сутки смесь перемешивают через каждые 15 мин, в дальнейшем - через каждые 2 ч. Динамику ферментативного процесса контролировали по нарастанию аминного азота. На 9- сутки увеличение данного показателя прекращается, термокамеру отключали, гидролизат отстаивали сутки, затем фильтровали (см. Тимченко Л.Д. Технология получения гидролизата из субстанции «Тибетский молочный гриб» и предварительная оценка его свойств / Л.Д.Тимченко, В.В.Носков, Н.В.Пчелинцева //Проблемы развития биологии и экологии на Северном Кавказе: Материалы 52 научной конференции «Университетская наука - региону». - Ставрополь: СГУ, 2007. 239-240. - 348 с.).

Недостатком данного гидролизата является ограниченный срок хранения, а также высокая себестоимость.

Раскрытие изобретения Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба и ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятора роста для культивирования лактобактерий из экологически чистого и доступного сырья, обогащающего питательные среды микро- и макроэлементами, витаминами, углеводами и аминокислотами, а также содержащий высокий показатель сухого вещества.

Технический результат, который может быть достигнут с использованием предлагаемого изобретения, сводится к получению ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба, используемого в качестве стимулятора роста из более дешевого, экологически чистого и доступного сырья, обогащающего даже в минимальных концентрациях питательные среды для культивирования лактобактерий и позволяющего получать большой выход бактериальной массы.

Технический результат достигается с помощью способа получения ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба, включающего приготовление из него белоксодержащей массы, смешивание ее с подогретой водопроводной водой, добавление измельченной поджелудочной железы крупного рогатого скота, подщелачивание Na2CO3, добавление 2% хлороформа с последующим размещением в термокамере, выдерживание в течение 9-10 суток с перемешиванием в первые сутки через каждые 15 минут, а в последующие дни через каждые 2 часа, измерение уровня аминного азота, и после прекращения на 9-10 сутки увеличения последнего термокамеру отключают, гидролизат отстаивают в течение суток и фильтруют, ОТЛИЧАЮЩЕГОСЯ тем, что смешивание проводят с водопроводной водой, подогретой до температуры (45±1)°С в соотношении 1:3, подщелачивают смесь до рН 8,2-8,3 по фенолфталеину, температуру в термокамере выдерживают (48±1)°С, встряхивание проводят в течение первых суток через 10-15 минут в течение 4-5 минут, а в последующие дни через каждые 1,5-2 часа в течение 4-5 минут, затем после фильтрования в фильтрат добавляют 2% хлороформа и хранят при температуре от Технический результат достигается с помощью ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба, используемого в питательных средах в качестве стимулятора роста лактобактерий, полученного способом по п.1, ОТЛИЧАЮЩЕГОСЯ тем, что он содержит поджелудочную железу крупного рогатого скота, хлороформ 2% от общего объема, карбонат натрия, водопроводную воду подогретую до (45±1)°С при следующем соотношении ингредиентов, г/л:





Сущность способа получения ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба (ТМГ) и ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба, используемого в качестве стимулятора роста для культивирования лактобактерий, заключается в следующем.

Молочный тибетский гриб, в количестве 0,219 кг, тщательно промывают в проточной водопроводной воде (предварительно поместив в марлю). Промытый грибок помещают в стеклянную емкость и добавляют 0,657 л (1:3) водопроводной воды, подогретой до температуры (45±1)°С. Смесь расщелачивают Nа2СО3 до рН 8,2по фенолфталеину. Затем загружают измельченную поджелудочную железу КРС в количестве 0,101 кг. К общему объему содержимого добавляют 2% хлороформа, запробковывают плотно ватно-марлевым тампоном с пергаментом и помещают в термокамеру при температуре (45±1)°С. Выдерживают в течение 9-10 суток, встряхивая в течение первых суток через каждые 10-15 минут по 4-5 минут, а в последующие дни через каждые 1,5-2 часа по 4-5 минут. Динамику ферментативного процесса контролируют по нарастанию аминного азота. На 9-10 сутки увеличение данного показателя прекращается, термокамеру отключают, гидролизат оставляют на сутки. Затем фильтруют через фильтровальное полотно. В фильтрат добавляют 2% хлороформа, пробкуют резиновой пробкой, хранят при температуре от 2 до 8°С.

Используют по мере необходимости. Аминный азот в готовом гидролизате 567,8 л/гр.

Цвет: прозрачный, коньячный.

Для приготовления ферментативного гидролизата из ТМГ, используемого в качестве стимулятора роста для культивирования лактобактерий, берут следующее соотношение ингредиентов, г/л:

Осуществление изобретения Примеры конкретного выполнения способа получения ферментативного 50 гидролизата из тибетского молочного гриба и ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба, используемого в качестве стимулятора роста для культивирования лактобактерий Пример №1. Молочный тибетский гриб, в количестве 0,29 кг, тщательно промывают в проточной водопроводной воде (предварительно поместив в марлю).

Промытый грибок помещают в стеклянную емкость и добавляют 0,87 л (1:3) водопроводной воды, подогретой до температуры (35±1)°С. Смесь расщелачивают Nа2СО3 до рН 6,2-6,4 по фенолфталеину. Затем загружают измельченную поджелудочную железу КРС в количестве 0,1 кг. К общему объему содержимого добавляют 2% хлороформа, запробковывают плотно ватно-марлевым тампоном с пергаментом и помещают в термокамеру при температуре (45±1)°С. Выдерживают в течение 8 суток, встряхивая 3-4 раза в день. Динамику ферментативного процесса контролируют по нарастанию аминного азота, по мере прекращения его нарастания гидролизат считается готовым. Затем фильтруют через фильтровальное полотно и нейтрализуют до рН 7,0. В фильтрат добавляют 2% хлороформа, пробкуют резиновой пробкой, хранят при температуре от 2 до 8°С.

При этом ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, получают при следующем соотношении ингредиентов, г/л:

Недостатком полученного ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба, используемого в качестве стимулятора роста, является снижение биологической ценности, что связано с неполным расщеплением белков до аминокислот.

Пример №2. Молочный тибетский гриб, в количестве 0,3 кг, тщательно промывают в проточной водопроводной воде (предварительно поместив в марлю). Промытый грибок помещают в стеклянную емкость и добавляют 0,9 л (1:3) водопроводной воды, подогретой до температуры (40±1)°С. Смесь расщелачивают Nа2СО3 до рН 8,7-8,9 по фенолфталеину. Затем загружают измельченную поджелудочную железу КРС в количестве 0,14 кг. К общему объему содержимого добавляют 2% хлороформа, запробковывают плотно ватно-марлевым тампоном с пергаментом и помещают в термокамеру при температуре (38±1)°С. Выдерживают в течение 8 суток, встряхивая в течение первых суток через каждые 10 минут по 4 минуты, а в последующие дни через каждый час по 5 минут. Динамику ферментативного процесса контролируют по нарастанию аминного азота, на 9-10 сутки увеличение данного показателя прекращается, термокамеру отключают, гидролизат оставляют на сутки. Затем фильтруют через фильтровальное полотно. В фильтрат добавляют 2% хлороформа, пробкуют резиновой пробкой, хранят при температуре от 2 до 8°С. Используют по мере необходимости.

При этом ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, получают при следующем соотношении ингредиентов, г/л:

Полученный ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, имеет недостаточный уровень аминного азота и показателя сухого остатка, что снижает его биологическую ценность.

Пример №3. Молочный тибетский гриб, в количестве 0,32 кг, тщательно промывают в проточной водопроводной воде (предварительно поместив в марлю).

Промытый грибок помещают в стеклянную емкость и добавляют 0,96 л (1:3) водопроводной воды, подогретой до температуры (45±1)°С. Смесь расщелачивают Na2CO3 до рН 8,0-8,2 по фенолфталеину. Затем загружают измельченную поджелудочную железу КРС в количестве 0,145 кг. К общему объему содержимого добавляют 2% хлороформа, запробковывают плотно ватно-марлевым тампоном с пергаментом и помещают в термокамеру при температуре (48±1)°С. Выдерживают в течение 9 суток, встряхивая в течение первых суток через каждые 10 минут по минуты, а в последующие дни через каждые 1,5 часа по 4 минуты. Динамику ферментативного процесса контролируют по нарастанию аминного азота, на 9 сутки увеличение данного показателя прекращается, термокамеру отключают, гидролизат оставляют на сутки. Затем фильтруют через фильтровальное полотно. В фильтрат добавляют 2% хлороформа, пробкуют резиновой пробкой, хранят при температуре от 2 до 8°С. Используют по мере необходимости.

При этом ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, получают при следующем соотношении ингредиентов, г/л:

Полученный ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, обладает высокой биологической активностью, он не имеет осадка и хорошо фильтруется.

Пример №4. Молочный тибетский гриб, в количестве 0,325 кг, тщательно промывают в проточной водопроводной воде (предварительно поместив в марлю).

Промытый грибок помещают в стеклянную емкость и добавляют 0,975 л (1:3) водопроводной воды, подогретой до температуры (45±1)°С. Смесь расщелачивают Nа2СО3 до рН 8,7-8,9 по фенолфталеину. Затем загружают измельченную поджелудочную железу КРС в количестве 0,155 кг. К общему объему содержимого добавляют 2% хлороформа, запробковывают плотно ватно-марлевым тампоном с пергаментом и помещают в термокамеру при температуре (48±1)°С. Выдерживают в течение 10 суток, встряхивая в течение первых суток через каждые 15 минут по минут, а в последующие дни через каждые 2 час по 5 минут. Динамику ферментативного процесса контролируют по нарастанию аминного азота, на 10 сутки увеличение данного показателя прекращается, термокамеру отключают, гидролизат оставляют на сутки. Затем фильтруют через фильтровальное полотно. В фильтрат добавляют 2% хлороформа, пробкуют резиновой пробкой, хранят при температуре от 2 до 8°С. Используют по мере необходимости.

При этом ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, получают при следующем соотношении ингредиентов, г/л:

Полученный ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, обладает высокой биологической активностью, показатели аминного азота и сухого остатка высокие. Гидролизат не имеет осадка и хорошо фильтруется.

Пример №5. Молочный тибетский гриб, в количестве 0,33 кг, тщательно промывают в проточной водопроводной воде (предварительно поместив в марлю).

Промытый грибок помещают в стеклянную емкость и добавляют 0,99 л (1:3) водопроводной воды, подогретой до температуры (45±1)°С. Смесь расщелачивают Na2CO3 до рН 8,7-8,9 по фенолфталеину. Затем загружают измельченную поджелудочную железу КРС в количестве 0,16 кг. К общему объему содержимого добавляют 2% хлороформа, запробковывают плотно ватно-марлевым тампоном с пергаментом и помещают в термокамеру при температуре (50±1)°С. Выдерживают в течение 10 суток, встряхивая в течение первых суток через каждые 15 минут по минут, а в последующие дни через каждые 2 часа по 5 минут. Динамику ферментативного процесса контролируют по нарастанию аминного азота, на 10 сутки увеличение данного показателя прекращается, термокамеру отключают, гидролизат оставляют на сутки. Затем фильтруют через фильтровальное полотно. В фильтрат добавляют 2% хлороформа, пробкуют резиновой пробкой, хранят при температуре от 2 до 8°С, используют в течение 10 дней.

При этом ферментативный гидролизат из тибетского молочного гриба, используемый в качестве стимулятор роста, получают при следующем соотношении ингредиентов, г/л:

При такой рецептуре ферментативный гидролизат, используемый в качестве стимулятора роста примера №5 по биологической ценности и показателю аминного азота не уступает гидролизату, приготовленному по примеру №4. Однако его недостатками являются низкий показатель сухого остатка, непродолжительный срок хранения и увеличение стоимости способа.

Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 3 и 4, так как полученный гидролизат и стимулятор роста на его основе обладают высокой биологической активностью.

Важнейшим критерием качества ферментативного гидролизата из тибетского молочного гриба (ТМГ) и критерием особенностей культуральных свойств составляющих его микроорганизмов является содержание в нем аминокислот.

При определении суммарного содержания аминокислот в ферментативном гидролизате ТМГ (2 пробы) обнаружены: лизин солянокислый, пролин, валин, треонин, фенилаланин и другие неразделенные аминокислоты. Определялось суммарное содержание аминокислот в пересчете на определенную аминокислоту:

- содержание аминокислот в пересчете на метионин:

- содержание аминокислот в пересчете на валин:

- содержание аминокислот в пересчете на треонин:

- относительно аспарагиновой кислоты получено:

- содержание аминокислот в пересчете на фенилаланин:

Общее суммарное количество аминокислот, обнаруженных в ферментативном гидролизате ТМГ, составляет в пробе №1 - 22,39%, в пробе №2 - 19,89%.

Таким образом, ферментативный гидролизат ТМГ богат аминокислотами, что позволяет считать его достаточно качественным стимулятором роста.

При помощи качественных реакций на некоторые витамины в ферментативном гидролизате ТМГ нами были обнаружены следующие: тиамин (В1), рибофлавин (В2), никотиновая кислота (РР или В5), витамин А.

Было проведено химическое исследование полученного стимулятора роста на наличие аминокислот, углеводов, а так же микро- и макроэлементов.

На основании проведенных исследований получены следующие результаты Некоторые химические компоненты стимулятора роста из тибетского молочного гриба, приготовленного по примерам № 3- Химические компоненты / качественные показатели Количественные показатели Определение активности гидролизата способом К.Бакирджиева.

Берут 2 флакона стимулятора роста. В первую пробирку помещают 500 мг дрожжей, 19,5 мл глюкозы и 0,5 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида (контроль). Во вторую и третью пробирки - 500 мг дрожжей, 19,5 мл глюкозы, 2,5мл гидролизата.

Пробирки плотно укупориваются резиновыми пробками с вставленными в них изогнутыми стеклянными трубками, через которые выходит жидкость, вытесняемая углекислым газом, вырабатываемым дрожжами в процессе их жизнедеятельности.

Объем вытесняемой жидкости в пробирках определяют каждые 24 часа.

Разница в объеме вытесняемой жидкости между контрольной пробиркой и тестовыми составила 30%. Это указывает на высокую биологическую активность стимулятора роста.

Для подтверждения биологической активности стимулятора роста из тибетского молочного гриба провели исследование его химического состава, испытали на активность способом К.Бакирджиева (Калашник И.А. Стимулирующая терапия в ветеринарии / И.А.Калашник. - 2-е изд., перераб. и доп. - К.: Урожай. - 1990. - 160 с.), а также провели исследование стимулятора роста в качестве основы микробиологических питательных сред для наращивания бактериальной массы лактобактерий. Для этого в среду МРС-1 (жидкая) добавили стимулятор роста из тибетского молочного гриба в разных концентрациях: первая 0,5, вторая 1,0, третья 1,5, четвертая 2,0.

При выполнении работы для тестирования ростовых качеств питательных сред были использованы 3 музейных тест-штамма микроорганизмов, полученных из ГИСК имени Л.А.Тарасовича: L. plantarum 8Р-А3, L. fermentum 90T-C4 и L. acidophilus EP 317Все штаммы имели типичные морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства.

Приготовление питательной среды с использованием гидролизата из тибетского молочного гриба в качестве стимулятора роста лактобактерий заключается в следующем. В 200 мл дистиллированной воды последовательно растворяют: 50 мл марганца сернокислого, 200 мл магния сернокислого, 2 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 200 мл цистеина солянокислого, агар микробиологический и индикатор хлорфенол красный. 10 г пептона отдельно растворяют в небольшом объеме горячей дистиллированной воды и вносят в 1 мл Твин - 80. Тщательно перемешивают раствор пептона с Твином - 80 и добавляют в вышеуказанную смесь.

Доводят объем жидкости дистиллированной водой до 1000 мл, РН среды не требует корректировки и устанавливается на уровне 6,2-6,6. Стерилизация 15 минут при t 120±3°C и давлении 1,0±0,1 кгс/см 2 (0,10±0,01) МПа. Затем добавляют гидролизат тибетского молочного гриба в различных концентрациях.

Осуществление изобретения Примеры конкретного добавления гидролизата из тибетского молочного гриба как стимулятора роста лактобактерий Пример №1. В 200 мл дистиллированной воды последовательно растворяют: 50 мл марганца сернокислого, 200 мл магния сернокислого, 2 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 200 мл цистеина солянокислого, агар микробиологический и индикатор хлорфенол красный. Отдельно растворяют 10 г пептона в небольшом объеме горячей дистиллированной воды и вносят в 1 мл Твин - 80. Тщательно перемешивают раствор пептона с Твином - 80 и добавляют в вышеуказанную смесь.

Доводят объем жидкости дистиллированной водой до 1000 мл, РН среды не требует корректировки и устанавливается на уровне 6,2-6,6. Стерилизация 15 минут при t 120±3°С и давлении 1,0±0,1 кгс/см 2 (0,10±0,01) МПа. Затем добавляют 0,5 мл гидролизата тибетского молочного гриба.

Пример №2. В 200 мл дистиллированной воды последовательно растворяют: 50 мл марганца сернокислого, 200 мл магния сернокислого, 2 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 200 мл цистеина солянокислого, агар микробиологический и индикатор хлорфенол красный. Отдельно растворяют 10 г пептона в небольшом объеме горячей дистиллированной воды и вносят в 1 мл Твин - 80. Тщательно перемешивают раствор пептона с Твином - 80 и добавляют в вышеуказанную смесь.

Доводят объем жидкости дистиллированной водой до 1000 мл, РН среды не требует корректировки и устанавливается на уровне 6,2-6,6. Стерилизация 15 минут при t 120±3°С и давлении 1,0±0,1 кгс/см 2 (0,10±0,01) МПа. Затем добавляют 1 мл гидролизата тибетского молочного гриба.

Пример №3. В 200 мл дистиллированной воды последовательно растворяют: 50 мл марганца сернокислого, 200 мл магния сернокислого, 2 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 200 мл цистеина солянокислого, агар микробиологический и индикатор хлорфенол красный. Отдельно растворяют 10 г пептона в небольшом объеме горячей дистиллированной воды и вносят в 1 мл Твин - 80. Тщательно перемешивают раствор пептона с Твином - 80 и добавляют в вышеуказанную смесь.

Доводят объем жидкости дистиллированной водой до 1000 мл, РН среды не требует корректировки и устанавливается на уровне 6,2-6,6. Стерилизация 15 минут при t 120±3°C и давлении 1,0±0,1 кгс/см 2 (0,10±0,01) МПа. Затем добавляют 1,5 мл гидролизата тибетского молочного гриба.

Пример № 4. В 200 мл дистиллированной воды последовательно растворяют: 50 мл марганца сернокислого, 200 мл магния сернокислого, 2 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 200 мл цистеина солянокислого, агар микробиологический и индикатор хлорфенол красный. Отдельно растворяют 10 г пептона в небольшом объеме горячей дистиллированной воды и вносят в 1 мл Твин - 80. Тщательно перемешивают раствор пептона с Твином - 80 и добавляют в вышеуказанную смесь.

Доводят объем жидкости дистиллированной водой до 1000 мл, РН среды не требует корректировки и устанавливается на уровне 6,2-6,6. Стерилизация 15 минут при t 120±3°С и давлении 1,0±0,1 кгс/см 2 (0,10±0,01) МПа. Затем добавляют 2 мл гидролизата тибетского молочного гриба.

Результаты выращивания лактобактерий на питательной среде (ПС) с добавлением ферментативного гидролизата тибетского молочного гриба в качестве стимулятора роста лактобактерий, в разных концентрациях и МРС-среды, представлены в

Похожие работы:

«Российская Академия наук Институт лингвистических исследований РАН Российский Гуманитарный Научный Фонд Девятая Конференция по типологии и грамматике для молодых исследователей Посвящается 80-летию В. С. Храковского Материалы Санкт-Петербург 2012 1 СОДЕРЖАНИЕ П. С. Антонова (Москва) Особая группа наречий состояния в русском и польском языках. 6 П. М. Аркадьев (Москва) Неканоническое кодирование объекта при инфинитиве в литовском языке: типология и диахрония О. И. Беляев (Москва)...»

«Мар Байджиев Сказание о Манасе Поэтическое переложение первой части трилогии кыргызского эпоса Манас Издание второе Фонд Седеп Бишкек – 2010 1 УДК 398 ББК 82.3 (2 Ки) Б 18 Байджиев М. Сказание о Манасе: Поэтическое переложение первой Б 18 части трилогии кырг. эпоса Манас. –2-е изд. Предисл. Б.М. Юнусалиева; Ред. и авт. послесл. Г.Н. Хлыпенко; Илл. Т.Т. Герцена. – Б.: 2010. – 308 с. ISBN 978-9967-13-497-3 Cказание о Манасе – авторское произведение современного писателя-билингва Мара Байджиева....»

«Региональная консультация с национальными комиссиями по делам ЮНЕСКО в странах Азии и Тихого океана по подготовке Проекта программы и бюджета на 2012-2013 гг. (36 C/5) Чханвон, Республика Корея, 21-24 мая 2010 г. Введение В проводимой раз в два года региональной консультации вместе с представителями Перу, Российской Федерации и Турции приняли участие делегации национальных комиссий по делам ЮНЕСКО следующих 42 государств-членов из региона Азии и Тихого океана: Австралии, Афганистана, Бангладеш,...»

«СОЗДАНИЕ И МОДЕРНИЗАЦИЯ ИНФРАСТРУКТУРЫ ДЛЯ РЕАЛИЗАЦИИ ШЕЛЬФОВЫХ ПРОЕКТОВ Возможности государственно-частного партнерства IV международная конференция Освоение Арктического шельфа: шаг за шагом Ирина Минская Эксперт 29 сентября 2011 Содержание • Взаимосвязь реализации шельфовых проектов и инфраструктуры прибрежного региона • Преимущества схем государственно-частного партнерства для создания инфраструктуры шельфовых проектов • Основные модели государственно-частного партнерства, применяемые для...»

«16 мая 1960 года Теодор Мейман сделал первый в мире лазер, по­ лучив генерацию красного когерентного света в кристалле рубина. Мейман выиграл лазерную гонку в соревновании с ведущими про­ мышленными лабораториями и университетами США, стремив­ шимися первыми получить когерентный свет после создания микро­ волнового усилителя - мазера. Сообщение Меймана о своем дости­ жении на пресс-конференции в Нью-Йорке 7 июля 1960 года вызвало сенсацию и было встречено многими учеными сначала с недовери­ ем....»

«РЕЗОЛЮЦИЯ VI Международной научно-практической конференции Заповедники Крыма – 2011. Биоразнообразие и охрана природы в АзовоЧерноморском регионе, 20–22 октября 2011 года, Симферополь, Крым В Конференции приняли участие более 150 человек из 30 городов Украины, России, Республики Беларусь и Грузии, из 45 учреждений и организаций: в том числе из 12 заповедников и национальных парков, 5 ботанических садов, 21 университетов и институтов, 7 общественных природоохранных организаций. На конференции...»

«Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ СОЦИАЛЬНЫЕ ИНТЕРЕСЫ, ПОТРЕБНОСТИ, ЖИЗНЕННЫЕ ПЕРСПЕКТИВЫ СОВРЕМЕННОЙ ТВОРЧЕСКОЙ МОЛОДЁЖИ для учителей СОШ и преподавателей СПО г. Москвы и Московской области СБОРНИК НАУЧНЫХ СТАТЕЙ Москва Российский университет дружбы народов 2013 Утверждено РИС Ученого совета Российского университета дружбы народов Издание подготовлено в рамках реализации Программы...»

«Author manuscript, published in Acta Linguistica Petropolitana.                                              7, 2 (2011) 343-380 В. Ф. Выдрин В. Ф. Выдрин ЭЛЕКТРОННЫЙ ГЛОССИРОВАННЫЙ КОРПУС ТЕКСТОВ ЯЗЫКА БАМАНА: ПЕРВЫЙ ЭТАП1 0. Введение В предыдущих публикациях, посвящнных электронному корпусу бамана [Выдрин 2008а; Выдрин 2008б; Vydrine 2008], были высказаны предварительные соображения о необходимости halshs-00867426, version 1 - 29 Sep и возможности создания такого корпуса, а также намечались...»

«C 2011/12 Rev.1 R Май 2011 года Organizacin Food and Organisation des de las Agriculture Nations Unies Naciones Unidas Organization pour para la of the l’alimentation Agricultura y la United Nations et l’agriculture Alimentacin КОНФЕРЕНЦИЯ Тридцать седьмая сессия Рим, 25 июня - 2 июля 2011 года Организация работы 37-й сессии Конференции Пояснительное резюме В настоящем документе содержится обзор вопросов, касающихся организации работы 37-й сессии Конференции ФАО (25 июня - 2 июля 2011 г.), в...»

«ПРАВИТЕЛЬСТВО ХАБАРОВСКОГО КРАЯ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ИНФОРМАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ И ТЕЛЕКОММУНИКАЦИЙ ИНФОРМИКА ТИХООКЕАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Межрегиональная научно-практическая конференция ИНФОРМАЦИОННЫЕ И КОММУНИКАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ОБРАЗОВАНИИ И НАУЧНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ (21–23 сентября 2009 года, г. Хабаровск) МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ Хабаровск 2009 ПРАВИТЕЛЬСТВО ХАБАРОВСКОГО КРАЯ ФГУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ...»

«Конференции и мероприятия www.angelo-ekaterinburg.ru events@angelo-ekaterinburg.ru +7 343 2726 555 Angelo Аэропорт-Отель Екатеринбург **** 620910 Россия, Екатеринбург Ул. Бахчиванджи 55а RU-620910 Ekaterinburg Bakhtchivandzhi St. 55a Tel. +7 343 2726 555 Fax +7 343 2726 560 www.angelo-ekaterinburg.ru info@angelo-ekaterinburg.ru Ваш личный менеджер по организации корпоративного мероприятия Your Personal event manager Наш отдел по организации мероприятий будет рад создать для вас и вашей компании...»

«OPEN SOCIETY INSTITUTE THE WORLD BANK GROUP 1818 H Street, NW, INSTITUTE FOR EDUCATIONAL POLICY Washington D.C. 20433, USA 1397 Budapest, Nador u. 11, P.O. Box 519, HUNGARY tel. +1 202 477 1238, fax: +1 202 477 6391 tel: +36 1 327 3862; fax: +36 1 327 3864 http:/./www.worldbank.org/ http://www.osi.hu/iep/ Совершенствование систем образования: Стратегические приоритеты в подготовке и повышении квалификации учителей, в осуществлении контроля качества их работы Будапешт, 3-6 декабря, 1998 г....»

«НЕКОММЕРЧЕСКОЕ ПАРТНЕРСТВО НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЭЛЕКТРОННОИНФОРМАЦИОННЫЙ КОНСОРЦИУМ (НП НЭИКОН) ИЗДАТЕЛЬСТВО ELSEVIER ПОДГОТОВКА И ИЗДАНИЕ НАУЧНОГО ЖУРНАЛА МЕЖДУНАРОДНАЯ ПРАКТИКА ПО ЭТИКЕ РЕДАКТИРОВАНИЯ, РЕЦЕНЗИРОВАНИЯ, ИЗДАНИЯ И АВТОРСТВА НАУЧНЫХ ПУБЛИКАЦИЙ Руководства Комитета по этике научных публикаций (Committee on Publication Ethics – COPE) и Издательства Elsevier СБОРНИК ПЕРЕВОДОВ МОСКВА • 2013 Подготовка и издание научного журнала. Международная практика по этике редактирования, рецензирования,...»

«БГУ ЧТО ДАЕТ БЕЛАРУСИ ГЛОБАЛИЗАЦИЯ? Материалы международной конференции Что на данный момент принесли Беларуси процессы глобализации, и какие дискуссии ведутся вокруг них? Минск БГУ 2004 Данная публикация не является выражением мнения Фонда имени Фридриха Эберта. За высказывания содержательного характера ответственность несет автор. Материалы международной конференции Что на данный момент принесли Беларуси процессы глобализации, и какие дискуссии ведутся вокруг них? / Фонд им. Ф. Эберта. Мн.:...»

«ROSTOV STATE UNIVERSITY OF ECONOMICS RELEVANT ISSUES OF DEVELOPMENT OF WORLD ECONOMY AND ECONOMY OF COUNTRIES OF THE SOUTHERN AND EASTERN EUROPE PROCEEDINGS OF THE st 1 INTERNATIONAL CONFERENCE FOR UNDERGRADUATE, GRADUATE AND POSTGRADUATE STUDENTS OF STUDENTS’ ASSOCIATION OF SOUTH AND EASTERN EUROPE AND THE BLACK SEA REGION ECONOMIC UNIVERSITIES (ASECU YOUTH) Organized by Rostov State University of Economics in cooperation with ASECU Rostov-on-Don, Russia September 12-18, Rostov-on-Don UDC 378...»

«Современные проблемы компьютерной (машинной) графики Ю.М. Баяковский, В.А. Галактионов Аннотация С самого начала формирования компьютерной (машинной) графики как самостоятельного научного направления Институт Прикладной Математики (ИПМ) им. М.В.Келдыша РАН являлся одним из ведущих научных центров в стране в этой области. В статье дается обзор основных работ по машинной графике и некоторых связанных с ней областей, проведенных в Институте почти за сорокалетний период. 1. Ранний этап Первые...»

«МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБУ НАЦИОНАЛЬНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР НАРКОЛОГИИ МАТЕРИАЛЫ Научно-практической конференции Актуальные вопросы оказания специализированной наркологической помощи населению 1–2 ноября 2012 г. МОСКВА АФФЕКТИВНЫЕ РАССТРОЙСТВА В КЛИНИКЕ АЛКОГОЛИЗМА У ЛИЦ С НЕУСТОЙЧИВЫМИ ЧЕРТАМИ ХАРАКТЕРА В ПРЕМОРБИДЕ Абрамочкина Д.Р. ГБУЗ Областная наркологическая больница 440039, г. Пенза, Заводское шоссе,4 E-mail: klubnichka2485@mail.ru Аффективные расстройства (от...»

«Утверждаю Председатель зонального методического объединения вузовских библиотек Хабаровского края и Амурской области Федореева Л.В. января 2014 г. ПЛАН МЕРОПРИЯТИЙ зонального методического объединения библиотек вузов Хабаровского края и Амурской области на 2014 год. № Наименование мероприятия Срок Ответственные. п/п исполнения Организаторы. 1. Планирование работы. Аналитическая деятельность библиотечной практики 1.1. Проведение заседаний Совета директоров зонального методического объединения...»

«Современные технологии катарактальной и рефрактивной хирургии2006: сборник научных статей по материалам VII Международной научно-практической конференции : Москва, 27-28 октября, 2006 г, 2006, Х. П Тахчиди, 5900836347, 9785900836348, Микрохирургия глаза, 2006 Опубликовано: 18th February 2013 Современные технологии катарактальной и рефрактивной хирургии2006: сборник научных статей по материалам VII Международной научно-практической конференции : Москва, 27-28 октября, 2006 г СКАЧАТЬ...»

«Теплый дом: РЕШЕНИЕ ПРОБЛЕМЫ ЕСТЬ У ЭНЕРГОСЕРВИСНОЙ КОМПАНИИ АНТАРЕС-ЭНЕРГОСИСТЕМ. ГОРИМ, БРАТЦЫ, ГОРИМ!: ТИПИЧНЫЙ ГОРОДСКОЙ ДОМ, ОБОГРЕВАЕТ НЕ СТОЛЬКО ЖИЛЬЦОВ, СКОЛЬКО ОКРУЖАЮЩУЮ СРЕДУ. КАК СДЕЛАТЬ ВСЕ НАОБОРОТ? АВГУСТ ЧИТАЙТЕ В МАТЕРИАЛЕ ТЕПЛЫЙ Группа компаний Олимп, ООО Альянс Групп, ООО Управляющая компания Жилремстрой, ООО Группа компаний Комфорт, 4 ЭТОГО НОМРА. ДОМ НА СТР. ООО АНТАРЕС-ГРУПП, ООО Служба заказчика, ООО ЧМХС РЭУ, ООО ЖЭО Горстройзаказчик Труд, достойный уважения Коммунальные...»









 
2014 www.konferenciya.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Конференции, лекции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.