WWW.KONFERENCIYA.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Конференции, лекции

 


RU 2 460 537 C2

(19) (11) (13)

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

(51) МПК

A61K 39/00 (2006.01)

A61P 31/04 (2006.01) C12N 9/00 (2006.01)

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА

ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

(21)(22) Заявка: 2009111537/10, 31.03.2009 (72) Автор(ы):

Левашов Павел Андреевич (RU), (24) Дата начала отсчета срока действия патента: Попов Денис Викторович (RU), 31.03.2009 Попова Валентина Михайловна (RU), Дятлов Иван Алексеевич (RU), Приоритет(ы):

Жиленков Евгений Леонидович (RU), (22) Дата подачи заявки: 31.03. Морозова Ольга Алексеевна (RU), RU (43) Дата публикации заявки: 10.01.2011 Бюл. № 1 Белогурова Наталья Георгиевна (RU), Пугачев Владимир Георгиевич (RU), (45) Опубликовано: 10.09.2012 Бюл. № 25 Репин Владимир Евгеньевич (RU), Клячко Наталья Львовна (RU), (56) Список документов, цитированных в отчете о Левашов Андрей Вадимович (RU), поиске: ПЛЕШАКОВА В.А. и др.

Седов Сергей Алексеевич (RU), Биолюминесцентное определение АТФ:

Легоцкий Сергей Александрович (RU) возможности использования ферментов для повышения специфичности определения (73) Патентообладатель(и):

бактериальных клеток. Тезисы Левашов Павел Андреевич (RU), международной конференции студентов, Попов Денис Викторович (RU), аспирантов и молодых ученых Попова Валентина Михайловна (RU), «Ломоносов-2008», секция Химия, подсекция Дятлов Иван Алексеевич (RU), «цикл наук

о живом», 8-11 апреля 2008, с.288. Жиленков Евгений Леонидович (RU), C RU 2239451 С2, 10.11.2004. Морозова Ольга Алексеевна (RU), C Белогурова Наталья Георгиевна (RU), Адрес для переписки:

Пугачев Владимир Георгиевич (RU), 127543, Москва, ул. Корнейчука, 51Б-99, Репин Владимир Евгеньевич (RU), пат.пов. В.Н. Кудрявцеву, рег.№ Клячко Наталья Львовна (RU), Левашов Андрей Вадимович (RU), Седов Сергей Алексеевич (RU), Легоцкий Сергей Александрович (RU)

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТОВ ФАГА SPZ

(57) Реферат: в 0,05 М трис-HCl буферную смесь с рН 7,0, Изобретение относится к биохимии. Способ содержащую рибонуклеазу, культивируют.

получения ферментов фага SPZ7 из коллекции Добавляют этилендиаминтетраацетат до федерального государственного научного концентрации 5 мМ и полученную суспензию RU учреждения "Государственный научный центр центрифугируют, супернатант отделяют от прикладной микробиологии и биотехнологии", осадка и фильтруют. Затем фермент осаждают заключается в следующем. В бульон добавлением (NH4 )2SO4 до 100%-ного Хоттингера вносят культуру Salmonella насыщения при температуре 0°С. Осадок белка enteritidis и подращивают ее. В полученную растворяют в буферной смеси, полученный культуру добавляют очищенный раствор фермента вносят в фаголизат SPZ7 и культивируют с аэрацией. хроматографическую колонку с декстраном Осаждают клетки Salmonella enteritidis на модифицированным, уравновешенным центрифуге. Полученные клетки помещают буферной смесью 0,02 М трис-HCl с рН 7,5,.: хроматографическое разделение производят со содержащие 70% общей активности фермента.

полученный раствор фермента подвергают множественные противопоказания и побочные дальнейшей очистке с помощью ионообменной эффекты, имеющие место при применении разделение производят при температуре 2-3°С

RUSSIAN FEDERATION

FEDERAL SERVICE

FOR INTELLECTUAL PROPERTY

(12)

Abstract

OF INVENTION

(54) METHOD FOR PRODUCING PHAGUE SPZ7 ENZYMES

(57) Abstract: ribonuclease, and cultured. It is added with

SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. mM; the prepared suspension is centrifuged; the the collection of Federal State Institution State fultered. Then the enzyme is deposited by adding Salmonella enteritidis is introduced into Hottinger's the prepared enzyme solution is introduced in a broth and grown. The grown culture is added with the chromatographic column with modified dextrane purified phagolysate SPZ7 and cultured with aeration. balanced by the buffer mixture tris-HCl 0.02 M pH= centrifuge. The produced cells are placed in tris-HCl ethylenediaminetetraacetate 1 mM; chromatographic the prepared enzyme solution is further purified by total enzyme activity are separated and combined.

ion-exchange chromatography. Chromatographic EFFECT: invention enables avoiding many separation is performed at temperature 2-3°C at contra-indications and side effects observed when eluent feed rate 35 ml/h; fractions containing 70% of using live phague preparations.

Изобретение относится к микробиологии, биохимии и медицине, в частности к способам получения действующего вещества из очищенного препарата фаговых бактериолитических ферментов для изготовления лечебных препаратов, в частности новых поколений антимикробных препаратов и высокоэффективных, высокоселективных диагностических систем.

Известен бактериофаг сальмонеллезный групп ABCDE жидкий и сухой с кислотоустойчивым покрытием (Bacteriophagum salmonellae gr. ABCDE liquidum et siccum cum indumento acidoresistentis) (см. http:

//www.medtrust.ru/pls/farmspravochnic/show.html? ontosObjectId=13606).

Состав его - фильтрат фаголизатов активный против наиболее распространенных возбудителей сальмонеллеза.

Фаговые препараты при применении не нарушают нормального биоценоза человека и незаменимы при устойчивости возбудителей к антибиотикам; могут применяться в комплексной терапии с другими лекарственными средствами.

Применение фаговых препаратов может вызывать различные реакции, например высыпание на коже, покраснение и воспаление (при подкожном и внутримышечном введении) и др. Противопоказаниями является индивидуальная непереносимость Недостатком известного технического решения является - множественные противопоказания и побочные эффекты при его применении.

Известно средство для применения в терапии (лечении) бактериальных инфекций, представляющее собой фермент эндолизин бактериофага SPZ7, разрушающий в том числе клетки Salmonella enteritidis (Плешакова В.А. и др. Биолюминесцентное определение АТФ: возможности использования ферментов для повышения специфичности определения бактериальных клеток. Тезисы международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2008», секция Химия, подсекция «цикл наук о живом», 8-11 апреля 2008, с.288).

Цель изобретения - получение фермента фага SPZ7.

Указанная цель достигается за счет того, что способ получения ферментов фага SPZ7 из коллекции федерального государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии", состоит в том, что в бульон Хоттингера вносят 18-часовую культуру Salmonella enteritidis с концентрацией 1·10 10 КОЕ/мл и подращивают ее при температуре 37°C с аэрацией в течение 2-3 часов, в полученную культуру добавляют очищенный фаголизат SPZ7 с концентрацией 1·10 14 БОЕ/мл и культивируют с аэрацией в течение 25 минут, осаждают клетки Salmonella enteritidis на центрифуге с ускорением 6500 g в течение 15 минут, полученные клетки помещают в 0,05 М трисНСl буферную смесь с рН 7,0, содержащую рибонуклеазу, культивируют при 37°С в течение 60 минут, добавляют этилендиаминтетраацетат до концентрации 5 мМ и полученную суспензию центрифугируют при ускорении 27000 g в течение 2,5 часов при температуре 5°С, супернатант отделяют от осадка и фильтруют через фильтры с диаметром пор 0,45, 0,22 и 0,1 мкм, затем раствор фермента осаждают добавлением (NH4)2SO4 до 100%-ного насыщения при температуре 0°С, осадок белка растворяют в буферной смеси 0,02 М трис-НСl с рН 7,5, содержащей 0,15 М NaCl и мМ этилендиаминтетраацетата, полученный раствор фермента вносят в хроматографическую колонку с декстраном модифицированным, уравновешенным буферной смесью 0,02 М трис-НСl с рН 7,5, содержащей 0,15 М NaCl и 1 мМ этилендиаминтетраацетата, хроматографическое разделение производят при температуре 2-3°С со скоростью подачи элюента 24 мл/ч, г полученный предварительно очищенный раствор фермента подвергают дальнейшей очистке с помощью ионообменной хроматографии на колонке размером 2 см 2 12 см со сшитым поливиниловым спиртом с функциональными группами диэтиламиноэтана, уравновешенным буферной смесью 0,02 М трис-НСl с рН 7,5, содержащей 0,15 М NaCl и 1 мМ этилендиаминтетраацетата, элюцию белков осуществляют градиентом концентрации NaCl 0-0,5 М, хроматографическое разделение производят при температуре 2-3°С со скоростью подачи элюента 35 мл/ч, выделяют и объединяют фракции, содержащие 70% общей активности фермента.

Раскрытие изобретения Способ получения фаговых ферментов фага SPZ7 из коллекции Федерального Государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" включает несколько этапов:

- получение раствора неочищенного фермента;

- получение предварительно очищенного раствора фермента (далее - препарат №1);

- получение очищенного раствора фермента (далее - препарат №2).

В качестве исходного материала для получения фаговых ферментов был использован фаг SPZ7 из коллекции федерального государственного научного учреждения "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии".

Получение раствора неочищенного фермента производится следующим образом. мл 18-часовой культуры Salmonella enteritidis (сведения о Salmonella enteritidis приведены, например на сайте http://dic.academic.ru/dic.nsf/medic2/41291) с концентрацией 1·1010 КОЕ/мл (колоний образующих единиц) вносятся в 3 л бульона Хоттингера (сведения о бульоне Хоттингера приведены, например на сайте http:

//dic.academic.ru/dic.nsf/medic2/50634) и подращиваются при температуре 37°C с аэрацией в течение 2-3 часов до концентрации 1·1010 КОЕ/мл. Далее 300 мл очищенного фаголизата (взвеси фаговых частиц в физиологическом растворе) с концентрацией 1·1014 БОЕ/мл (бляшкообразующих единиц) добавляются в приготовленную культуру Salmonella enteritidis и культивируются с аэрацией в течение 25 минут. Затем инфицированные фагом клетки осаждаются на центрифуге с ускорением 6500 g в течение 15 минут. Клетки ресуспендируются в 100 мл 0,05 М трисНСl буферной смеси рН 7,0, содержащей 7,5 мг рибонуклеазы (сведения о рибонуклеазах приведены, например на сайте http://slovari.yandex.ru/рибонуклеазы/ Естественные %20науки/Рибонуклеазы./). Суспензия культивируется при 37°С в течение 60 минут. При этом клетки разрушаются, выпуская литический фермент. Затем добавляется этилендиаминтетраацетат (далее - ЭДТА) до концентрации 5 мМ и суспензия центрифугируется при ускорении 27000 g в течение 2,5 часов при температуре 5°С. Супернатант отделяется от осадка, фильтруется через фильтры с диаметром пор 0,45, 0,22 и 0,1 мкм. Супернатант, содержащий бактериолитический фаговый фермент, исследуется на бактериолитическую активность и наличие свободного фага. Полученный раствор неочищенного фермента может храниться не более 1 суток в замороженном виде при температуре -20°С.

При получении препарата №1 используется следующая технология проведения первичной очистки раствора неочищенного фермента. Раствор фермента размораживается, и производится осаждение белка добавлением (NH4)2SO4 до 100%ного насыщения при температуре 0°С. В препараты с концентрацией общего белка менее 1 мг/мл перед осаждением дополнительно добавляется бычий сывороточный альбумин (сведения о бычем сывороточном альбумине приведены, например на сайте http://ru.

wikipedia.org/wiki/%D0%91%D1%8B%D1%87%D0%B8%D0%B9_%D1%81%D1%8B%D0% B2%D0%BE%D1%80%D0%BE%D1%82%D0%BE%D1%87%D0%BD%D1%8B%D0%B9_% D0%B0%D0%BB%D1%8C%D0%B1%D1%83%D0%BC%D0%B8%D0%BD) до достижения концентрации общего белка не менее 1 мг/мл. Добавленный бычий сывороточный альбумин практически полностью отделяется от активных фракций на стадии гельфильтрации. Осадок белка растворяется в 5-8 мл буферной смеси 0,02 М трис-НСl с рН 7,5, содержащей 0,15 М NaCl и 1 мМ ЭДТА. Полученный раствор фермента вносится в хроматографическую колонку 5 см 2 33 см с декстраном модифицированным (например, Sephadex G75 superfine), уравновешенную буферной смесью 0,02 М трис-НСl с рН 7,5, содержащей 0,15 М NaCl и 1 мМ ЭДТА.

Хроматографическое разделение производится при температуре 2-3°С. Скорость подачи элюента 24 мл/ч. Фракции, содержащие 60% общей активности фермента, объединяются, замораживаются и хранятся при температуре -20°С. Полученный препарат №1 может храниться в таком замороженном виде не менее 2 недель без потери активности.

Полученный препарат №1 подвергается дальнейшей очистке с помощью ионообменной хроматографии на колонке размером 2 см 2 12 см со сшитым поливиниловым спиртом с функциональными группами диэтиламиноэтана (например, DEAE-Toyopearl 650M), уравновешенной буферной смесью 0,02 М трис-НСl с рН 7,5, содержащей 0,15 М NaCl и 1 мМ ЭДТА. Элюция белков осуществляется градиентом концентрации NaCl 0-0,5 М (5050 мл). Хроматографическое разделение производится при температуре 2-3°С. Скорость подачи элюента 35 мл/ч. Фракции, содержащие 70% общей активности фермента, объединяются, замораживаются и хранятся при температуре -20°С. Полученный препарат №2 может храниться в замороженном виде при температуре -20°С без потери активности не менее 10 месяцев.

Размороженный препарат №2 сохраняет свою бактериолитическую активность в течение не менее 45 суток при температурах 20-37°С.

В качестве основного субстрата выбирают хозяина фага - живые клетки Salmonella enteritidis, в качестве дополнительного субстрата - живые клетки Escherichia coli (сведения о Escherichia coli приведены, например на сайте http:

//lingvo.yandex.ru/Escherichia%20coli%20/). При этом субстрат Escherichia coli используется для протоколирования процесса очистки фермента, так как не обнаружено никаких фракций, активных только по отношению к Salmonella enteritidis и неактивных по отношению к Escherichia coli и наоборот.

Для целей определения бактериолитической активности ферментов клетки Salmonella enteritidis и Escherichia coli выращивались на гидролизате рыбной муки с агаром (ГРМ-агаре) при температуре 37°С в течение 14 часов. Выращенные клетки суспендировались в 0,9% растворе NaCl, центрифугировались с ускорением g в течение 5 минут, затем ресуспендировались в 0,9% растворе NaCl, при этом концентрация клеток в данной суспензии подбирается такой, чтобы при разведении в 50 раз ее оптическая плотность составляла бы 0,5-0,6 при длине волны 650 нм. Для измерений должны использоваться свежевыращенные клетки или клетки, однократно замороженные жидким азотом, которые хранились при температуре -70°С не более месяца. В течение эксперимента по определению бактериолитической активности ферментов (длительностью до 1 часа) препарат субстрата клеток должен сохраняться В качестве способа измерения бактериолитической активности в сравниваемых препаратах фермента выбрана турбидиметрия, а именно измерение падения оптической плотности (D) суспензии клеток при длине волны 650 нм. Для суспензий









Похожие работы:

«26 апреля 2013 г., XVI Научно-практическая конференция Инжиниринг предприятий и управление знаниями АРХИТЕКТУРА ПРИНЯТИЯ РЕШЕНИЙ ДЛЯ ЭФФЕКТИВНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ИТ-АНАЛИТИКИ В НОВОЙ ПАРАДИГМЕ ИНЖИНИРИНГА ПРЕДПРИЯТИЙ Зиндер Евгений Захарович, президент Фонда ФОСТАС, e-mail: ezinder@fostas.org Николаева Татьяна Сергеевна, Intern BearingPoint, магистрант МФТИ, e-mail: tatyanika@gmail.com 26.04.2013 -1Тенденции в организации принятия решений на предприятиях разных отраслей В процессе принятия решений...»

«XIII ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ СПЕЦИАЛИСТОВ ГЕОЛОГИ XXI ВЕКА памяти профессора В.Г. Очева МАТЕРИАЛЫ г. Саратов, 11-13 октября 2012 года Саратов, 2012 САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.Г. ЧЕРНЫШЕВСКОГО ГЕОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ НАУЧНОЕ ОБЩЕСТВО СТУДЕНТОВ И АСПИРАНТОВ СГУ МАТЕРИАЛЫ XIII ВСЕРОССИЙСКОЙ НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ СТУДЕНТОВ, АСПИРАНТОВ И МОЛОДЫХ СПЕЦИАЛИСТОВ, ПОСВЯЩЕННОЙ ПАМЯТИ ПРОФЕССОРА В.Г. ОЧЕВА г....»

«Согласовано Утверждаю Председатель Профкома Ректор ФГОУ ВПО ФГОУ ВПО ВЕЛИКОЛУКСКАЯ ГСХА ВЕЛИКОЛУКСКАЯ ГСХА _ З.И.Курбатова В.В.Морозов _2008г. _2008г. Положение о порядке установления выплат стимулирующего характера за счет средств федерального бюджета и средств от приносящей доход деятельности ФГОУ ВПО ВЕЛИКОЛУКСКАЯ ГСХА Принято на конференции трудового коллектива ФГОУ ВПО ВЕЛИКОЛУКСКАЯ ГСХА _ _2008г. 1.Общая часть В соответствии с Трудовым Кодексом Российской Федерации ( с учетом изменений и...»

«ОАО ЦЕНТРАЛЬНАЯ ГЕОФИЗИЧЕСКАЯ ЭКСПЕДИЦИЯ ООО НПО ГЛУБИННАЯ НЕФТЬ I-е КУДРЯВЦЕВСКИЕ ЧТЕНИЯ ВСЕРОССИЙСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ ПО ГЛУБИННОМУ ГЕНЕЗИСУ НЕФТИ Современное состояние теории происхождения, методов прогнозирования и технологий поисков глубинной нефти ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ МОСКВА – 2012 Кудрявцев Николай Александрович (21 октября 1893 - 12 декабря 1971) Закон Н.А.Кудрявцева: Во всех без исключения нефтегазоносных районах, где нефть или газ имеются в каком-либо горизонте разреза, в том или ином...»

«23-06-2011 1 ПОЧЕМУ СТАЛИН ЗАЩИЩАЛ ЛЫСЕНКО М. Алгоритм. http://www.rusproject.org/books/mironin/stalin_i_lysenko Варианты (ЛЫСЕНКО И АФЕРА ГЕНЕТИКОВ) Сигизмунд Сигизмундович Миронин Человек подобен фонтану. Все та же форма – но всегда новая вода (Гераклит) СОДЕРЖАНИЕ АННОТАЦИЯ ВВЕДЕНИЕ КАК РОДИЛАСЬ ЭТА КНИГА? ГЛАВА 1. КТО НАЧАЛ АТАКУ ПЕРВЫМ? 1.1. ПРЕДВОЕННЫЕ ДИСКУССИИ 1.2. НОВОЕ НАПАДЕНИЕ ФОРМАЛЬНЫХ ГЕНЕТИКОВ НА МИЧУРИНЦЕВ 1.3. ГОРЯЧАЯ ОСЕНЬ 1947 ГОДА 1.4. НАДО ЛИ ВЫНОСИТЬ СОР ИЗ ИЗБЫ? 1.5....»

«Хищные птицы в динамической среде ІІІ тысячелетия: состояние и перспективы СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ НАСЕЛЕНИЯ СОКОЛООБРАЗНЫХ РАЗНЫХ ПРИРОДНО-ЛАНДШАФТНЫХ КОМПЛЕКСОВ ИВАНОВСКОЙ ОБЛАСТИ В.Н. Мельников Ивановский государственный университет (Россия) ivanovobirds@mail.ru The comparative analysis of Falconiformes populations in the territories of different landscape complexes of Ivanovo region. – Melnikov V.N. – The information on estimation of the birds of prey species number in 20 stationary...»

«К учету тенденций изменения вариабельности и экстремальности климата в выработке стратегий адаптации А.М. Стерин, А. А. Тимофеев (ГУ ВНИИГМИ-МЦД) Г. Обнинск, Российская Федерация Электронная почта: STERIN@METEO.RU Taking into account the trends for the change of climate variability and extremality in formulating adaptation strategies А.М. Sterin and А. А. Тimofeev (SE “RIHMI-WDC”) Obninsk, the Russian Federation E-mail: STERIN@METEO.RU Конференция глоб изм климата 20.12.2009 адаптация ноябрь...»

«ДЕПАРТАМЕНТ ОБРАЗОВАНИЯ ГОРОДА МОСКВЫ ВОСТОЧНОЕ ОКРУЖНОЕ УПРАВЛЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ Государственное бюджетное образовательное учреждение города Москвы средняя общеобразовательная школа с углубленным изучением отдельных предметов № 1690 Преображенская школа Тезисы докладов X ежегодной открытой окружной конференции проектных и исследовательских работ Эврика! для обучающихся 1-7 классов 2014 1 Открытия делает тот, кто смотрит на тоже самое, что и другие, но видят то, чего другие не видят. Петр Капица,...»

«ИНСТИТУТ ИЗУЧЕНИЯ ИЗРАИЛЯ И БЛИЖНЕГО ВОСТОКА БЛИЖНИЙ ВОСТОК И СОВРЕМЕННОСТЬ Сборник статей ВЫПУСК ДЕВЯТНАДЦАТЫЙ Москва 2003 Научное издание Ближний Восток и современность. Сборник статей (выпуск девятнадцатый) М., 2003 290 стр. М.Р.Арунова Ответственный редактор Сборник посвящен широкому кругу проблем, связанных с ситуацией на Ближнем и Среднем Востоке. Предлагаемые статьи являются исследованием конкретных вопросов странового и общего порядка, имеющих актуальное научное и практическое значение...»

«Министерство образования и наук и Российской Федерации Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова Факультет Вычислительной математики и кибернетики СОВЕТ МОЛОДЫХ УЧЁНЫХ ВМК МГУ Сборник тезисов XV Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных ЛОМОНОСОВ-2008, секция ВЫЧИСЛИТЕЛЬНАЯ МАТЕМАТИКА И КИБЕРНЕТИКА Москва МГУ им. М. В. Ломоносова, 7–11 апреля 2008 г. 2 СОДЕРЖАНИЕ Высокоуровневая система программирования графических процессоров Адинец Андрей...»

«ТЕЗИСЫ XVI международной конференции РАРЧ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ РЕПРОДУКТИВНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ СЕГОДНЯ И ЗАВТРА Ростов-на-Дону 7 – 9 сентября 2007 года ОГЛАВЛЕНИЕ ЖЕНСКОЕ БЕСПЛОДИЕ И ВРТ Василевская С.Е., Боярский К.Ю., Иванов А.В КЛИНИЧЕСКИЕ И ЭМБРИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КОНТРОЛИРУЕМОГО ЕСТЕСТВЕННОГО ЦИКЛА ЭКО-ПЭ8 Гайворонская О.С., Зорова Л.Д. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЭКО В ЕЦ ПО МОДИФИЦИРОВАННОМУ ПРОТОКОЛУ И ЦИКЛОВ ЭКО СО СТАНДАРТНЫМ ДЛИННЫМ ПРОТОКОЛОМ ССО У ПАЦИЕНТОК С НАРУЖНОГЕНИТАЛЬНЫМ ЭНДОМЕТРИОЗОМ...»

«Муниципальное автономное общеобразовательное учреждение лицей № 8 имени Н.Н. Рукавишникова г.Томска Научное общество обучающихся Большая восьмерка СБОРНИК МАТЕРИАЛОВ XII НАУЧНО - ПРАКТИЧЕСКОЙ КОНФЕРЕНЦИИ Томск 2013 1 dddd Составитель: Дихтяренко О.В. – заместитель директора по НМР Корректор: Бурцева Е.В. - учитель русского языка и литературы Под общей редакцией: Буркаевой Н.Н., директора лицея № 8, Заслуженного учителя РФ Рецензенты: Дихтяренко О.В. – заместитель директора по НМР Бурцева Е.В.,...»

«INTERNATIONAL CONFERENCE PLANT CELL BIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY Minsk, February 13–15, 2013 2013 581.17(06)+604.6:58(06) 28.54 43+30.16 43 48 :.,.,.,.,.,.,. :....-.., 13–15. 2013.,,International conference Plant Cell Biology and Biotechnology, Minsk, February 13–15, 2013 /. :. ISBN 978-985-553-097-9. -, 13–15 2013.,,., -,. 581.17(06)+604.6:58(06) 28.54 43+30. ISBN 978-985-553-097-9 ©, Организационный комитет: В.М. Юрин, профессор, д.б.н. (почетный председатель) В.В....»

«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) (11) (13) RU 2 458 986 C2 (51) МПК C12N 9/22 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ (21)(22) Заявка: 2008120324/10, 23.05.2008 (72) Автор(ы): Четверин Александр Борисович (RU), (24) Дата начала отсчета срока действия патента: Четверина Елена Владимировна (RU), 23.05.2008 Фалалеева Марина Витальевна (RU), Угаров Виктор Иванович (RU), Приоритет(ы): Узлова Елена Александровна (RU) (22) Дата подачи заявки: 23.05....»

«Сервис виртуальных конференций Pax Grid ИП Синяев Дмитрий Николаевич Биоразнообразие наземных и водных животных и зооресурсы I Всероссийская научная Интернет-конференция Казань, 12 февраля 2013 года Материалы конференции Казань ИП Синяев Д. Н. 2013 УДК 574(082) ББК 28.088 Б63 Б63 Б и о р а з н о о б р а з и е н а з е м н ы х и в о д н ы х ж и в о т н ы х и зооресурсы.[Текст]: I всероссийская научная Интернет-конференция : материалы конф. (Казань, 12 февр. 2013 г.) / Сервис виртуальных...»

«1 Выпуск № 7 /2013 СОДЕРЖАНИЕ НОМЕРА СОДЕРЖАНИЕ НОМЕРА ОДЕРЖАНИЕ НОМЕРА КОЛОНКА ГЛАВНОГО РЕДАКТОРА.. 3 ДНЕВНИК СОБЫТИЙ:.. 4-7 ТВ безмолвствует. Аптечное сообщество не дождалось ответа от 1 канала.. 4 Акция ЗА налоговые каникулы для начинающих предпринимателей.. 4 Аптечная Палата Алтая поддерживает.. 5 Новый сайт Ассоциации СоюзФарма – курс на интерактивность.. 6-7 ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЕ ПРОГРАММЫ ААУ Летняя конференция для специалистов аптек в Краснодаре.. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР РЫНКА.. 9-...»

«Современные проблемы компьютерной (машинной) графики* Ю.М. Баяковский, В.А. Галактионов С самого начала формирования компьютерной (машинной) графики как самостоятельного научного направления Институт прикладной математики (ИПМ) им. М.В.Келдыша РАН являлся одним из ведущих научных центров в стране в этой области. В лекции дается обзор основных работ по машинной графике и некоторых связанных с ней областей, проведенных в Институте почти за сорокалетний период. 1. Ранний этап Первые признаки...»

«Международная научно-практическая конференция 1 Молодежь в постиндустриальном обществе 25 декабря 2012 года УДК 374.32 А.Ю. Морковина Институт информационных коммуникаций и библиотек МГУКИ (г. Москва) ДУХОВНО-НРАВСТВЕННОЕ ВОСПИТАНИЕ ЧИТАТЕЛЕЙ ДЕТСКО-ЮНОШЕСКИХ БИБЛИОТЕК (НА ПРИМЕРЕ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТНОЙ БИБЛИОТЕКИ ДЛЯ ДЕТЕЙ И ЮНОШЕСТВА ИМ. А.С. ПУШКИНА) Высказываются опасения, что будущее поколение, получая образование без внимания к духовно-нравственному воспитанию, может вырасти...»

«КАК СТАВИТЬ БЕЗУМНЫЕ ЗАДАЧИ Черновик тезисов доклада How to Formulate Crazy Problems на конференцию ETRIA TRIZ Future Conference 2010, Бергамо, Италия, 3-5 ноября 2010 г. Владимир Герасимов gerasimovladimir@gmail.com Some men see things as they are and say – why? I dream things that never were and say – why not? George Bernard Shaw Некоторые люди видят вещи такими, какие они есть, и при этом еще и спрашивают: Почему? Я размышляю о вещах, которых никогда не было, и при этом спрашиваю: А почему...»

«145 Дифференциальные и интегральные уравнения МЕТОДЫ АНАЛИЗА СТОХАСТИЧЕСКОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МНОГОКРАТНЫХ ЦИКЛОВ Губкин А.А.1 УрГУ, Екатеринбург e-mail: andreygubkin@mail.ru Исследуется стохастическая чувствительность предельных циклов систем нелинейных дифференциальных уравнений. Предлагаются метод построения многократных циклов и алгоритм быстрой оценки их чувствительности. Возможности методов демонстрируются при анализе изменения чувствительности в цепи бифуркаций удвоения периода....»









 
2014 www.konferenciya.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Конференции, лекции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.